Literature
Home药品天地专业药学实验技术色谱技术色谱论文

高效液相色谱法测定肠泰颗粒中齐墩果酸含量

来源:中国论文下载中心
摘要:肠泰颗粒是江苏省中西医结合医院王小宁院长的临床经验方,由白花蛇舌草、薏苡仁等7味中药材组成,用于大肠癌的术后辅助治疗,效果显著。本制剂的有效成分齐墩果酸具有护肝、解肝毒、降糖降脂、抗炎抗病毒、抗癌等作用[1],齐墩果酸的抗癌作用几乎贯穿了肿瘤发展的各个阶段,包括抑制肿瘤的生成、诱发以及诱导细胞的分化......

点击显示 收起

  肠泰颗粒是江苏省中西医结合医院王小宁院长的临床经验方,由白花蛇舌草、薏苡仁等7味中药材组成,用于大肠癌的术后辅助治疗,效果显著。本制剂的有效成分齐墩果酸具有护肝、解肝毒、降糖降脂、抗炎抗病毒、抗癌等作用[1],齐墩果酸的抗癌作用几乎贯穿了肿瘤发展的各个阶段,包括抑制肿瘤的生成、诱发以及诱导细胞的分化,能有效地抑制肿瘤血管的生成、肿瘤细胞的侵袭和转移[2],可作为衡量制剂质量的指标之一。用于齐墩果酸的含量测定方法很多,较早应用比色法、中和法,操作复杂,显色误差较大,对酸性杂质无分辨力和选择性,所以近年来已少应用。薄层扫描法应用广泛,高效液相(HPLC)法有操作快速和准确性高的优势,正在取代其它方法。本文采用高效液相色谱法测定方中齐墩果酸的含量,为肠泰颗粒的质量标准研究奠定基础[3]。

  1    仪器与试药

  1.1   仪器Agilent 1100 高效液相色谱仪(美国Agilent公司);HH-6数显恒温水浴锅(金坛市丹瑞电器厂);AB135S 十万分之一天平(METTLER公司);DHG-9240型电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司);RE-52AA旋转蒸发器(南京金正数字仪器有限公司)。

  1.2   试药齐墩果酸对照品(中国药品生物制品检定所,批号为110709 -200304),乙醇(分析纯,南京化学试剂厂),95%医用乙醇,水为乐百氏纯净水,乙腈、甲醇(色谱纯,美国天地公司)。肠泰颗粒(江苏省中医药研究院中药制剂室自制)。

  2  方法与结果

  2. 1   色谱条件[4] 

  色谱柱为Kromasil KR100-C18 柱( 4. 6 mm ×250 mm ,5 μm)(带保护柱), 流动相为甲醇∶水∶冰乙酸:三乙胺( 85 ∶15∶0.04∶0.02) , 流速0. 5 ml ·min - 1 ,检测波长220 nm ,柱温20 ℃,进样15 μl。图谱见图1 。

  2.2   对照品溶液的制备

  精密称取齐墩果酸对照品2.04 mg ,置10 ml量瓶中,用甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得(每毫升含齐墩果酸0.204 mg)。

  2.3  供试品溶液的制备

  取肠泰颗粒(批号071224)6 g,置于具塞三角瓶中,加甲醇50 ml,密闭超声30 min,补足重量,滤过,取续滤液25 ml,水浴挥干溶剂,残渣用甲醇溶解并定容至5 ml,摇匀,0.45 μm滤膜滤过。

  2.4  阴性对照品溶液的制备

  取处方中缺白花蛇舌草等含齐墩果酸的药材,制成阴性对照颗粒,取阴性对照颗粒按供试品溶液制备法制得阴性对照溶液。

  2.5  线性关系考察

  精密吸取对照品溶液10 ,15 ,20 ,25 ,40,50 μl分别进样测定。以对照品进样量(μg) 为横坐标,峰面积积分值为纵坐标,绘制标准曲线得回归方程Y= 363.19X - 74.10,r = 0.999 2,齐墩果酸在2.04~10.2 μg范围内线性关系良好。

  2.6  精密度实验

  精密吸取齐墩果酸对照品溶液重复进样5次。峰面积积分值RSD为1. 27 %,表明仪器精密度良好。

  2.7  重复性实验

  取肠泰颗粒(批号071224)5份,每份6 g,按供试品溶液制备方法,制得供试品溶液, 按上述色谱条件进行测定,测得供试品中含齐墩果酸含量RSD=1.31,表明重复性较好。

  2.8  稳定性实验

  取同一供试品溶液,分别在0,3,6,9,12 h进样,峰面积积分值RSD为2.37 %,表明样品稳定性良好。

  2.9  回收率测定 

  取肠泰颗粒(批号071224)6份,每份3 g,分别加入精密称取的齐墩果酸1.035 mg ,按“2.3”项下同法处理。按上述色谱条件进行测定。计算其回收率。结果见表1。表1  齐墩果酸回收率实验结果(略)

  2.10  含量测定

  取4批样品,按上述“2.3”方法操作,制备供试品溶液 ,按上述色谱条件进行测定。结果见表2。表2  齐墩果酸含量测定结果(略)

  3  讨论
   
  流动相曾选择乙腈-磷酸盐缓冲液体系、甲醇-水体系[5]、分离效果均不好,最后选用甲醇-水-冰乙酸-三乙胺体系,分离效果最好,达到基线分离。
   
  实验过程中,曾比较了索氏提取与超声提取,结果含量基本一致,但索氏提取耗时较长,超声提取时间较短,易操作,所以采用超声提取的方法。

  【参考文献】
  [1]田丽婷,马龙,堵年生.齐墩果酸的药理作用研究概况[J].中国中药杂志,2002,12(27):884.

  [2]杜瑜,李焕德.齐墩果酸的研究进展[J].中国药房,2006,17(4):304.

  [3]王德仁.齐墩果酸研究新进展[J].天津药学,2003,15(3):56.

  [4]兰保强, 邱宏聪,覃 潇.HPLC法测定复方护肝颗粒中齐墩果酸的含量[J].中医药学报,2007,35(1):47.

  [5]邹盛勤.,RP-HPLC法同时测定不同采收期连翘中乌索酸和齐墩果酸的含量[J].沈阳药科大学学报,2007,24(3):164.

 

作者: 2010-10-2
医学百科App—中西医基础知识学习工具
  • 相关内容
  • 近期更新
  • 热文榜
  • 医学百科App—健康测试工具