气相色谱法测定心力丸中麝香酮的含量

    心力丸是本所科研成果，药厂注册品种，国家中药保护品种，质量标准收载于卫生部中药成方制剂第十七册（WS3—B—3150—98）。本品具温阳益气、活血化瘀功能，用于心阳不振、气滞血瘀所致胸痹心痛、胸闷气短、心悸怔忡等证及冠心病、心绞痛。该制剂是由麝香、人参、附子、红花、人工牛黄、蟾酥等中药制成的浓缩丸，现国家规定处方中麝香以人工麝香等量替代使用，因此，人工麝香中主要有效成分麝香酮的含量［1］，对控制该产品质量和保证临床用药安全有效具有重要意义。已有对六神丸等制剂中麝香酮进行测定的文献［2-5］报道。本文用气相色谱法测定心力丸麝香酮的含量，方法简便、准确，可以有效控制该产品质量。

　　1    仪器和试剂

　　1.1    仪器
      　　
　　岛津GC17A气相色谱仪,FID 检测器,N2000数据工作站(浙江智达)；METTLER AE240电子分析天平；AS5150A超声波仪。

　　1.2    试剂、试药
          
　　麝香酮对照品（中国药品生物制品检定所,批号：071920006,含量测定用,质量分数99.8%）；心力丸(广东省药物研究所制药厂)；无水乙醇、乙醚等试剂均为分析纯；压缩空气、H2、N2均为高纯度的气体（广州气体厂，质量分数达99.9%以上）。

　　2    方法与结果

　　2.1    色谱条件
          
　　毛细管柱:SPBTM1 FUSED SILICA Capillary Column(30 m×0.32 mm×1.0 μm)；柱温：200 ℃;进样口温度：210 ℃;检测器温度：225 ℃;载气：N2；流速：2 mL/min；柱前压：80 kPa；空气：300 mL；氢气：30 mL；尾吹：30 mL；分流:50∶1；进样量：1 μL。在上述条件下，供试品溶液中麝香酮色谱峰能达到基线分离，供试品与邻峰的分离度大于2.0，峰形对称，人工麝香阴性供试品无干扰，方法具有专属性，按麝香酮计算理论塔板数不低于4 500。色谱图见图1-图3。

　　图1    麝香酮对照品的气相色谱图(M.麝香酮)（略）

　　Figure 1    Gas chromatograms of muscone

　　图2    心力丸供试品的气相色谱图(M.麝香酮)（略）

　　Figure 2    Gas chromatograms of Xinli pills

　　图3    人工麝香阴性气相色谱图（略）

　　Figure 3    Gas chromatograms of negative sample

　　2.2    线性关系考察
      　　
　　精密称取麝香酮对照品0.151 94 g，置100 mL量瓶中，加无水乙醇使溶解并稀释至刻度，摇匀；再分别精密量取0.5、1、2、4、5、6、8、10 mL置10 mL量瓶中，加无水乙醇至刻度，摇匀，精密吸取1 μL进样，测定峰面积，以对照品质量浓度(ρ)为横坐标，峰面积(A)为纵坐标，求得回归方程为A=291382.  2ρ+18117.0，r=0.999 6，麝香酮线性范围为0.076～1.5 mg·mL-1。

　　2.3    供试品溶液制备
     
　　取本品，研细，精密称取3.5 g，置具塞锥形瓶中，加入乙醚30 mL，密塞，冷浸12 h，滤过，残渣和具皿用少量乙醚洗涤数次，合并乙醚液，挥去乙醚，残渣加无水乙醇使溶解并定容至5 mL，摇匀，用0.  45 μm滤膜滤过,取续滤液,即得。

　　2.4    测定方法
     
　　精密吸取供试品溶液和对照品溶液1 μL，分别注入气相色谱仪中，记录色谱图，以外标法计算供试品中麝香酮含量。

　　2.5    稳定性试验
          
　　取同一供试品溶液制备后室温放置,分别在0、1、2、4、6、8、10  h进样测定，每次进样1 μL,测得麝香酮平均含量490.4 μg/g,RSD为0.29%。结果表明供试品在10 h内测定结果稳定。

2.6    精密度试验
     
　　取麝香酮对照品溶液(0.759 7 mg/mL)重复测定6次，测得麝香酮峰面积的RSD值为0.15%。

　　2.7    重现性试验
      　　
　　取同一批供试品，平行6次精密称取，按“2.3”项下方法制备供试品溶液，依“2.4”项测定，计算供试品中麝香酮含量，结果其RSD值为1.4%,表明方法重现性好。

　　2.8    回收率试验
      　　
　　精密称取已知含量的心力丸（麝香酮含量495.  0 μg/g）共9份，置具塞锥形瓶中；取高(1.5194 mg/mL）、中(0.759 7  mg/mL）、低(0.075 97  mg/mL）3个浓度的对照品溶液各3份，每份2 mL，置蒸发皿中,通风柜中挥干乙醇,残渣用适量乙醚溶解,移入称取有供试品的具塞锥形瓶，用乙醚洗涤具皿数次，将洗涤液并入锥形瓶，乙醚用量为30 mL，其余按“2.3”方法制备，按“2.4”方法测定，结果见表1。

　　2.9    样品测定
     
　　取本品6批,按“2.3”项下方法制备供试品溶液，按“2.4”法进行测定，结果见表2。

　　表1    麝香酮回收率试验结果（略）

　　Table 1    Recovery test of muscone

　　表2    样品测定结果（略）

　　Table 2    Assay test of samples

　　3    讨论

　　3.1    提取方法的选择 
     
　　分别考察了超声提取法和浸渍法，结果见表3。结果表明：用乙醚作溶剂的2种提取方法有偏差（相对偏差为3.1%），浸渍法提取比超声法提取损失少，或者说提取较完全；在产品含量测定时采用浸渍法提取，提取适宜时间为12 h；在生产过程中的产品质量检测则可采用超声提取方法。

　　3.2    色谱柱的选择
     
　　曾采用强极性毛细管柱（SHIMADZU  CBP20M25025）进行试验，结果麝香酮很难达基线分离，且被测组分峰有拖尾现象。

　　表3    两种提取方法麝香酮含量测定结果（略）

　　Table 3    Muscone contents from two batches of extractions

【参考文献】
  　　［1］ 唐洪梅,黄樱华,李得堂，等.气相色谱法测定人工麝香中麝香酮的含量［J］.中国实验方剂学杂志,2007,13(9):4-6.

　　［2］ 林巧玲,卓婷.气相色谱法测定保婴散中麝香酮的含量［J］.广东药学院学报, 2006,22(3):257-258.

　　［3］ 袁劲松,汤翠娥.气相色谱法测定紫金胶囊中麝香酮含量［J］.中国医院药学杂志, 2003,23(2):89-91.

　　［4］ 邹巧根,苏建俊.气相色谱法测定麝香保心丸中麝香酮的含量［J］.中国中药杂志, 1994,19(7):418-420.

　　［5］ 王强,毕开顺,陈金泉,等.六神丸中麝香酮含量的GC法测定［J］.中国药科大学学报, 1995,25(6):87-89.