中药材何首乌质量标准的研究
研究内容
1.药材的鉴别
2.药材的检查
3.药材的重金属检测
4.药材的农药残留检测
5.药材的含量测定
6.药材的
指纹图谱的研究
何首乌薄层鉴别
1、二苯乙烯苷 2、对照药材
3、第一批 4、施秉基地16个月生何首乌
5、施秉基地20个月生何首乌 6、施秉基地12个月生何首乌
7、施秉基地19个月生何首乌 8、施秉基地4年生何首乌
9、广东野生何首乌 10、广东栽培何首乌
何首乌药材水分上限的制定
将何首乌粉碎，使能通过二号筛，混合均匀后，取粉末5g ，置Sartorius MA45型水分测定仪测定，条件:105℃ 1mg/24s。结果如下
样品号 一 二 三 平均（％）
一年生（第一批） 10.83 10.23 10.20 10.42
基地12个月 9.52 9.65 9.63 9.60
基地16个月 1055 10.62 10.66 10.61
基地19个月 13.01 13.19 13.16 13.12
基地2年生 8.48 8.78 8.88 8.71
基地4年生 11.25 11.23 11.08 11.19
广东栽培 10.02 10.11 9.89 10.01
广东野生 11.03 10.11 11.13 11.08
何首乌总灰份上限的制定
总灰分测定法 去本品粉末（过二号筛）2g，置炽灼至恒重的坩埚中，称定重量（准确至（0.01g）缓慢炽热，至完全炭化时，逐渐升温至500～600℃，使完全灰化并至恒重。根据残渣重量，计算供试品中总灰份的含量。结果如下
产地 含量（％）
施秉基地一年生（第一批） 2.8
施秉基地12个月生 2.2
施秉基地16个月生 2.0
施秉基地19个月生 1.9
施秉基地2年生 1.8
施秉基地4年生 2.2
广东栽培 2.5
广东野生 2.3
何首乌浸出物的制定
1、水溶性浸出物
产地 冷浸 热浸
施秉基地一年生（第一批） 14.6 24.7
施秉基地12个月生 22.9 29.9
施秉基地16个月生 17.0 25.4
施秉基地19个月生 17.0 21.2
施秉基地2年生 21.3 28.9
施秉基地4年生 14.6 13.6
广东栽培 25.3 24.1
广东野生 29.4 35.3
结论：照水溶性浸出物测定法项下的冷浸法（附录X A），不得少于10％
照水溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录X A），不得少于10％
何首乌浸出物的制定
2、醇浸出物测定
产地 冷浸 热浸
施秉基地一年生（第一批） 8.4 10.6
施秉基地12个月生 15.5 16.6
施秉基地16个月生 8.7 9.1
施秉基地19个月生 11.7 13.4
施秉基地2年生 14.6 13.7
施秉基地4年生 6.2 8.0
广东栽培 17.0 21.9
广东野生 24.7 29.1
结论：照醇溶性浸出物测定法项下的冷浸法（附录X A），不得少于5％
照醇溶性浸出物测定法项下的热浸法（附录X A），不得少于8％
何首乌重金属检测
1、仪器及工作条件
仪器型号：法国产 JY38plus型单道顺序扫描等离子发射光谱（ICP－AES）
波长范围 170~550nm
光源： ICP光源 频率 40.68MHz 使用功率 1.12kw 反射功率 <；3W
进样系统：玻璃同轴气动 V型雾化器 以蠕动泵进样
工作气体：>；99.99％Ar 气路压力 6.0kg/cm2 冷却气 12L/min 护套气 0.5L/min H EBV 0.3L/min
狭缝宽度：入射22μm 出射25μm
观察高度：工作线圈上方 15mm
2、检测结果
样品批号 As Cd Pb Hg Cr Cu
第一批 <；0.5 <；0.5 <；0.5 <；0.5 5.6 3.4
12月个生 <；0.5 <；0.5 <；0.5 <；0.5 4.0 3.1
16月个生 1.4 <；0.5 <；0.5 <；0.5 4.6 3.6
19月个生 0.8 <；0.5 <；0.5 <；0.5 5.0 4.0
2年生 1.2 <；0.5 <；0.5 <；0.5 4.3 3.7
4年生 1.3 <；0.5 <；0.5 <；0.5 4.5 3.2
结论：含重金属不得过10ppm。
何首乌砷盐检测
1、检测结果
产地 检测结果
施秉基地一年生（第一批） <；2ppm
施秉基地12个月生 <；2ppm
施秉基地16个月生 <；2ppm
施秉基地19个月生 <；2ppm
施秉基地2年生 <；2ppm
施秉基地4年生 <；2ppm
广东栽培 <；2ppm
广东野生 <；2ppm
结论：本标准提出AS％不得大于2ppm。
附：照片
何首乌农药残留的检测
1、仪器与色谱条件
仪器：Agilent 6890N气相色谱仪（包括63Ni电子捕获检测器，安捷伦色谱 工作站），HP-1701弹性石英毛细管柱（30m×0.32mm×0.25um，J&W）
色谱条件：进样口温度230℃，检测器温度300℃，柱升温程序为初始温度100℃，以10℃/min升至220℃保持，以8℃/min升至250℃保持10min；载气为高纯氮（纯度>；99.9999％），进样量1µ；l，外标法定量。
2、农药标准品：
