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中药指纹图谱
六味地黄丸的振荡指纹图谱
来源:药分网
摘要:我们在对草药和生物体内物质参与的化学振荡反应的研究中发现,采用振荡技术可获得草药的化学振荡指纹图谱[1,2]。该图谱是草药中所有成分共同作用的结果,是草药特性的体现。不同的草药具有形状迥异的特征图谱,既使所含主要化学成分相同,其振荡图谱也极具特色,这与中草药的协同作用不谋而合。因此,用此图谱不仅可辨识草药......
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我们在对草药和生物体内物质参与的化学振荡反应的研究中发现,采用振荡技术可获得草药的化学振荡
指纹图谱
[ 1, 2 ]。该图谱是草药中所有成分共同作用的结果,是草药特性的体现。不同的草药具有形状迥异的特征图谱,既使所含主要化学成分相同,其振荡图谱也极具特色,这与中草药的协同作用不谋而合。因此,用此图谱不仅可辨识草药,还可研究草药参与循环的动力学,进而研究草药在人体循环中的作用机制以及药效,从而为
中药
的研究开辟一条新路。本文采用振荡方法对市售的5种浓缩型六味地黄丸进行了振荡指纹图谱研究,获得了它们的典型振荡波形和振荡的浓度范围,以期从这些图谱中获得不同提取工艺与振荡图谱、有效成分与振荡图谱之间的关系。
1 实验方法
1. 1 原料及试剂
5种六味地黄浓缩丸(市售) ,分别为“兰州佛慈”、“湖南九芝堂”、“河南仲景”、“桂林三金”、“宝鸡晨鸡”,试剂为分析纯,溶液用高纯去离子水配制。
1. 2 实验仪器及方法
反应在自制的玻璃反应器中进行,温度控制在( 30 ±0. 2) °C,溶液总体积25 cm3。称取碾成粉末状的各种药粉(精确至0. 000 2 g) ,分别加入水、H2 SO4 ,在均匀搅拌下溶解15 min 后, 再加入MnSO4、丙酮(以Act表示) , 最后加入KBrO3 ,以KBrO3 滴加一半时计时。用213型光亮铂电极作指示, 217型双液接饱和甘汞电极作参比, PXS2215型离子活度计监测体系电势变化, XWZK21537型记录仪记录,便可得到各药品的电势E随时间T的变化图,经计算机处理,便得到该药品的振荡指纹图谱。
2 实验结果
2. 1 振荡指纹图谱
在同一实验条件下, 即在[底物]0 = 0. 008 mol/dm3 ,[BrO -3 ]0 = 0. 040 mol/dm3 , [Mn2 + ]0 = 0. 016 mol/dm3 ,[Act ]0 = 0. 054 mol/dm3 , [H + ]0 = 0. 72 mol/dm3 , T = 303 K,记录仪走纸速度: 5 mm /min的条件下,以不同品牌的六味地黄丸粉末为振荡底物,可获得它们在同一浓度时的振荡指纹图谱如图1~5,实验的重现性良好。
比较图1~5可以看出,在同一实验条件下,上述图谱尽管在振荡周期上有差别,但除“宝鸡晨鸡”外,其余4种品牌的指纹图谱非常相似。而“宝鸡晨鸡”在底物浓度为0. 016 g·mL - 1时的指纹图谱与“兰州佛慈”的完全相同(见图6) 。根据振荡反应原理,只有所含的化学成分相同,其图谱才可能相同。因此,可认为它们所含的化学成分几乎相同。
2. 2 振荡浓度范围
在上述实验条件下,不同品牌的六味地黄丸在振荡体系中的浓度范围见表1。
2. 3 不同浓度时的指纹图谱
图7是“宝鸡六味”在浓度为0. 032 g·mL - 1时的振荡图谱,与图5相比,其振荡频率明显加快,周期变小,说明增加底物浓度可加速振荡。也就是说,样品中所含的能引起振荡的化学成分越多,其振荡波形的周期越短。因此各样品的振荡指纹图谱实际表征着该样品有效成分的含量。能引起振荡的底物浓度越低,其有效成分的含量越高。
3 讨论
3. 1 振荡指纹图谱的获取原则
振荡图谱是样品中所有成分共同作用的结果,是中药协同作用的体现。药方中有效成分含量、振荡底物浓度、溶样时间、温度等都会影响振荡图谱。因此在研究药品的振荡指纹图谱时应遵循以下原则: ( 1 ) 尽量保持化学振荡器KBrO3 —MnSO4 —H2 SO4 —丙酮的浓度一致,通过改变草药在振荡体系中的浓度,寻找重现性较好且能反映该草药特点的振荡指纹图谱; (2)若不能满足该条件,可适当调整振荡体系中H +的浓度,以获得该草药的指纹图谱; (3)疗效相同的同类草药或同种成药,应尽量采用同一振荡浓度,以寻找它们之间的共性和不同点; (4)溶样时间应尽量相同,才能保证图谱的重现性和准确性; (5)绘制图谱时的温度要恒定。
3. 2 单味药的指纹图谱
六味地黄丸药方中的单味药牡丹皮、山茱萸、山药、熟地黄、茯苓、泽泻等6味药材除泽泻外,其它各单味药的振荡指纹图谱均已获得。图8和图9是牡丹皮及山茱萸的振荡图谱,将这些图谱与各种品牌的六味地黄丸振荡指纹图谱进行比较可以看出,只有其第一周期与牡丹皮的振荡图谱相似。因此用振荡图谱难以考查样品中单味药的含量。但由于振荡图谱是样品中所有成分共同作用的结果,体现的是样品的协同作用。这就提示我们,可以利用振荡图谱来考查成品药中单味药的来源。
药典规定[ 2 ] ,六味地黄丸的测定指标是采用分光光度法及薄层色谱法测定牡丹皮中的丹皮酚和山茱萸中的熊果酸。但利用这些方法分析时,仅能测出样品中熊果酸的含量,而无法确定熊果酸的来源。如车前、鹿衔草等均含有熊果酸,若采用这些原料替代山茱萸,在色谱上仍能获得熊果酸的含量,但该药已不是六味地黄丸。由于振荡图谱是所有成分共同作用的结果,不同的原药,将有不同的振荡指纹图谱,因此采用振荡指纹图谱在考察成品药来源时就能克服此弊端。
3. 3 由指纹图谱判断有效成分含量
振荡指纹图谱中的波形、波数、振荡周期或振荡频率,是判断样品有效成分含量的重要标志。比较5种市售六味地黄丸的振荡图谱可以看出,在同一振荡浓度时,不同品牌的产品,除宝鸡六味外,其余品牌的图谱非常相似,说明它们的提取工艺相同,品质相同。
从已获得的60余种单味草药及5种成药的化学振荡图谱实验数据表明,振荡浓度与样品中有效成分的含量成正比,且有下列关系式:C = nKf / tp E式中: C为有效成分的浓度, K是比例常数, n为波数, f为振荡波频率, tp 为振荡周期, E为振荡电势。利用振荡方法研究中草药是一种新的尝试,它们之间准确的定量关系还需今后进一步研究。
4 结论
利用化学振荡方法可以获得单味药和成药的化学振荡指纹图谱。振荡指纹图谱是样品中所有成分共同作用的结果,是样品协同作用的体现。振荡波形是样品特征和特性的反映,每种样品都有自己的特征波形。振荡的起始浓度越低,其有效成分的含量越高;在同一振荡浓度时,振荡图谱相似,产品的品质相同。在考查成药时,振荡指纹图谱可以限制成药中单味药的来源。
作者: 2006-3-27
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相关主题关键词
振荡
指纹
图谱
浓度
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