（中山医科大学科技开发部 广州 510080）
摘要：采用高效液相法测定复方溶液中醋酸洗必泰的含量，以HYPERSIL BDS为固定相，甲醇-水相（取磷酸二氢钾4 g，三乙胺2．5 ml，十二烷基苯磺酸钠1 g，加水至1000 mL，并用磷酸调节pH至2．5）（80∶20）为流动相，紫外检测波长为260 nm，平均回收率为96．25％，RSD为0．62％。方法简单，准确。
复方保健药液I号（含有醋酸洗必泰）是我校科技开发部和福建某公司联合研制开发的中
西药复方
制剂，具有强大的抑杀菌作用并兼有消炎、止痛、止痒、防霉作用。由于本药液中含有多种中西药成分，难以用非水滴定法（中国药典1995版）或紫外分光光度法测定醋酸洗必泰的含量。本文在对多种色谱体系进行筛选的基础上，建立了以辛烷基硅烷键合的硅胶为固定相的反相高效液相色谱法，分离和测定复方保健药液I号中醛酸洗必泰，并用于制剂的质量控制。
1 仪器与试药
美国Waters 510高效液相色谱仪，Waters 486紫外检测器，Waters 810色谱工作站；复方保健药液I号样品为福建某公司提供，醋酸洗必泰对照品为符合中国药典规格的原料；其它试剂均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：HYPERSIL BDS柱（300 mm×4．6 mm，5 μm）；流动相：甲醇-水相（取磷酸二氢钾4 g），三乙胺2．5 ml，十二烷基苯磺酸钠1 g，加水至1000 ml，并用磷酸调节pH至2．5）（80∶20）；检测波长：260 nm；流速：1．0 ml.min－1；柱温：室温。该条件下的样品液的色谱图（见图1）。
图1 样品液的高效液相色谱图（醋酸洗必泰tR＝6．14 min）
3 线性范围及方程
对照品溶液的配制：精密称取醋酸洗必泰对照品约10 mg，置100 ml量瓶中，用无水乙醇溶解定容，摇匀。
精密量取醋酸洗必泰对照品溶液0．25，0．5，1．0，2．0，3．0，4．0ml，分别置10 ml量瓶中，用无水乙醇溶解定容，摇匀；分别取15 μl进样，按外标法以峰面积（A）对浓度（C）回归，得线性方程和相关系数：C＝2．231×10－5A＋2．122（r＝0．9993），表明醋酸洗必泰在2．5 μg～40 μg.ml－1浓度范围内呈良好线性关系。
4 回收率及精密度试验
按处方比例配制含醋酸洗必泰为标示量90．0％～110．0％的模拟样品6份，依样品处理方法测定。6次测定的回收率及精密度试验结果（见表1）。
表1 回收率及精密度试验结果
试验
编号加入量
（μg.ml－1）测定量
（μg.ml－1）回收率
（％）平均回收率
（％）精密度
（RSD，％）
120．5619．6395．48
219．5518．7896．06
320．2019．6497．2396．250．64
421．0920．1895．69
519．8919．1896．43
620．3319．6496．61
5 样品含量测定
精密量取本品5 ml，置100 ml量瓶中，用无水乙醇溶解定容、混匀。取15 μl进样，按外标法以峰面积计算。3批样品经3次测定的平均结果（见表2）。
表2 样品含量测定结果（标示量％，n＝3）
批号醋酸洗必泰RSD（％）
990823100．840．65
99071599．020．70
99042698．230．82
6 讨论
6．1 色谱柱不同填料对样品色谱行为的影响 实验过程中，曾尝试在ODS柱上考察醋酸洗必泰的色谱行为。由于硅胶表面键合相覆盖程度不同，在不同牌号的ODS柱上醋酸洗必泰的色谱峰形有很大差异，产生诸如峰形平缓，拖尾严重，保留时间过长甚至长期地保留在色谱柱上等问题。这是由于醋酸洗必泰分子结构中含有多个仲氨基和亚氨基，与硅胶表面的硅醇基（一般ODS柱的硅胶表面的硅醇基尚有50％或以上仍呈游离状态）之间有较强的离子交换和形成氢键的相互作用的关系。而在采用BDS柱后，选择同样的流动相，醛酸洗必泰的色谱峰形较ODS柱有很大改善。经反复筛选，确立了HYPERSIL BDS柱上以甲醇-三乙胺-十二烷基苯磺酸钠-磷酸盐缓冲液为流动相的色谱体系。醋酸洗必泰的色谱峰形较对称、尖锐，显示出该色谱体系具有较好的适用性。
6．2 流动相的pH值对样品色谱行为的影响 在上述流动相系统中，考察了不同流动相对样品色谱行为的影响，试验表明：pH值越低，醋酸洗必泰的峰形越好。考虑到色谱柱对pH值的耐受性，选择了pH值为2．5的流动相系统。
6．3 流动相的选择 流动相中加入三乙胺，可以抑制或掩蔽固定相表面的游离硅醇基的活性，使醋酸洗必泰易于出峰，且保持良好峰形，去除色谱峰的拖尾现象。加入十二烷基苯磺酸根作为竞争离子，因为碱性药物（醋酸洗必泰）在固定相上的保留过程可以认为是质子化碱性物质（阳离子）和流动相中这些竞争离子（阳离子）共同竞争硅胶的离子交换部位。因此，流动相中竞争离子的种类和浓度，对于碱性药物的保留和分离，起着重要的调节作用。
参考文献
［1］张秉彦等：醋酸洗必泰栓含量的紫外分光光度法测定法,药物分析杂志,1984,4（3）：180-1.
［2］李开兰等：复方醋酸洗必泰溶液测定方法的研究,华西
药学杂志,1997,12（1）：40-2.
［3］冀学芳等：RP-HPLC法同时测定复方特比萘芬软膏中盐酸特比萘芳、醋酸洗必泰和醋酸去炎舒松的方法研究,药物分析杂志,1997,17（6）：363-5.
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1 中山医科大学生物化学教研室
作者：
王斌吴歆1李冠宏 2007-5-18