IV型胶原酶联免疫吸附测定法的建立及在肝纤维化诊断中的应用

摘要 本文从人胎盘提纯IV型胶原(C IV)，免疫免制备出高效价的特异抗体。应用自制的C IV，抗C IV IgG和辣根过氧化物酶标记抗C IV IgG建立了检测血清C IV的酶联免疫吸附测定法(ELISA)。方法学评价表明该法标准曲线线性范围25—800ug／L;灵敏度8ug／L；批内和批间变异系数分别为6．8％和9．6％；回收率94．0％；特异性良好，与I型胶原，Ⅲ型前胶原，层粘蛋白，透明质酸无交叉。应用该法检测了如名正常人和120例各种肝病患者的血清标本。正常对照组血清C IV浓度为57．4±21．7ug／L。急性肝炎，轻度慢性肝为，中度慢性肝炎，肝硬化和原发性肝癌组的血清C IV水平分别为84．6土34．2，76.7±31．1，154．7±78．9，295．7±134．7和244．8±133．7ug/L。与正常对照组比较，中度慢性肝炎，肝硬化和原发性肝癌患者的血清C IV水平显著升高(P<0．001)；急性肝炎和轻度慢性肝炎线的C IV水平略有升高；但显著低于中度慢性肝炎，肝硬化和原发性肝癌组(P<0．001)。轻度慢性肝炎，中度慢性肝炎，肝硬化和原发性肝癌的血清C IV水平呈依次升高，符合慢性肝病的病理变化的特征，表明建立的ICV ELISA法对肝纤维化及肝硬化的诊断具有临床应用价值。该法灵敏，特异，操作简便，无放射性污染，易于推广，为肝纤维化及肝硬化的诊断和治疗监测提供了一项简便实用的方法。