大叶蛇葡萄中蛇葡萄素含量的高效液相色谱法测定

　　大叶蛇葡萄 Ampelopsis megalophylla Diels et. Gilg 是葡萄科蛇葡萄属的一种植物，是湖北恩施地区民间习用中草药，其性平，味酸、涩，具有清热利湿、活血化淤之功效，用于治疗痢疾、泄泻、小便淋痛、头昏目胀、高血压等病［1］。现代药理学研究表明，大叶蛇葡萄中的主要化学成分蛇葡萄素具有多种药理活性，如保肝护肝、抗肿瘤和降压等［2～4］。本实验室已对大叶蛇葡萄有效部位进行了指纹图谱研究［5］。为了更好地控制其质量，本文用高效液相色谱（HPLC）法对不同来源的大叶蛇葡萄中的蛇葡萄素进行了含量测定。

　　1  仪器与材料
   
　　Agilent-1100系列高效液相色谱仪(四元泵)；紫外检测器及配套色谱工作站；KQ-250B型超声超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司）；AL204型万分之一电子分析天平（Mettler- Toledo Group）。对照品蛇葡萄素自制，从大叶蛇葡萄中提取分离得到，经UV、MS、H-NMR、IR光谱分析鉴定结构，并经HPLC面积归一化法检测，含量98.0％ ；大叶蛇葡萄(2009-02采自湖北恩施地区，并由本院生药教研室鉴定)。乙腈为色谱纯；水为双蒸水，其余试剂均为分析纯。

　　2  方法与结果

　　2.1  色谱条件色谱柱：Angilent TC-C18（4.6 mm×250 mm，5 μm）。流动相：乙腈-0.1%磷酸溶液（15∶85，V/V）；流速：1 ml/mim；柱温：30℃；检测波长：290 nm；进样量：10 μl。

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