GC法测定贴儿康中丁香酚的含量

贴儿康贴剂是以丁香等组成的复方制剂，功能为健脾温中，散寒止泻，我们选择丁香中的
丁香酚作为质控定量指标。
对于成药中丁香酚的含量测定方法，文献报道有薄层扫描法［1］、气相色谱法［2］、毛
细管气相色谱法［3］，但都是有机溶剂直接提取，色谱进样，由于本处方成分多，且辅料严
重干扰，常规提取方法无法达到基线分离，我们利用丁香酚溶于碱的特征，采用碱提取，酸
化后再用有机溶剂反提，以丹皮酚为内标物，气相色谱法测定，方法简便易行，结果稳定可
靠。1 仪器与试药
Varian 3700型气相色谱仪，岛津C—R3A积分仪，正己烷、氢氧化钠、盐酸均为分析纯。
丹皮酚对照品：中国药品生物制品检定所。
丁香酚对照品：自制精制品。
纯度试验：吸取精制后丁香酚溶液(相当于含丁香酚约100μg，注入气相色谱仪，经毛细管
柱分离，用归一化法测定其含量，结果纯度为99.4%)。2 色谱条件
色谱柱：以Chomosorb W(80～100目)为担体，涂布3% OV—17固定液相的不锈钢色谱柱(３mm×2m
)；柱温：130℃；进样口温度160℃；FID检测器温度250℃；载气(N2)和氢气的流速均为30mL/min，
空气300mL/min；定量方法：内标法。
在上述条件下，丁香酚与内标物丹皮酚色谱峰的分离度大于1.5，符合要求。3 线性范围和校正因子的测定
3.1 丁香酚对照品溶液的配制 取丁香酚对照品128mg置50mL量瓶中，加正己烷溶解并
稀释至刻度。
3.2 线性范围 精密吸取丁香酚对照品溶液1、2、3、4、5mL，分别置于25mL量瓶中，各精
密加入内标溶液1mL，用正己烷稀释至刻度，摇匀。取溶液1μL色谱进样，测定峰面积，以
丁香酚浓度为
横坐标，丁香酚与内标物的色谱峰面积比值为纵坐标，绘制标准曲线，计算回归方程：Y＝9.772X-0.2881 r＝0.9999
表明丁香酚在0.062～0.31μg范围内具有良好的线性关系。
3.3 校正因子测定 取丹皮酚适量，精密称定，置50mL量瓶中，加正己烷溶解并稀释至刻度，
配成浓度为7.5mg/mL的溶液，作为内标溶液。精密吸取丁香酚对照品溶液2mL于25mL量瓶中，
精密加入内标溶液1mL，用正己烷稀释至刻度，摇匀。取此溶液1μL注入气相色谱仪测定，
计算校正因子。4 精密度试验
取对照品溶液，重复进样5次，对照品与内标峰面积比值的RSD为1.2%。5 重复性试验
按拟定的含量测定方法，对批号960805样品进行5次测定(平均试验至少n≥5)，计算5次含量的
RSD为3.0%(＜5.0%)。6 回收率试验
采用加样回收方法，取已知含量(约32.9mg/g)的样品加入丁香酚对照品29.697mg，进行回收率测
定，5次测定平均值为99.5%，RSD为3.3%。7 样品测定
精密称取本品约1g，加硅藻土适量在乳钵中研细后移至具塞锥形瓶中，精密加入0.2mol/L氢氧
化钠溶液20mL，充分振摇后，超声提取10min，滤过，精密吸取续滤液2mL于10mL离心管中，加入1.
5mol/L盐酸4～6滴，调pH值到3～4，然后加入正己烷8mL，振摇，离心，吸取上清液于25mL容量瓶中
，再加入正己烷6mL，如此提取2次，合并3次提取液于25mL量瓶中。精密加入内标溶液1mL，用正
己烷稀释至刻度。取溶液1μL，色谱进样，计算含量。结果见表1。
表1 样品测定结果(n=3)
批号含量(mg/g)RSD(％)
96080432.890.9
96080532.933.0
96080633.301.2

8 结果与讨论
8.1 丁香酚在许多有机溶剂中极易溶解，首先考虑用正己烷直接提取，提取方法选择超声提取
20min，静置，吸取上清液色谱进样，试验了几种不同极性的色谱柱，如3% OV—17，10% OV—101，
10% PEG—20M。比较认为3% OV—17最好，但在丁香酚主成分峰尾部有一小杂质峰未分离开，随后
试验了不同柱温及升温速率，又选用几种有机溶剂提取，结果都未达到基线分离。考虑到丁
香酚易溶于氢氧化钠溶液，故改用碱提取，酸化后再用有机溶剂反提的方法，这样杂质干扰
消除，而且色谱图中只有1个丁香酚色谱峰(图1)，同时阴性对照无干扰。
图1 用NaOH提取成品后的色谱图
1.正己烷 2.丁香酚 3.丹皮酚(内标)
8.2 对于丁香酚的提取，试验中曾采用分液漏斗振摇提取的方法，但乳化非常厉害，不易分层
，后采用离心管中振摇，离心，吸取上清液的方法，提取3次，第4次进样为阴性。
8.3 为了进一步验证方法可行性，还做了空白加样回收试验，结果回收率为98.5%。
参考文献