高效液相色谱法测定参芪胶囊中天麻素含量

【摘要】  目的：建立测定参芪胶囊中有效成分含量的方法。方法：采用HPLC对参芪胶囊中天麻的含量进行测定。结果：天麻素在0.0832 μg-0.037512 μg之间具有良好的线性关系，平均回收率为100.5%，RSD=1.65%(n=5)。结论：该方法灵敏、重现性好，适用于参芪胶囊中天麻的含量测定。

【关键词】  天麻素/分离提取；色谱法，高压液相；人参；黄芪

    参芪胶囊由人参、黄芪、天麻等11味药组成，具有补气养血，健脾益肾的功效，天麻作为主要药物之一，其活性成分为天麻素，由于本制剂含药味多，成分复杂，互相干扰大，因此通过试验，建立了高效液相色谱法测定参芪胶囊中天麻素的含量，经方法学考察证实该方法特异性高，回收率和精密度好。

    1  实验材料

    LC2010高效液相色谱仪，SPDM10Avp二极管阵列检测器，LC10ATvp高效液相色谱仪，SPD10Avp紫外检测器，CLASSVP工作站，N2000色谱工作站。天麻素对照品购自中国药品生物制品检定所，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析纯。

    2  实验方法与结果

    2.1  色谱条件［12］  色谱法：Aglient C18(4.6　mm×250 mm,5 μm)；流动相：甲醇0.1%磷酸溶液(5∶95)；流速：1.0 mL/min；柱温25℃；检测波长：220 nm；进样量20　μL。

    2.2  对照品溶液的制备  精密称取天麻素对照品适量，加乙腈水(3∶97)制成每1 mL含50 μg的溶液，即得。

    2.3  供试品溶液的制备  取本品，研细，取约3.0 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%乙醇50 mL，称定重量，加热回流提取2 h，放冷再称定重量，用50%乙醇补足减失的重量，滤过，取续滤液5 mL，浓缩至干，残渣加乙腈水(3∶97)混合溶液溶解，转移至10 mL容量瓶中，并用乙腈水(3∶97)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。

    2.4  线性关系考察  精密吸取天麻素对照品溶液2 μL、4 μL、6 μL、8 μL、10 μL分别注入液相色谱仪，测定天麻素色谱峰面积。以天麻素的进样量为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归，得回归方程：Y=-16803.64286+1646178.384X(r=0.9996)。结果表明，天麻素在0.0832 μg-0.37512 μg之间具有良好的线性关系。

    2.5  精密度实验  精密吸取同一供试品溶液10 μL，重复进样6次，分别计算天麻素的质量分数，结果其RSD为1.08%。

    2.6  稳定性试验  精密吸取对照品溶液10 μL，分别于0 h、2 h、4 h、24 h、36 h测定峰面积，计算得天麻素峰面积的RSD=1.80%，表明对照品天麻素在36 h内稳定。

    2.7  重现性实验  取样品，精密称定5份，制备供试品溶液，进样测定计算天麻素的质量分数，其RSD=1.68%，平均含量为1.80 mg/g。

    2.8  回收率实验  采用加样回收法。取样品5份，每份1 g，置具塞锥形瓶中，各精密加入天麻素对照品1 mg，制备供试品溶液，进样，测定。结果天麻素平均加样回收率为100.5%，RSD=1.65%。

    2.9  样品测定  取3批参芪胶囊制备供试品溶液。精密吸取对照品溶液和供试品溶液各10 μL，进样，测定，结果见表1。

    表1  参芪胶囊中天麻的测定结果

    批号天麻素(mg·g-1)平均含量0702011.760702022.011.800702031.63    根据结果，暂定本品以干燥品计，含天麻素含量不得少于1.6 mg/g。

    3  小结

    本实验曾选择流动相：甲醇-0.1%磷酸溶液(5∶95)溶液系统，结果不太理想，天麻素的出峰区间有干扰，峰形欠佳。而采用本实验的色谱条件即甲醇-0.1%磷酸溶液(5∶95)，天麻素峰的分离得到明显的改善［34］。

【参考文献】
［1］卫生部药典委员会.中华人民共和国药典［M］.北京：化学工业出版社,2000:255.

［2］苗明三，李振国.现代实用中药质量控制技术［M］.北京：人民卫生出版社,2003:80.

［3］王彦斌，聂凌云，罗兴平.天麻胶囊中天麻素含量测定方法的研究［J］.中国现代中药,2006,13(12):8.

［4］向辽源，门 英，张 波，等.HPLC测定天麻胶囊中天麻素含量［J］.中国现代中药，2006，13(12)：8.