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【摘要】 目的 建立宁心胶囊定性鉴别方法。方法 采用薄层色谱法,分别以化学对照品、药材为对照,鉴别样品中丹参、黄芪、苦参等主要组成药物。结果 样品薄层色谱分别与化学对照品(丹参酮ⅡA、黄芪甲苷、苦参碱)及对照药材(丹参、黄芪、苦参)薄层色谱在相应位置上显相同颜色斑点。结论 定性鉴别方法重复性、可行性好,为宁心胶囊制定定性质量标准提供了依据。
【关键词】 宁心胶囊;薄层色谱法;丹参酮ⅡA;黄芪甲苷;苦参碱
Abstract：Objective To establish the qualitative identification methods of Ninxin Capsules. Methods TLC method was used to identify salvia miltiorrhiza, membranous milk vetch root, radix sophorae flavescentis, with chemical substance and medicinal materials as reference. Results The spots for TLC identification of sample, preparation of chemical reference (Tanshinone IIA, astragaloside, matrine) and medicinal materials (salvia miltiorrhiza, membranous milk vetch root, radix sophorae flavescentis) were in the same position with the same color. Conclusion The method is reproducible and feasible, and provides basis for the qualitative quality standard of Ninxin Capsules.
Key words：Ninxin Capsules;TLC;Tanshinone IIA;astragaloside;matrine
宁心胶囊为本院制剂,由丹参、黄芪、苦参等药物组成,具有宁心安神、益气养心、活血通脉功效和抗心律失常作用,对胸痛、心悸也有良好的治疗效果。本试验采用薄层色谱法,对宁心胶囊样品中的主要组成药物丹参、黄芪、苦参等进行定性鉴别,为本品的质量控制提供依据。现将试验结果报道如下。
1 仪器与试药
PBQ-1型自动铺板器(重庆南岸动力仪器厂),恒温水浴锅(常州国华电器有限公司),紫外透射反射仪(北京六一仪器厂),KQ-500超声波清洗器(上海超声波仪器厂)等。
宁心胶囊(本院制剂室自制,批号080613、081025、090301);对照药材丹参、黄芪、苦参(购自江苏南通鑫鑫医药药材有限公司,经本院陈峰生主任中药师鉴定);对照品丹参酮ⅡA(批号110766-200416)、黄芪甲苷(批号781-9002)、苦参碱(批号100078-200414),供含量测定用,购自中国药品生物制品检定所。硅胶G(青岛海洋化工有限公司产品)。所用化学试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 丹参的鉴别
取丹参酮ⅡA对照品,加乙酸乙酯制成每1 mL含2 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g,加乙醚10 mL,置具塞试管中,超声提取30 min,滤过,滤液挥干,残渣加醋酸乙酯1 mL使溶解,作为供试品溶液。取丹参药材1 g,按上述供试品溶液的制备方法制成对照药材溶液。按处方量,取除丹参外的其余药味按工艺要求制成缺丹参的样品,按供试品溶液制备方法制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分别点于以同一羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以苯-乙酸乙酯(19∶1)为展开剂,展开,取出,晾干, 10%硫酸乙醇液喷雾显色,热风吹干(80 ℃),日光下检视。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗红色斑点。
2.2 黄芪的鉴别
取黄芪甲苷对照品,加甲醇制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末2 g,置索氏提取器中,加甲醇50 mL冷浸1 h,水浴回流2 h;提取液回收甲醇并浓缩至干,残楂加水10 mL微热使溶解;用水饱和的正丁醇萃取3次,合并正丁醇萃取液,用氨试液处理2次,弃除氨液,正丁醇液蒸干,残渣加水3～5 mL使溶解,放冷;通过D101型大孔吸附树脂柱,先以水50 mL洗脱,弃除水液,再用40%乙醇30 mL洗脱,弃除40%乙醇液,继用70%乙醇50 mL洗脱,收集洗脱液,蒸干,用甲醇溶解并转移至2 mL量瓶内,加甲醇稀释至刻度,摇匀,作为供试品溶液。取黄芪药材粉末1.5 g,依上述供试品溶液的制备方法制备对照药材溶液。按处方量,取除黄芪外的其余药味,按工艺要求制成缺黄芪的样品,按供试品溶液的制备方法,制备阴性供试品溶液。吸取上述溶液各5 ?L,分别点于同一以羧甲基纤维素钠为粘合剂的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以氯仿-甲醇-水(13∶6∶2)(10 ℃以下放置过夜)为展开剂,展开,取出,晾开。喷雾10%硫酸乙醇液显色,热风吹至斑点显色清晰。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的暗蓝色斑点。
2.3 苦参的鉴别
取苦参碱对照品适量,加氯仿制成每1 mL含1 mg的溶液,作为对照品溶液。取本品内容物粉末1 g,置具塞锥形瓶中,加氯仿-氨水(25∶0.3)20 mL,超声提取20 min,滤过,水浴蒸干,加氯仿适量溶解,滤过,定容至10 mL,作为供试品溶液。取苦参药材粉末0.5 g,加氯仿25 mL,浓氨试液0.3 mL,放置过夜,滤过,滤夜蒸干,残渣加氯仿0.5 mL使溶解,作为对照药材溶液。按处方量,取除苦参外的其余药味,按工艺要求制成缺苦参的样品,按供试品溶液的制备方法制备阴性供试品溶液。取上述4种溶液各5 ?L,分别点于同一以2%氢氧化钠溶液制备的硅胶G薄层板上,照薄层色谱法[2005年版《中华人民共和国药典》(一部)附录ⅥB]试验[1],以苯-丙酮-甲醇(8∶3∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾开,喷以碘化铋钾试液,热风吹干。供试品色谱中,在与对照药材、对照品色谱相应位置上显相同的鲜红色斑点,而阴性供试品色谱在此位置上无斑点。
注：1,2.对照品;3,4.对照药材;5,6.供试品;7,8.阴性供试品
3 讨论
苦参是本制剂的主要成分之一,笔者参考文献[2]对苦参进行定性鉴别,同时对方中丹参、黄芪进行了定性鉴别。试验结果显示,制剂中丹参、黄芪、苦参药材的薄层定性鉴别斑点清晰明显,结果重复性好,可作为宁心胶囊制订定性质量标准依据。本品君、臣药指标性成分的含量测定方法与标准有待进一步研究制定。
【参考文献】
[1] 国家药典委员会.中华人民共和国药典(一部)[S].北京：化学工业出版社,2005.附录31.
[2] 钱 梅,徐金荣,周进军.宁心胶囊的质量标准探讨[J].时珍国医国药, 2006,17(5)：782.