高效液相色谱法测定血浆中氟哌啶醇浓度

目的：建立高效液相色谱法测定血浆中氟哌啶醇浓度的方法。

方法：以乙腈-甲醇-0.025mol/L磷酸二氢钾(45∶5∶50,v/v)为流动相，氯氟哌啶醇作内标，紫外波长248nm处检测。

结果：血浆中氟哌啶醇的最低检测浓度为0.5ng/ml,

平均提取回收率为86.6%±4.9%,线性范围1～50ng/ml(r=0.9998),日内和日间RSD分别小于8%和9%。结论：方法灵敏、快速、准确，可满足临床治疗药物的监测工作。
关键词　氟哌啶醇；高效液相色谱法

　　氟哌啶醇(haloperidol)是临床常用的抗精神病药物，其有效治疗血浓度范围为4～20ng/ml^［1］。由于其治疗血浓度较低，需选择灵敏的测定方法，高效液相色谱法能满足其测定需要。用高效液相色谱法测定血浆氟哌啶醇浓度，文献已有报道^［2］，但其方法或灵敏度尚不够高，或样品处理复杂。本文用反相高效液相色谱法测定血浆中氟哌啶醇浓度，具有分析速度快、灵敏度高和样品处理简单等特点。

1　材料与方法
1.1　药品与试剂　氟哌啶醇标准品(上海市精神卫生中心)；氯氟哌啶醇(内标)［Sigma(st. Louis,MO,USA)］；甲醇、乙腈、磷酸二氢钾、氢氧化钠、乙烷、异戊醇、硫酸等均为国产分析纯试剂；实验用水为超纯水。
1.2　仪器　日本岛津LC-5A型高效液相色谱仪，包括SPD-2A型紫外检测器，C-R3A型色谱数据处理机；Waters U6K进样器。
1.3　色谱条件　色谱柱：Zorbax ODS 4.6mm×25cm;流动相：乙腈-甲醇-0.025mol/L磷酸二氢钾(45∶5∶50,v/v),用前过滤和减压脱气；紫外波长248nm,灵敏度:0.005AUFS。
1.4　贮备液及标准液　精密称取氟哌啶醇和氯氟哌啶醇适量，用甲醇配制成100mg/L的贮备液，置4℃冰箱保存。使用时分别用甲醇将氟哌啶醇贮备液稀释成1和5mg/L浓度的标准溶液，氯氟哌啶醇贮备液稀释成5mg/L的内标溶液。
1.5　样品处理方法　取血浆1ml置具塞离心管中，加入10μl内标液,500μl 2mol/L氢氧化钠溶液和5ml己烷(含2%异戊醇)，振摇混合10min,3000r/min离心10min,将有机相移至另一离心管中，加入100μl 0.03mol/L硫酸溶液，旋涡混合1min,3000r/min离心10min,弃去有机相，精密量取水层50μl注入色谱柱层析。

2　结　果
2.1　色谱分析结果　图1为空白血浆及加入适量标准品和内标的血浆色谱结果。

图1　空白血浆(A)及含氟哌啶醇和内标的血浆(B)色谱图
1-氟哌啶醇；2-内标

2.2　标准曲线、线性范围及最低检测浓度　在空白血浆中加入不同浓度的氟哌啶醇标准液和内标液，配成浓度为1.0,2.5,5.0,10.0,25.0和50.0μg/L的标准血浆样品，按样品处理方法处理后进样测定。以样品浓度(c)对样品与内标的峰面积比(Y)进行线性回归，在浓度1～50μg/L范围内线性关系良好(n=5),回归方程为:Y=0.0411c-0.0074,r=0.9998。在信噪比为4时，血浆中氟哌啶醇的最低检测浓度为0.5ng/ml。

[本文共有 2 页，当前是第 1 页] <<上一页 下一页>>