点击显示 收起
强直性肌营养不良基因CTG与临床、肌电图的相关分析
中国神经免疫学和神经病学杂志 1999年第4期第6卷 论著摘要
作者：邓本强 郑惠民 谢惠君 崔毅 张社卿 任大明 林元凯
单位：上海长海医院神经科，上海200433
关键词: 强直性肌营养不良；三核苷酸；临床症状；肌电图
中图号 R746
本文报道对 2 例强直性肌营养不良症患者和家系成员的CTG(胞嘧啶、胸腺嘧啶、鸟嘧啶)进行重复检测，以及与临床表现、心电图和肌电图的相关分析研究结果。
1 资料和方法 2 例强直性肌营养不良症(DM)患者和家系成员进行肌强直电位、MCV、SCV、VEP和心电图检查。按《实用神经病学》拟定的标准确诊。分别抽取10 mL静脉血置于肝素抗凝管摇匀。取 0.5 mL肝素抗凝，加入0.5 mL裂解缓冲液，混匀后用13 000×g离心20 s，吸去上清液，沉淀，重悬浮于1 mL裂解缓冲液。重复2～3次直至去净红细胞。然后离心去上清液后悬浮于0.1 mL聚合酶链反应(PCR)缓冲液中加3 mL/(10 mg*mL)的蛋白酶K，水浴后冻存备用。采用PCR热循环仪(美国Perkin-Elmer公司)，以改进的DNA序列(正链5′-CGAAGGGTCCTTGTAGCCGGGA-3′和负链5′-CATCCACGTCAGGGCCTCAGC-3′)为引物，将反应体系25 mL扩增。25 mL PCR产物在电压100 V的电泳缓冲液中电泳5 h。在半干燥电转移装置(美国BIO-RAD公司)上，800 mA 1 h，将 DNA 转移至带正电尼龙膜(德国Boehringer Mannheim公司)上。经地高辛标记后为探针，在烘好的尼龙膜上杂交过夜后显色。
2 结果 受检者中肌强直电位占4/8(50%)，均为家系2中有临床症状者。VEP检查P100潜伏期延长者为 5/9(55.5%)，MCV减慢者3/8(37.5%)，SCV减慢者2/8(25%)。CTG重复数大于35个者10/12，具有临床症状者CTG重复数均高(6/6)，无临床症状者CTG重复数异常4名(家系1)。心电图示传导阻滞多见，VEP的P100潜伏期延长。MCV和SCV减慢均见于CTG重复数高者。
3 讨论 DM 遗传位点在染色体19q13.3上，其基因动态突变发生在肌强直蛋白激酶基因3不翻译区，3个脱氧核苷酸CTG短串联重复，正常人CTG三核苷酸重复数目5～37个。当CTG拷贝数增加值超过正常数5%以上会致病，重复数在50～80个时被称为原始突变。我们所观察的两个家系大于35个者为10/12，具有临床症状者CTG重复数均高(6/6，100%)，无临床症状者CTG重复数异常占4/6。家系2中的CTG拷贝数均超过190个，先证者及其儿子则＞1 605个，临床症状亦重。家系1中未检出临床患病者，但3名有心电图异常，4名CTG拷贝数大于60个。结果说明CTG拷贝数与临床病情程度相一致。本文报道家系2为母系遗传，与国外同类报道一致。心电图、VEP、SCV、MCV和肌强直电位等证实，DM患者具有心脏、肌肉、中枢和周围神经等多系统的累及表现，有临床症状6名受检者均有白内障。心电图以传导阻滞多见，心电图示传导阻滞者其P100潜伏期亦延长，高于国内报道的50%。MCV和SCV减慢均见于CTG重复数亦高者。NCV检查结果说明，DM患者神经末梢可能亦有病变，临床和肌电图分析仍然是临床诊断的主要手段。
(1998-06-04 收稿)