铁是人体重要的微量元素之一，人体内总铁含量为4克左右，人体内铁含量70% 存在于血红蛋白分子中，20% 以贮存铁形式存在于肝、脾、骨髓等组织中，其余则广布于多种细胞呼吸酶类或辅酶中，这也包括血红蛋白类；血浆中含铁量较低，仅占体内总铁量的0.1%。
人类血清中总铁含量为3~4毫克，以与转铁蛋白相结合的形式存在。血清中铁的浓度通过红细胞产生或降解的速度来调节，血清中铁的含量反应了人体造血器官的功能。另外，体内铁存储量的动态也影响血清中铁的浓度，例如肝炎时，铁从干细胞转移到其他组织，使血清铁浓度增高。血清铁浓度增高或降低不仅能反映造血功能疾病（缺铁性
贫血、再生障碍性贫血、恶性贫血、溶血性贫血、白血病和红细胞增多症等），而且能反映其他系统的疾病（例如感染性疾病、急性肝炎、
肝硬化、血色病和肾病等），因此血清中铁浓度的测定是
临床上一项重要的检查项目。
作为“863”计划重点项目“生物医学关键试剂”的牵头单位，中生北控生物科技股份有限公司在原有铁测定干粉单试剂和干粉双试剂的基础上，在“863”计划重点项目的支持下，研发了新产品“铁测定试剂盒”（亚铁嗪法液体双试剂）。该产品负责人蒋琳说：“中生北控已有干粉试剂产品，也已经建立了血清铁测定的研究平台，并积累了大量的血清铁测定的临床评价，加之‘863’计划的支持，在此基础上进行铁测定液体双试剂的开发，条件得天独厚。”
检测血清铁的方法主要有原子吸收光谱法和比色分析法。原子吸收法是目前测定血清铁的参考方法，但其仪器昂贵，操作复杂，难于在临床实验室推广应用。比色分析法中因采用的还原剂或显色剂不同而有很多种方法。蒋琳说：“《全国临床
检验操作规程》中推荐的亚铁嗪分光光度法测定血清铁，灵敏度低，血清用量大，操作步骤烦琐、时间长，也难以推广。如何将亚铁嗪法推广至全自动生化分析仪，使其具有大规模样品分析能力，同时具有显色稳定性好、灵敏度高、线性良好、线性范围大、精密度较好、准确度较高的特点，成为目前临床诊断试剂市场上开发的热点。”
目前国内市场上销售的铁测定试剂盒中，大部分产品为干粉试剂。据蒋琳介绍，由于传统铁测定试剂中的还原剂使用的是抗坏血酸，而抗坏血酸在溶液中极不稳定，其水溶液在室温下放置24小时即会被氧化成黄色，因此在试剂盒中只能配制成干粉的形式。这样在检测时需先用R1液体溶解R1干粉，配成R1工作液后再使用，操作步骤烦琐。而在临床上，全自动化分析仪的日渐普及和病例的增加，对液体试剂的需求逐渐增多。
在传统技术中，所用防腐剂叠氮钠毒性大，容易对生产者和使用者造成伤害。另外，传统技术所用酸性缓冲液甘氨酸，其酸性较弱，盐酸胍在其中的变性能力不强，因此也会造成试剂盒最低检出浓度高，灵敏度低。
中生北控的全新铁测定液体双试剂，采用全新组方，有效改善了上述传统试剂的缺陷。据悉，该产品可应用于日立、奥林巴斯等品牌的全自动生化分析仪，中生北控公司在获得该产品医疗器械注册证的同时，已经着手进行专利申请，现正在公示期内。
研发手记
早在2003年，中生北控生物科技股份有限公司已经开发出干粉单试剂和干粉双试剂铁测定试剂盒，分别用于半自动生化分析仪和全自动生化分析仪。在实际的临床应用中，发现干粉剂型有很多缺点。首先，在检测时，需先用R1液体溶解R1干粉，配成R1工作液后再使用，操作步骤烦琐。次之，R1干粉在分装时，易产生瓶间差，导致测定结果重复性差。另外，传统的铁测定试剂盒以甘氨酸作为酸性缓冲液，变性剂在其中的变性能力不强，因此试剂盒最低检出浓度高，灵敏度低。而且，传统的试剂中使用的防腐剂叠氮钠的毒性非常大，它阻断细胞色素电子运送系统。叠氮钠可因吸入、咽下或皮肤吸收而损害健康。大批量生产时使用大量叠氮钠，如果不经过严密防护会对工人身体产生伤害。另外，叠氮钠与酸性溶液反应会放出有毒气体，测定时操作者打开试剂瓶盖时可能会吸入有毒气体。基于上述种种缺陷，公司决定应用新技术，研发新的铁测定试剂盒。
2006年初，此项目正式进入研发阶段。研发人员根据试剂盒的反应原理，分别对反应体系中的蛋白质变性剂、还原剂、酸性缓冲液和显色剂进行了筛选。通过文献调研和实验，最终确定了优良的蛋白变性剂；用维生素C的钠盐作为还原剂，增强了试剂的稳定性；同时选用了既可以与变性剂共同作用，使蛋白变性，释放出铁离子，又可以用作防腐剂的酸性缓冲液，取代了叠氮钠，降低了试剂的毒性；显色剂则选取了灵敏度高、线性范围宽、重复性好的亚铁嗪。2007年形成了铁测定试剂盒液体双试剂的配方。新的试剂具有重复性好，灵敏度高，抗干扰性强，毒性低的特点。2009年拿到注册证，现在已经进行了生产和销售，在市场上赢得了好评。（蒋琳：中生北控“铁测定试剂盒”项目负责人）
作者：
2010-6-25