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急性子为凤仙花科植物凤仙花Impatiens balsamina L.的干燥成熟种子，夏秋种子即将成熟时采收。急性子具有软坚消积、降气行癖、透骨通筋活血的作用［1］。急性子来源丰富，全国各地均有栽培，为了考察其化学成分的差异，我们建立了急性子8批药材的指纹图谱。指纹图谱技术作为一种多组分复杂样品的有效质量方法，能够反映出待测样品的整体性、特征性，通过急性子药材的指纹图谱研究，为该药材的全面质量控制建立了有效的方法，为不同产地急性子的鉴别及应用提供技术支持。
1 仪器、试剂与药材
美国Agillent 1100 高效液相色谱仪，二级阵列检测器。乙腈为色谱纯，水为娃哈哈纯净水。8批样品分别为山东、河南、西安、湖北、安徽、沈阳、四川、北京的药材，药材来源见表1。表1 急性子药材来源（略）
2 方法
2.1 色谱条件色谱柱为迪马公司C18（4.6 mm×200 mm）；流动相： 0.1%甲酸（A）- 乙腈（B），梯度洗脱程序为（B）；0～15 min，25 %～90 %；15～20 min，90%，20.01～25 min，25%。体积流量为1.0 ml/min，柱温为30℃，检测波长为260 nm。
2.2 供试品溶液制备取急性子药材粉末1.0 g，精密称定，置三角瓶中，精密加入甲醇20 ml，称重，过滤，超声提取20 min，取出，放凉，称重（必要时补足所失重量，摇匀），滤过，取续滤液经微孔滤膜滤过，溶液备用。
2.3 测定方法分别精密吸取不同地区（山东，河南，西安，湖北，安徽，沈阳，四川，北京）的急性子药材试品溶液5 μl，注入高效液相色谱仪，记录25 min 的色谱图即得。供试品色谱图中，以色谱峰（S峰）的保留时间和峰面积为参照，计算各指纹峰的相对保留时间和峰面积比值。
2.4 分析时间考察吸取供试品溶液S6溶液5 μl，注入高效液相色谱仪，运行55 min，记录色谱图，发现25 min以后已无明显色谱峰，因此分析时间定为25 min。
3 结果与分析
3.1 指纹图谱及技术参数［2］
3.1.1 共有峰的标定本实验以急性子的急黄新苷色谱峰为参照，确定其相对保留时间为1，计算其他主要色谱峰的相对保留时间，标定出13 个共有峰，分别为：①1.000；②（1.060±3.7）%；③（1.119±4.3）%；④（1.198±15.8）%；⑤（1.394±10.2）%；⑥（1.490±2.4）%；⑦（1.610±13.3）%；⑧（1.985±2.7）%；⑨（2.272±4.0）%；⑩（2.827±1.4）%；（3.059±1.5）%；（3.378±0.81）%；（3.805±1.01）% ，结果见表2，指纹图谱见图1。表2 HPLC -紫外指纹图谱相对保留时间（略）
3.1.2 共有峰面积比值 以急黄新苷面积作为1，计算各共有指纹的相对峰面积，结果各相对峰面积差异较大，表明不同地区的药材质量之间存在较大的差别。结果见表3。表3 HPLC-紫外指纹图谱相对峰面积（略）
3.1.3 谱峰匹配 本实验根据样品相对保留时间，结合样品指纹图谱的谱峰形状特点对标定的共有峰进行匹配。结果所标定13个共有峰匹配无误,见图2。
3.2 方法学考察
3.2.1 稳定性考察 取同一份供试品溶液，分别在0，2，4，8，16，24 h考察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积，结果表明，24 h内样品稳定性良好。
3.2.2 精密度考察 取同一份供试品溶液，连续进样5次，考察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积，RSD分别为0～1.07 %和0～1.09 %,结果表明，仪器精密度良好。
3.2.3 重复性考察 取药材5份，按确定的实验方法操作，分别进行测定，考察各共有峰的相对保留时间及相对峰面积，RSD分别为0～1.07 %和0～1.08 %,结果表明，方法重复性良好。
3.3 急性子的指纹图谱的建立、分析与评价 对8份急性子供试品的色谱分离图进行叠加比较可以看出，8份急性子的供试品HPLC指纹图谱具有较高的一致性，它们可作为鉴别急性子的必要条件之一。由表2可以看出13个峰相对峰面积相差较大，说明其生长条件不同；相同化学成分的含量有所不同，即药材质量间存在一定的差异，因此对不同的急性子供试品共有指纹峰的相对面积进行比较，可以鉴别不同来源急性子的质量。
4 结论
采用HPLC法分别建立药材HPLC-紫外指纹图谱，方法简单，重复性好，检测灵敏度高。
【参考文献】
［1］ 胡喜兰，朱 慧，刘存瑞，等．凤仙花的化学成分研究［J］．中成药，2003，25(10)：833.
［2］ 狄留庆，刘圣金，赵晓莉，等．杜仲药材HPLC指纹图谱及其共有模式的建立［J］．中草药，2007，38（4）：596.