HPLC法测定复方敏立通片中各组分的含量

摘要 采用反相HPLC法，以醋酸氟氢松为内标，在氰基柱上以水—甲醇—乙腈—三乙胺(80∶ 20∶20∶1.4，用磷酸调整pH为7.5)为流动相，检测波长为254nm，同时测定复方敏立通片中 马来酸氯苯那敏和倍他米松的含量。方法简便，快速准确，各组分与内标有良好线性关系和 分离度。平均回收率马来酸氯苯那敏为99.2％(RSD＝0.7％)，倍他米松为100.9％(RSD＝0.6％)，n=7。关键词：HPLC法 马来酸氯苯那敏 倍他米松 醋酸氟氢松 复方敏立通片 复方敏立通片由马来酸氯苯那敏(2mg)和倍他米松(0.25mg)组成，具有消炎、抗过敏等药理作用 。香港麒麟药厂生产，其含量测定方法尚未见公开报道。本文探索用HPLC法进行分离测定，在 氰基柱上以醋酸氟氢松为内标，考察了样品中各组分的线性关系，并进行了回收率试验及样 品含量测定，结果表明，本法简便迅速，结果准确。 1 仪器与试药 1.1 仪器 Waters 510输液泵，Waters 490紫外检测器，Rheodyne 7125定量进样阀，Waters 740色谱数据处理机。 1.2 样品与试剂 对照品倍他米松、马来酸氯苯那敏符合中国药典1995年版的规定，在本文色谱 条件下无杂质峰出现，赋形剂和样品由香港麒麟药厂提供，醋酸氟氢松为化学原料，含量为 99.9％，乙腈(色谱纯)，甲醇、三乙胺和磷酸均为分析纯，水为重蒸水。2 色谱条件与色谱参数 2.1 色谱条件 色谱柱：Spherisorb CN(10μm，4.6mm×250mm)，大连化物所；流动相：水— 甲醇—乙腈—三乙胺(80∶20∶20∶1.4，用磷酸调整pH为7.5)；流速：1.5mL/min；检测波 长：254nm；灵敏度：0.5AUFS；柱温：30℃；进样量：20μL。 2.2 色谱参数 在本实验条件下，各组分色谱分离参数见表1，色谱图见图1。

表1 色谱参数

图1 样品与内标物色谱图
1.马来酸 2.倍他米松
3.醋酸氟氢松 4.氯苯那敏

3 方法与结果 3.1 内标溶液的制备 称取醋酸氟氢松适量，加甲醇溶解并制成1g/L的溶液，备用。 3.2 线性关系 精密称取马来酸氯苯那敏对照品400mg及倍他米松对照品50mg，置100mL容量瓶中，用 流动相溶解并稀释至刻度，摇匀。精密取上述溶液1、2、3、5、7、9、10mL，分别置100mL量瓶中 ，各精密加入内标溶液5mL，用流动相稀释至刻度，摇匀。照上述色谱条件进样20μL，以组分 与内标物的峰面积之比为纵坐标，以各组分的浓度(mg/L)为横坐标，求出马来酸氯苯那敏及倍 他米松的线性回归方程分别为：Y＝9.002×10^-3X-7.6×10^-3 r＝1.0000Y＝2.540×10^-2X-2.3×10^-3 r＝1.0000 结果表明，马来酸氯苯那敏浓度在40.2～402.0mg/L、倍他米松浓度在5.17～51.70mg/L范围内线性关系 良好。 3.3 精密度试验 在上述色谱条件下取样品溶液重复进样，测定样品峰面积与内标峰面积比值， 计算各组分的RSD。马来酸氯苯那敏RSD＝0.8％(n=8)；倍他米松RSD＝0.6％(n=8)，结果表明：本法精 确度较好。 3.4 回收率实验 精密称取马来酸氯苯那敏对照品约20mg，置100mL量瓶中，按处方加入各种辅料； 另精密称取倍他米松对照品约25mg，置50mL量瓶中，加流动相超声处理使溶解并稀释至刻度，摇 匀，精密取此溶液5mL，加至上述100mL量瓶中，再精密加入内标溶液5mL，加流动相溶解并稀释至 刻度，摇匀，滤过。取续滤液按上述色谱条件进样测定。结果马来酸氯苯那敏、倍他米松回 收率分别为99.2％、100.9％，RSD分别为0.7％、0.6％，n=7。 3.5 样品测定 精密称取本品的细粉适量(约10片量)，置100mL量瓶中，加流动相超声处理使溶解 ，精密加入内标溶液5mL，用流动相稀释至刻度，摇匀，滤过。取续滤液按上述色谱条件进样 测定。结果见表2。

表2 样品测定结果(％，n=3)

4 讨论 实验中曾比较了两种色谱填料对分离测定的影响，一种为岛津CLC—CN(10μm，5mm×150mm)，另 一种为中科院大连化物所Spherisorb CN(10μm，4.6mm×250mm)，前者的各组分容量因子明显大于后者 ，若使用岛津氰基柱需调整流动相中有机相的比例，流动相为水—甲醇—乙腈—三乙胺(56∶ 24∶20∶0.4，pH=7.5)。本文实验中采用的三元流动相，也比较过用各种比例的水—甲醇或水—乙 腈为流动相，但对于本文所含组分分离效果始终不理想，主要是氯苯那敏的容量因子没有合 适的值。 本文承蒙周元瑶名誉所长审阅修改，特此致谢!

(本文于1996年12月24日收到)

Assay of Compound Chlorphenamine Tablets by HPLC

Xu Wu and Song Ming

(Wuhan Institute for Drug Control,430012)

Abstract:Chlorphenamine maleate and betamethasone in compound chlorphenamine tablets were separated and simultaneously assayed by HPLC,using a spherisorb-CN column,a mixture of water,methy alcohol,acetonitrile and triethylamine(80∶20∶20∶1.4，adjust with phosphoric acid to a pH of 7.5)as mobile phase and fluocinonide as internal standard and a 254nm detector.The method is simple,rapid and accurate.The components have good liner relation and respective average recovery with RSD(n=7) (99.2±0.7)％ for chlorpenamine maleate,(100.9±0.6)％ for betamethasone. Key words:HPLC,chlorphenamine maleate,betamethasone,fluocinonide,compound chlorphenamine tablets

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