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猪也会患上白化病和帕金森综合征?中科院广州生物医药与健康研究院的研究员们,近日通过基因敲除技术使猪发生基因突变,成功孕育出患帕金森综合征及白化病的小猪。这些小猪身价超30万,将代替人类与疾病研究死磕,成为“试药者”。该研究成果于10月2日,在线发表在Cellular andMolecular LifeSciences上。
先让猪细胞出现基因突变
翻出小猪刚出生时的照片,出自同一个“母亲”的两姊妹一白一黑。健康的黑色小猪,是实验中的“漏网之鱼”。而纯白色的小猪,正是研究团队想要的,患了白化病的猪。怎么就能让猪乖乖地得上人类的疾病呢?研究员们先从怀孕的母猪下手。为了方便对比实验效果,孕育白化病小猪的母猪选择一种纯黑色的版纳小型猪。
研究员们在母体中刚发育35天的小猪宝宝身上分离出“成纤维细胞”。细胞在无菌实验室中进行精心的培养。随后开始关键一步,即使用C R ISPR /C as9技术,针对猪的酪氨酸酶、PA R K 2和PIN K 1基因的外显子设计了Cas9打靶质粒,将细胞中的基因序列进行打靶修饰,所谓修饰,其目的是使猪出现与人类疾病同样的基因突变。
15头母猪做“代孕妈妈”
修饰后的细胞核被注入一个全新的卵子中形成重组胚胎,这就是动物克隆技术了。经历这一系列“蜕变”之后,重组胚胎将被植入动物子宫,这就需要找母猪来做“代孕妈妈”。研究员们共选了15个“代孕妈妈”。有的母猪成功怀孕了,有的没有怀上,有的流产了,还有的经过白化病相关基因突变后的母猪生出了“黑白配”,即一半是成功得病的白色猪,另一半依旧是纯黑色。这就是刚说的“漏网之鱼”,黑色小猪是因为基因修饰未成功而意外出生的。
不过,该研究团队成员之一的杨化强博士介绍,相较于此前的T A LE N技术(靶向基因敲除)基因突变30%的成功率,最新使用的C R ISPR /C as9技术突变成功率已大大提升,可达80%。