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【摘要】 目的：建立康妇灵胶囊的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱法。色谱柱：Agilent Technologies ZORBAX Extend-C18 4.6×250mm，5μm，流动相：乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液（PH6.8）（16: 16:68），流速：1.0ml·min－1，检测波长：220nm，柱温：30℃。结果：苦参碱在0.02～0.40mg·ml－1范围内线性关系良好（r=0.9995）；平均加样回收率为98.2%，RSD=1.4%（n=6）；氧化苦参碱在0.01～0.20mg·ml－1范围内线性关系良好（r=0.9997）；平均加样回收率为97.6%，RSD=2.2%（n=6）。结论：该方法简便易行，结果准确可靠，可适用于康妇灵胶囊的质量控制。
【关键词】 高效液相色谱法 康妇灵胶囊 苦参碱 氧化苦参碱 含量测定
Determination of Matrine Oxgmatrine content in Kangfuling capsules by HPLC
【Abstract objective】To set up a method for quality control of Fuyankang tablets. METHOD：HPLC method was developed to quantitative determination. The separation was performed on Agilent Technologies ZORBAX Extend-C18 4.6×250mm,5μm.The mobile phase was acetonitrile-methanol-phosphate buffer (pH=6.8) (16：16：68).The flow rate was 1.0ml·min-1 .The UV detection wavelength was 220nm. The column temperature was 30℃.RESULTS：The linear range of Matrine and Oxgmatrine were at 0.02～0.40 mg·ml-1 (r=0.9995) and 0.01～0.20 mg·ml-1 (r=0.9997) respectively, the average recoveries(n=6) were 98.2% and 97.6% with RSD 1.4% and 2.2%. CONCLUSION The method is simple and accurate, it can be used for quality control of Kangfuling capsules.
【Key words】HPLC； Kangfuling capsules；Matrine；Oxgmatrine； Determination
康妇灵胶囊为《国家药品监督管理局标准（试行）》收载的品种，由苦参、杠板归、黄柏、益母草、鸡血藤、红花龙胆、土茯苓、当归等8种中药组成。具有清热燥湿、活血化瘀、调经止带的功效，为妇科常用中药[1]。苦参含有苦参碱、氧化苦参碱等成分，我们采用高效液相色谱法测定制剂中苦参碱、氧化苦参碱的含量，该项方法操作简便、快速、准确可靠，可用于康妇灵胶囊的质量控制。
1 仪器与试药
1.1 仪器 LC-2010A高效液相色谱仪，CLASS-VP色谱工作站。
1.2 试药 苦参碱对照品（批号：100078-200414），氧化苦参碱对照品（批号：110780-200004），由中国药品生物制品检定所提供，供含量测定用；康妇灵胶囊为市售样品（贵州和仁堂药业有限公司，规格：0.4g·粒－1，批号：20061108，20061202，20061216）。乙腈、甲醇为色谱纯，水为超纯水，其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性试验 色谱柱：Agilent Technologies ZORBAX Extend-C18 4.6×250mm，5μm，流动相：乙腈-甲醇-磷酸盐缓冲液（PH6.8）（16:16:68），检测波长：220nm，流速：1.0ml/min，柱温：30℃。
2.2 溶液配制
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取经五氧化二磷减压干燥12小时以上的苦参碱对照品和氧化苦参碱对照品各适量，分别加甲醇制成每1ml各含0.4mg的对照品贮备液；再精密量取苦参碱对照品贮备液和氧化苦参碱对照品贮备液各适量，加甲醇制成每1ml含苦参碱0.2mg、氧化苦参碱0.1mg的混合溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 样品溶液的制备 取康妇灵胶囊10粒内容物，研细，取约1.0g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加浓氨溶液2ml使湿润，再加三氯甲烷（CHCl3）30ml，超声处理（功率250W，频率33KH2）20分钟，滤过，取滤液，再用三氯甲烷洗涤残渣、容器及滤器4次，每次5ml，滤过，滤液合并，置水浴上蒸干，残渣用甲醇溶解并转移至25ml量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 取除苦参以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成片，再按样品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.3 专属性试验
分别精密吸取样品溶液、阴性对照溶液及对照品溶液各10μl，注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。由图1可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间（1氧化苦参碱：6.866min；2苦参碱：15.422min）的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。
2.4 线性范围考察
精密吸取对照品贮备液各适量，分别加甲醇配成浓度分别为苦参碱：0.02、0.05、0.10、0.20、0.30、0.40mg·ml－1，氧化苦参碱：0.01、0.03、0.05、0.10、0.15、0.20mg·ml－1的溶液，摇匀，滤过，精密吸取续滤液各10μl，注入液相色谱仪，记录峰面积。以峰面积（A）为纵坐标，其浓度（C）为横坐标，线性回归，苦参碱回归方程为：A=4.34×105C＋3.87×102，r=0.9995；氧化苦参碱回归方程为：A=1.21×104C＋8.07×102，r=0.9997。结果表明，苦参碱在0.02～0.04mg·ml－1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系；氧化苦参碱在0.01～0.20mg·ml－1范围内峰面积与其浓度呈良好线性关系。
2.5 精密度
取样品（贵州和仁堂药业有限公司，批号：20061108）按“2.2样品溶液的制备”方法制备样品溶液，重复进样5次，进样量10μl，在上述色谱条件下求得苦参碱峰面积RSD为0.9%，氧化苦参碱峰面积RSD为1.2%，表明精密度较好。
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【参考文献】
[1] 《国家药品监督管理局标准（试行）》[S]．2002．
[2] 中国药典[S]．2005，497～498．