点击显示 收起
【关键词】 流式细胞术；网织红细胞；显微镜
网织红细胞是尚未完全成熟的红细胞，其胞浆尚存有嗜碱性的 RNA 物质。众所周知，网织红细胞目视计数误差较大，其原因为操作人员对网织红细胞的认识不同、血涂片的质量等。流式细胞仪具有对细胞分析和分选的功用，是近年来荧光细胞分析技术的创举，开创了生物细胞研究及临床检测应用的新领域。流式细胞术具有高速度、高灵敏度、高精度、高纯度、高细胞数量、高参数等特点。我们应用流式细胞术和传统的煌焦油兰法对血中网织红细胞进行了对比分析，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 对象 正常人静脉血 56 例，其血常规的各个参数均在正常范围内。
1.2 仪器及试剂 使用仪器为美国贝克曼公司生产 FC-500 流式细胞仪，试剂由贝克曼公司提供，为进口试剂。
1.3 方法 煌焦油兰法［１］：按全国临床检验操作规程操作。流式细胞术：取肝素抗凝血 50 μl，采用 0.01%的 Pyronin-Y 进行染色 20 min，严格按 FG-500 的操作规程操作。
2 结果
2.1 56例血样检测均获成功。流式计数法所得结果为1.60±1.12，涂片光镜下计数所得结果为0.92±0.24。两种方法的结果经统计学直线相关分析（r=0.6086，n=56，P＜0.01）呈高度正相关，有显著性差异。
2.2 对其中 6 例血中网织红细胞用两种方法进行了 4 次重复性测定，流式细胞术所得结果均值的变异系数（CV=4.8%）显著低于光镜计数法（CV=12.2%），说明流式细胞术比光镜计数法具有更好的重复性。
3 讨论
流式细胞术是从 RNA 定量角度去计数网织红细胞，不仅可自动化计数，还可根据 RNA 含量的不同去揭示网织红细胞发育过程中动力学的变化，根据网织红细胞 RNA 含量的分布直方图，可直观地了解血中各期网织红细胞的分布状态。流式细胞术比光镜计数网织红细胞的均值偏高，这可能是一些Ⅳ期的网织红细胞在光镜下辨认困难，而流式细胞术检测具有极高的灵敏度，对于发出较弱光的Ⅳ期网织红细胞也可以探测到荧光信号所致。流式细胞仪测定网织红细胞 RNA 与计数，具有速度快、信息量大、统计学精度高、重复性好等优点，且网织红细胞 RNA 含量的分析与网织红细胞计数相结合更能反映骨髓造血机能状态。因此，流式细胞术可作为评价骨髓造血功能的一种新方法，为临床贫血疾病的诊断和疗效的观察提供更加可靠的信息，具有更为重要的价值。
参 考 文 献
1.叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程［Ｍ］.第 2 版.南京：东南大学出版社，1997.14
滨州医学院附属医院 滨州市 256603