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【摘要】 目的：建立祛痰止咳合剂的含量测定方法。方法：采用高效液相色谱（HPLC）法测定祛痰止咳剂中黄芩苷的含量。结果： HPLC法测得本品中黄芩苷的含量为0.512～0.541mg/ml，在0.40～2.00μg的范围内，溶液的浓度与峰面积呈良好的线形关系， r = 0.9993， 加样平均回收率为99.85%（n=5），RSD为0.69% 。结论：本品定量方法简便、准确，专属性强能够控制该制剂的内在质量。
【关键词】 祛痰止咳剂 高效液相色谱法 含量测定 黄芩苷
Determination of Baicalin in Qutanzhike Mixture by HPLC
【Abstract Objective】Study on the Quality Standarded for Qutanzhike Mixture. Method: Radix Scutellariae, Flos Lonicerae in Qutanzhike Mixture were identified by TLC,and the content of Baicalin was determined by HPLC. Result: The Baicalin showed a good linear relationship within a range of 0.40～2.00ug(r=0.9993), the average recovery was 99.96%(n=5), RSD=1.37% . Conclusion: method HPLC is accurate and reliable method.The quality standard can be used for quality control of this product.
【Key words】Qutanzhike Mixture HPLC Baicalin determination
祛痰止咳合剂是由黄芩、苦杏仁、甘草、瓜蒌仁等药物组成。该方是在大量临床实践的基础上，以中医辨证为主，结合现代医学及现代药理研制出的治疗急、慢性气管炎的有效药物。为更好地控制其质量，保证该制剂的临床疗效，本研究采用HPLC法对制剂中的主要有效成分黄芩苷进行了含量测定，现报道如下。
1 实验材料
1.1 仪器 LC-2010A 高效液相色谱仪，CLASS-VP色谱工作站，UV-2401型紫外分光光度仪（日本岛津）。
1.2 试药 黄芩苷对照品（中国药品生物制品检定所，供含量测定用，批号：110715-200212）；祛痰止咳合剂（吉林市船营区中医院制剂室）；甲醇为色谱纯；其余试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适应性试验 色谱柱：DiamosilTM（钻石）C18（5μ 250×4.6mm，）；流动相：甲醇-水-冰醋酸 （45：55：1）；检测波长：276nm；流速：1.0ml/min；柱温：室温（25℃）；进样量：对照品溶液6μl，样品溶液10μl；理论塔板数按黄芩苷峰计应不低于1500。
2.2 溶液的制备
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取在60℃减压干燥4h的黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml含0.1mg的溶液，作为对照品溶液。
2.2.2 供试品溶液的制备 精密量取本品10ml，置50ml容量瓶中，加60%甲醇适量，超声（功率250W）处理20分钟，放置至室温，加60%甲醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
2.2.3 阴性对照溶液的制备 取除黄芩以外的处方中其余药材的十分之一量，按法制成合剂，再按供试品制备方法，制成阴性对照溶液。
2.3 专属性试验
分别精密吸取供试品溶液、阴性对照溶液10μl，对照品溶液6μl，注入液相色谱仪，记录色谱图（图1）。从图中可见，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，有相同保留时间（30.8min）的色谱峰，阴性试验无干扰，证明本法可行。
2.4 线性关系考察 精密称取黄芩苷对照品适量，加甲醇制成每1ml约含0.1mg的溶液，分别精密量取对照品溶液4、8、12、16、20μl，进样测定，以浓度（X）为横坐标，峰面积（Y）为纵坐标，得回归方程为 Y=1151340.8+100157.4 X，r =0.9993，线性范围0.40～2.00μg。
2.5 精密度和稳定性试验 取样品（批号：050517）按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法制备样品溶液，重复进样5次，进样量10μl，其峰面积的相对标准偏差（RSD）为0.9%，表明精密度较好。取同一样品溶液，在0、2、4、10、24h分别进样测定，结果5
次测得值（黄芩苷，mg/ml）的RSD为1.3%，可见黄芩苷在24h内稳定。
2.6 重现性试验 取供试品（批号：050517），共5份，分别按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法制备样品溶液，进行测定，其黄芩苷含量的RSD为0.7%，表明重现性较好。
2.7 加样回收率试验 精密量取已知含量的样品（批号：050516，含量为0.529mg/ml）适量，共5份，分别定量加入黄芩苷对照品适量，按“2.2.2 供试品溶液的制备”方法操作，得回收率试验溶液，依法测定，结果见表1。
2.8 供试品的测定及限度制定 取多批供试品，照正文所述方法测定黄芩苷的含量，结果各批样品中黄芩苷的含量均高于0.50mg/ml，暂定为本品每1ml含黄芩以黄芩苷（C21H18O11）计，不得少于0.40mg。表2 3批样品含量测定结果
3 讨论
3.1 检测波长的确定 在选择检测波长时，笔者取样品在200～350nm波长范围内进行扫描，结果在276.5nm处有最大吸收，故选择276nm为检测波长。
3.2 流动相的选择 笔者比较了甲醇-水-磷酸（50:50:0.3）和甲醇-水-冰醋酸（50:50:1）等流动相，结果以甲醇-水-冰醋酸（45:55:1）分离效果最好。
采用HPLC法对制剂中的黄芩苷进行定量，结果准确，方便简便，重现性及回收率均理想，可以有效地控制产品的内在质量。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会编．中华人民共和国药典[M]．2005年版，一部．北京：化学工业出版社，2005，1，370～371，405～406．