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【摘要】 目的：采用高效液相色谱法测定前列通胶囊中盐酸小檗碱的含量。方法:以十八烷基硅烷键合硅胶为固定相，以乙腈磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(28∶72)为流动相，流速1.0 mL/min，检测波长265 nm。结果：盐酸小檗碱进样量在0.045-0.30 μg范围内与峰面积具有良好的线性关系，r=0.9997，回收率为99.92%，RSD=1.67%(n=5)。结论：该方法操作简便，精密度好，结果准确可靠，适用于前列通胶囊中盐酸小檗碱含量的测定。
【关键词】 前列通胶囊；盐酸小檗碱；高效液相色谱法；黄柏
前列通胶囊是由黄柏、黄芪、车前子等10味中药组成的复方制剂，具有清热解毒，清利湿浊，消炎止痛的功效。其中君药黄柏的主要成分盐酸小檗碱具有清热解毒作用，故建立了用高效液相色谱法测定盐酸小檗碱含量的方法。该法简便、快速、准确，现将测定结果报告如下。
1 仪器与试药
日本岛津LC10Avp高效液相色谱仪；LC10Avp泵；SPD10Avp可见紫外检测器；上海电子天平厂HANGPING电子分析天平(万分之一)；盐酸小檗碱对照品(购于中国药品生物制品检定所)；乙腈为色谱纯，水为双蒸馏水，前列通胶囊(自制)；其他试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 色谱条件与系统适用性 固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，色谱柱：ODS柱(4.6 mm×250 mm，5μ)；流动相：乙腈-磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(28∶72)；检测波长：265 nm；柱温：30℃；流速：1 mL/min；进样量：10 μL。理论板数按盐酸小檗碱峰计算应不低于4000。
2.2 对照品溶液的制备 精密称取在100℃干燥5 h的盐酸小檗碱对照品适量，加流动相制成每1 mL含0.015 mg的溶液，即得。
2.3 供试品溶液的制备 取本品内容物适量，置乳钵内研细，取粉末(过3号筛)约1 g，精密称定，置100 mL量瓶中，加流动相25 mL，精密称定，超声处理(功率250 W，频率40 kHz)40 min，放冷，用流动相补足重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2.4 标准曲线的绘制 取上述对照品溶液，分别精密吸取3、5、10、15、20 μL，注入高效液相色谱仪，按上述色谱条件，测定盐酸小檗碱峰面积积分值，以盐酸小檗碱对照品进样量(x)为横坐标，色谱峰面积积分值为纵坐标(y)，绘制标准曲线，计算回归方程：y=894215x+301.72，r=0.9996，结果表明，盐酸小檗碱进样量在0.045-0.30 μg范围内线性关系良好。
2.5 精密度试验 精密吸取同一供试品溶液10 μL，重复进样5次，测定其峰面积积分值，结果RSD为1.6%。表明精密度良好。
2.6 稳定性试验 取同一批样品溶液在12 h内，每隔2 h测定1次，共测定7次，计算RSD为2.10%。结果表明供试品溶液在12 h内基本稳定。
2.7 重复性试验 取前列通胶囊(批号060318)，按供试品溶液的制备方法制备5份供试液，分别测定盐酸小檗碱含量，结果该批样品中盐酸小檗碱含量的RSD值为2.21%。表明重复性良好。
2.8 回收率实验 精密称取已知含量的样品约1 g，精密加入适量的盐酸小檗碱对照品，照供试品溶液制备项下提取及测定含量，平均回收率为99.92%，RSD=1.67%(n=5)，表明本方法回收率良好。
2.9 样品含量测定 取5批(分别为060315、060318、060321、060324、060327批次)样品，分别按供试品制备方法制备，进样10 μL，按上述色谱条件测定，按外标法测峰面积，计算样品中盐酸小檗碱的含量，结果分别为0.332、0.317、0.308、0.350、0.329 mg/粒。
3 小结
检测波长的选择：采用紫外分光光度计对盐酸小檗碱对照品溶液在200-400 nm波长范围内进行扫描，结果在265 nm波长处强吸收峰，因此，选定265nm为检测波长。 流动相的选择：本实验曾试用过甲醇－磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(20∶80)，乙腈－磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(40∶60)，其分离效果与保留时间均不够理想，发现乙腈-磷酸二氢钾(0.05 mol/L)(28∶72)时，分离效果良好，故确定以上色谱条件为含量测定条件。
【参考文献】
［1］国家药典委员会编.中华人民共和国药典(一部)［M］.北京:化学工业出版社,2005:214.
［2］迟芳振,刘 群,李伟妮.黄柏胶囊中盐酸小檗碱的含量测定［J］.医药导报,2005,24(9):821.