高效毛细管电泳法研究国产卡莫氟的药代动力学及生物利用度

目的 证明毛细管电泳法（HPCE）可应用于药代动力学研究，同时对国产与进口片剂进行生物利用度比较，为临床安全合理用药提供科学依据。方法 用高效毛细管电泳法测定男性肿瘤患者交叉单计量口服200mg国产和进口卡莫氟后血清中活性代谢物5-氟尿嘧啶药物浓度。结果 国产和进口药物的血药浓度—时间曲线符合二室模型。达峰时间分别为2.31±0.40h和2.30±0.38h，峰浓度分别是2.81±0.24mg/L和2.89±0.28mg/L，0～24h药时曲线下面积分别为23.82±2.21mg/（h·L）24.41±2.34mg/（h·L）。国产片的相对生物利用度为97.58%±8.75%。结论 两种制剂具有生物等效性。

关键词 卡莫氟 HPCE 药代动力学

 

【Abstract】 Objective To prove that capillary electrophoresis can be used for the study of pharmacokinetics，to make the comparison between the Carmofur made in China and Japan.Methods The capillary electrophoresis was used.The pharmacokinetics and relative bioavailability of domestic Carmofur tablets was studied in8male cancer paˉtients.A single oral of200mg Carmofur made in China or Japan was given according to a crossover design.The concenˉtrations of Fluracil in serum were determined by capillary electrophoresis.Results The concentration-time curves of domestic and imported products fitted to a two-compartment open model.Tmax for domestic Carmofur and imported products were2.31±0.40h and2.30±0.38h，C max were2.81±0.24mg/L and2.89±0.28mg/L，AUC0～24 were23.82±2.21mg/（h·L）and24.41±2.34mg/（h·L），respectively.The relative bioavailability of domestic tablet to imported tablet was97.58%±8.75%Conclusion Demonstrated that the t

wo formations were bioequivalent.Key words carmofur capillary electrophoresis bioavailability 

卡莫氟（1-己基氨基甲酰-5-氟尿嘧啶，HCFU）是5-氟尿嘧啶（5-FU）的第三代产品 ^［1］ ，系氟尿嘧啶潜型衍生物，口服后从肠道迅速吸收，在体内缓缓释放出5-FU而起作用。作用机理是，在体内抑制尿嘧啶苷酸结合进入RNA中，从而干扰，阻断DNA、RNA及蛋白质的合成。目前，该药的国产和进口片剂都在应用。

高效毛细管电泳（HPCE）是一种新型的分析技术，具有高效，简便，操作费用低等特点^［2，3］ 。本研究利用毛细管电泳法研究了国产和进口卡莫氟的人体药代动力学和生物利用度，旨在证明毛细管电泳法可应用于药代动力学研究。同时，对国产与进口片剂进行生物利用度比较，为临床安全合理用药提供科学依据。

1 实验部分

1.1 仪器与试剂 美国SP公司SP-500型高效毛细管电泳仪，石英毛细管75μm×70cm（河北永年光导纤维厂），国产卡莫氟（山东济南制药厂，970122），进口卡莫氟（日本三井制药工业株式会社x970030）溶出度均符合临床试验标准。5-Fu对照品，上海第十二制药厂提供。空白血清由本院血库提供。水为2次蒸馏水，其它试剂均为分析纯。

1.2 分析方法 样品预处理 ^［4］:取1ml血清加水1ml，用6mol/LHCI调pH=2.0～2.5，用氯仿萃取。弃去氯仿层，水层用1mol/NaOH调pH=7.0～7.5，离心，上清液用乙酸乙酯萃取，收集乙酸乙酯，40℃水浴空气吹干，用125μl运行缓冲液溶解，0.45μl滤膜过滤，测定。

运行条件:电压20kV，波长210nm，运行缓冲液为20m mol/L四硼酸钠，pH=9.24，阳极真空进样4s，运行温度25℃。

1.3 受试对象及试验方案 8名男性胃癌患者，年龄48～58岁，首先分别服用国产卡莫氟200mg，服药后0.5，1，1.5，2，3，6，12，24h各采血2ml，1周后服用进口卡莫氟，同上处理。

1.4 数据处理机统计 采用3P87（中国数字药理学会张文贵教授编）程序计算药动学参数。采用成对t检验法对卡莫氟国产与进口片剂血药浓度数据及动力学参数进行检验，采用双单侧t检验法对两种片剂生物等效性进行评价 ^［5］ 。

2 结果与讨论

2.1 色谱行为及方法评价 某患者服用200mg国产卡莫氟，2h后血清样品按分析方法处理，得电泳谱图见图1。

Fig.1略 

在空白血清中加入5-FU标准品，使浓度为0.5～100mg/L之间，按分析方法测定各标准血清，得回归方程A=6.21C-1.03r=0.9998A为峰面积×10 ^-3 ，C为浓度（mg/L），r为相关系数。线性范围0.5～100mg/L，最低检测浓度为0.25/L（S/N>3）。

配置5-FU浓度为1.0mg/L的标准血清6份，按上述方法测定，计算回收率，结果表明5-FU平均回收率为97.5%，变异系数为5.8%，配制含5-FU的标准血清5份，当日测定，求得日内RSD（n=5）为4.8%，然后5日内测定得日间RSD（n=5）为5.3%。

2.2 药代动力学研究

2.2.1 药时曲线 8名受试者交叉给于国产和进口两种片剂后，血清5-FU浓度-时间数据经3P87程序自动拟合符合口服二室模型，见图2。

主要动力学参数为，国产卡莫氟片和进口卡莫氟片的最高血药浓度分别为2.81±0.24mg/L和2.89±0.28mg/L，达峰时间分别为2.31±0.40h和2.30±0.38h，消除半衰期分别为7.46±0.78h和7.57±0.82h。0～24h药时曲线下面积分别为23.82±2.21mg/（h·L）和24.41±2.34mg/（h·L）。药动学参数经成对t检验，差异均无显著性（P>0.05）。 

Fig.2略 

2.2.2 国产片的相对生物利用度 由每名受试者交叉服用国产和进口卡莫氟后，血药浓度-时间曲线下的面积计算出每名受试者的相对生物利用度。得平均相对利用度为97.58%±8.75%，上述试验以进口卡莫氟为参比，国产片为待测样品，AUC（药时曲线下0～24h面积）经双侧t检验后，P>0.05，故两种片剂具有生物等效性。

参考文献

1 由品英.常用进口药物手册，天津:天津科技翻译出版公司，1995，480-481.

2 Ratrick Camilleri Capillary Elertrophoresis Theory and Practice，Boca Rato;CRC Press，1998，5-6.

3 Weiying guo，Quan Zhan，Yan Zhao et al.Determination of cis and trans Isomers ofTramadol Hydrochloride by CZE Biomedical Chromatography，1998，12:13-14.

4 郭伟英，赵燕，扬菁，等.毛细管区带电泳法测定人血清中5-氟尿嘧啶及5-氟脱氧尿苷毛细管电泳进展（第二卷），广州:华南理工大学出版社，1995，94-95.

5 黄圣凯，韩可勤.生物等效性评价的几种统计方法.中国临床药理学杂志，1993，9:43-46. 

作者单位:1121001锦州医学院药学院 2121001锦州医学院附属第一医院