RP-HPLC法测定宫康舒中大黄素的含量

　　摘要　目的：建立反相液相色谱法测定宫康舒中大黄素的含量；方法：采用Shimdze CLC ODS柱，流动相甲醇-水-磷酸(80∶20∶0.5)，检测波长286 nm，流速1 ml^.min^-1。结果：平均回收率为99.11%(RSD=0.98%)；结论：方法简便、准确，重复性好。
　　关键词　反相高效液相色谱法；宫康舒胶囊；大黄素
　　中图分类号：R927.2　　　文献标识码：B　　　
文章编号：1006-0103(2000)02-0210-02

　　宫康舒为治疗妇科疾病的新药，主含大黄、冰蛭、黄芩、牡蛎、桃仁等中药，大黄为君药，以大黄素为代表的蒽醌类成分是重要活性成分。大黄素的含量测定方法文献报道的有薄层色谱法^〔1，2〕、高效液相色谱法^〔3〕。现建立的反相高效液相色谱法，适合新方法制备的供试品溶液。

1　实验部分

1.1　仪器与试剂
　　日本岛津LC-10AT高效液相色谱仪包括LC-10AT泵、SPD-10A紫外可见波长检测器，C-R7A数据处理机，7725 li手动进样器；Millzq纯水器。大黄素对照品(中国药品生物制品检定所)；甲醇为色谱纯；其它试剂均为分析纯；宫康舒胶囊(华宇制药有限公司)。
1.2　色谱条件和系统适用性试验
　　经试验后选定的色谱条件为Shimdze CLC ODS柱(150 mm×4.6 mm)，流动相甲醇-水-磷酸(80∶20∶0.5)，检测波长286 nm，柱温30℃，流速1 ml^．min^-1。此条件下，处方中其它药味不干扰测定(图1)。按大黄素峰计算，理论板数为4500。峰对称因子为1.04。取供试品溶液20 μl重复进样5次，测得峰面积的RSD为0.3%。

图1　宫康舒中大黄素对照品及空白的HPLC图
a 对照　b 空白　c 样品

1.3　线性范围
　　取大黄素对照品溶液(0.011mg^．ml^-1)2、4、6、8、10、12μl进样，测定峰面积，以峰面积(A)对进样量(X)进行线性回归，回归方程为：
　　A＝2176642X+122　 r=0.9999。
　　表明在0.022～0.1 μg范围内，峰面积与进样量线性关系良好。
1.4　回收率试验
　　采用加样回收法，取已知含量的样品适量，分别添加高、中、低不同量的大黄素对照品，按供试品溶液制备方法制备，测定，并计算回收率(表1)。

表1　回收实验结果

2　讨论

2.1　文献报道多用甲醇-水系统、乙腈-水系统作流动相，但这两种系统测定本样品均存在分离度欠佳，峰形不好。采用甲醇-水-磷酸作为流动相，分离度很好，峰形对称，与供试品溶液适应。试验表明，大黄素在含盐酸的甲醇溶液中，90℃时，4小时内稳定；70℃时，6小时内稳定；60℃时，24小时内稳定。
2.2　文献报道测定总蒽醌含量，一般采用甲醇提取后，挥去甲醇，加稀酸溶解后再水解，然后用乙醚提取，挥去乙醚，用甲醇溶解后作为供试品溶液，实验研究表明，此法制成供试品溶液，在“1.2”的色谱条件下测定结果与本文建立的方法测定结果无明显差异，但后者测定结果重现性更好。

作者简介：蔡晓霞，女，河北人，主管药师，从事药品检验工作。
蔡晓霞（攀枝花市药品检验所，四川 攀枝花617000）　
曹志刚（青神县人民医院，四川 青神 612460）　
刘仲义（四川省药品检验所，成都 610036）

收稿日期：1999-10