六六六（BHC）包括α－BHC，β－BHC，γ－BHC和δ－BHC 4种异构体；滴滴涕（DDT）包括pp –DDE，pp –DDD，pp- DDT和op –DDT 4种同系物；五氯硝基苯（PCNB）；艾氏剂均购自国家农药标准品中心，纯度>；98％
农药残留检测色谱图
检测结果
含量（ng/g） α-BHC PCNB γ-BHC 艾氏剂 β-BHC δ-BHC PP-DDE OP-DDT PP-DDD PP-DDT
施秉基地一年生（第一批） 5.250 5.668 未检出 29.312 未检出 未检出 4.628 2.880 1.906 4.686
施秉基地12个月生 5.040 5.407 未检出 29.723 未检出 未检出 5.516 7.692 3.794 5.784
施秉基地16个月生 5.838 5.312 未检出 35.947 未检出 未检出 4.852 4.673 3.924 7.426
施秉基地19个月生 6.605 5.526 未检出 37.488 未检出 未检出 3.972 4.366 3.486 5.502
施秉基地24个月生 5.559 7.976 未检出 27.921 未检出 未检出 5.292 8.033 2.658 7.426
施秉基地4个月生 5.690 8.329 未检出 30.171 未检出 未检出 6.119 6.848 3.025 4.444
含量（ng/g） 总BHC PCNB 总DDT 艾氏剂
施秉基地一年生（第一批） 5.250 5.668 14.102 29.312
施秉基地12个月生 5.040 5.407 22.786 29.723
施秉基地16个月生 5.838 5.312 20.865 35.947
施秉基地19个月生 6.605 5.526 17.326 37.488
施秉基地24个月生 5.559 7.976 23.408 27.921
施秉基地4个月生 5.690 8.329 20.436 30.171
农药残留检测
结论：
六六六（总BHC）不得过千万分之二；
滴滴涕（总DDT）不得过千万分之二；
五氯硝基苯（PCNB）不得过千万分之一（参照2000版《中国药典》甘草项下的标准）；
艾氏剂不得过千万分之二（参照国家绿色行业标准）。
含量测定
（一）2，3，5，4‘-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9）含量测定
仪器：Waters alliance2695型高效液相色谱仪，2696型DAD检测器， Hypersil ODS C18（5μm，250×4.6mm）柱，
色谱条件与系统适用性试验 ：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相为乙腈-水（25：75），检测波长为320nm，柱温为25℃，流速为1mL／min。进样量10ml， 理论踏板数按2，3，5，4‘-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9）峰计算不低于5000。
检测结果
产地 除去水分后含量（mg/g）
施秉基地一年生（第一批） 21.6
施秉基地16个月生 17.9
施秉基地19个月生 22.3
施秉基地2年生 19.5
施秉基地4年生 20.3
广东栽培 17.5
广东野生 82.9
四川（三点堂） 17.7
云南（黄庆仁） 10.4
云南（汇仁堂） 19.5
结论: 本品含2，3，5，4‘-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷（C20H22O9）不得少于10mg/g。
含量测定
（二）大黄素含量测定
仪器：Waters2695型高效液相色谱仪，Waters2696型DAD紫外检测器， Hypersil ODS -C18（5μm，250×4.6mm）柱，
色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；甲醇-0.1％磷酸（80：20）为流动相；检测波长288nm，柱温为25℃，流速为1mL／min。进样量10ml，理论踏板数按大黄素蜂计算不低于5000。
图谱
图 1对照品图谱
图2 药材图谱
检测结果
产地 除去水分后含量（mg/g）
施秉基地一年生（第一批） 0.59
施秉基地12个月生 0.66
施秉基地16个月生 0.506
施秉基地19个月生 0.90
施秉基地2年生 0.87
施秉基地4年生 0.71
广东栽培 0.48
广东野生 2.39
结论: 本品含大黄素不得少于0.05％
何首乌指纹图谱的制定
1、仪器与试药
仪器：Waters alliance 2695型高效液相色谱仪，2696型DAD检测器， Hypersil ODS -C18（5μm，250×4.6mm）柱。
试剂：乙腈（色谱级），MILLIPORE蒸馏水，磷酸（分析纯）。
2、色谱条件
流动相：乙腈-0、4％磷酸
波长：410nm
流速：lml／min
进样体积：20ml
指纹图谱
何首乌药材指纹图谱
不同生长期
不同产地
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作者：
2006-4-1