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海南枫蓼肠胃康颗粒剂由海南地产药材牛耳枫Daphniphyllum calycinum Benth.和辣蓼Polygonum flaccidum Meism.组成,临床上用于治疗急性胃肠炎。本课题组近年对该复方药效物质基础进行了研究,确定了该复方有效部位为由槲皮素等5种黄酮类成分组成的一组混合物,同时采用理化分析和光谱学测试,明确了该5种黄酮类成分的化学结构,该项研究成果已申请国家药物发明专利(申请号:200510071092.3公开号: CN1843418)。本文研究大鼠灌胃枫蓼肠胃康颗粒剂后代谢产物的动态,目的是寻找具有代表性可作为该复方药代动力学研究指标成分的代谢产物。
1 材料与仪器
1.1 动物雄性SD大鼠从四川省医学科学院四川省人民医院实验动物研究所购买,许可证号:SCXK(川)2004-15。每笼两只,饲养环境温度控制在20℃,适应时间为期两周。大鼠饲料从长沙市开福区东创实验动物科技服务部购买,主要组成为:粗蛋白24.2%,粗脂肪4.5%,粗纤维4.2%,钙1.33%,磷0.8%,含水量6.8%。
1.2 仪器Bruker Esquire 2000型质谱仪(瑞士布鲁克公司),液相色谱仪(包括515型输液泵,2996型光电二极管阵列检测器,717型自动进样器,美国waters公司),DOA-V130-BN真空泵(美国waters公司),CascadeIX超纯水器(美国PALL公司),KR-702型离心机(日本KUBOTA公司),N-EVATM111氮吹仪(美国Organomation )。
1.3 药品与试剂槲皮素由海南医学院药学系药物化学教研室提供,含量大于98%。槲皮素对照品购自中国药品生物制品检定所,批号为100081-200406;Sulfatase(G1512)从Sigma-Aldrich(上海)贸易有限公司购买。甲醇与乙腈均为色谱纯,磷酸、乙酸、盐酸、醋酸乙酯等试剂均为分析纯,实验用水为超纯水。
1.4 血浆样品采集称取SD大鼠(200~260 g)置于代谢笼中,禁食12 h,自由饮水,以0.9 g·(100 g)-1的剂量灌胃(ig)给药枫蓼肠胃康颗粒溶液,给药后8h内从腹腔静脉取血(约5 ml),全血样品置已肝素化的试管中,于4℃下3 000 r·min-1离心10 min以分取血浆,置-40℃冷冻贮存,备用。
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