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根据典型杂音、右心房扩大及体循环淤血的症状和体征，一般即可做出诊断，对诊断有困难者可行右心导管检查，若三尖瓣平均跨瓣舒张压差在0.27kPa(2mmHg)以上，即可诊断为三尖瓣狭窄。应注意与右房粘液瘤、缩窄性心包炎等疾病相鉴别。
<辅助检查>
（一）X线检查 右心房明显扩大，下腔静脉和奇静脉扩张，但无肺动脉扩张。
（二）心电图检查 右心房肥大，Ⅱ及Ⅴ1导联P波高尖；由于多数三尖瓣狭窄患者同时合并有二尖瓣狭窄，故心电图亦常示双心房肥大。无右心室肥大的表现。
（三）超声心动图检查 三尖瓣的变化与二尖瓣狭窄时观察到的相似，M型超声心动图常显示瓣叶增厚，前叶的EF斜率减慢，舒张期与隔瓣呈矛盾运动、三尖瓣钙化和增厚；二维超声心动图对诊断三尖瓣狭窄较有帮助，其特征为舒张瓣叶呈园顶状，增厚、瓣叶活动受限。多普勒超声可估测跨瓣压力阶差。