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【摘要】 目的 了解大肠埃希菌对抗生素耐药性变迁,为临床治疗提供参考。 方法 菌株鉴定和药敏试验采用ATB全自动微生物分析仪进行测定，超广谱β-内酰胺酶（ESBLs）采用双纸片协同法。 结果 从2001～2005年检出的大肠埃希菌对青霉素类药物耐药率最高，对亚胺培南耐药率最低，氨基糖苷类和第三代头孢菌素药物具有较好的体外抗菌活性，大肠埃希菌超广谱β-内酰氨酶（ESBLs）的发生率呈逐年上升的趋势，分别是8.5%、16.4%、19.3%、25.4%、27.8%。 结论 随着抗生素的广泛使用，大肠埃希菌的耐药性逐渐上升，要加强对其的耐药性监测，指导临床合理用药。
【关键词】 大肠埃希氏菌 耐药性 超广谱β-内酰氨酶
The variation of drug resistance of clinically isolated Escherichia coli.
LI Wei.
(Guangdong Provincial Nongken Central Hospital, Zhanjiang 524002, Guangdong, P. R. China)
Abstract：Objective To understand the variation of resistance of Escherichia coli to antibiotics. Methods The strains of Escherichia coli were differentiated and their sensitivity to antibiotics were determined by using ATB automatci microorganism analysing system. The double-disk synergy tests were carried out with extended spectrum β-lactamases (ESBLS). Results From 2001 to 2005 the resistant rate of Escherichia coli to penicillin was the highest, the resistant rate to imipenem was the lowest; high bacterium-inhibition activity of Escherichia coli to cephalosporin of the third generation and aminoglycosides was observed in vitro, the prevalence of ESBLS-producing isolates of Escherichia coli were increasing year after year, being 8.5%，16.4%，19.3%，25.4%，27.8% from 2003 to 2006. Conclusion The drug rsistance of Escherichia coli has been gradually on the rise along with the wide use of antibiotics. Thus monitoring of drug resistance of Escherichia coli be strengthened for guiding reasonable use of antibiotic in clinial practice.
Key words：Escherichia coli; Drug resistance; ESBLS
大肠埃希菌是引起医院感染的重要病原菌之一，由于三代头孢菌素在临床上的广泛应用，使大肠埃希菌对抗生素的耐药性日趋严重。特别是产ESBLs的大肠埃希菌，它不仅水解青霉素和第一、二代头孢菌素，还能水解第三代头孢菌素及氨曲南等，使临床治疗更为困难。为此，我们对临床分离的大肠埃希菌进行鉴定和药敏试验的同时，检测产ESBLs菌株，并对其耐药性进行分析，为合理使用抗生素提供科学依据。
1 材料与方法
1.1 菌标来源 广东省农垦中心医院自2001～2005年从临床各类标本中分离的大肠埃希菌共941株，其中2001年182株，2002年165株，2003年171株，2004年189株，2005年234株。
1.2 仪器和试剂 所用仪器为法国梅里埃公司的ATB细菌鉴定仪，所用鉴定药敏纸片为头孢他啶，头孢他啶/克拉维酸，头孢噻肟，头孢噻肟/克拉维酸，购于北京天坛生物技术开发公司。
1.3 细菌分离鉴定及药敏试验 按叶应妩、王毓三主编《全国临床检验操作规程》作标本的细菌常规分离培养，用法国梅里埃ATB全自动微生物鉴定系统鉴定及药敏卡进行药敏试验。
1.4 ESBLs检测 对大肠埃希菌应用ATB药敏卡进行筛选，应用头孢噻肟、头孢噻肟/克拉维酸，头孢他啶、头孢他啶/克拉维酸进行确证试验。阳性者为产ESBLs菌株。
2 结果
2.1 5年中大肠埃希菌及其产ESBLs株检出情况 2001年检出大肠埃希菌182株，其中产ESBLs 15株，ESBLs阳性发生率8.5%;2002年检出165株,产ESBLs 27株，ESBLs阳性发生率16.4%;2003年检出171株，产ESBLs 33株，阳性率19.3%;2004年检出189株,产ESBLs 48株，阳性率25.4%;2005年检出234株，产ESBLs 65株，阳性率27.8%。
2.2 5年中检出大肠埃希菌非产ESBLs株与产ESBLs株耐药情况 见表1。
3 讨论
大肠埃希菌大多数为人类肠道的正常菌丛，但其中少数可侵犯人体各个器官和组织，导致革兰阴性菌败血症和内毒素休克，尿道和创伤感染，并使免疫力高度降低的住院病人并发肺炎和新生儿脑膜炎。近年来人们认识到该菌引起医院感染、机会感染的重要性日益提高。从5年中大肠埃希菌检出率没有明显变化，但ESBLs的发生率呈逐年上升的趋势，ESBLs是国际上研究最活跃的酶类之一，其主要特点是质粒介导，多由普通的β-内酰胺酶基因（TEM-1，TEM-2，SHV-1）突变而来，主要由肠杆菌科细菌产生［1］,能被β-内酰胺酶抑制剂抑制，能水解甲氧亚胺基β—内酰胺类抗生素如头孢他啶、头孢噻肟及氨曲南等单胺类抗生素的β-内酰胺酶，可以通过转化、转导、接合、转座子易位等方式将耐药质粒在微生物间相互传播，从而造成严重的医院交叉感染。不合理使用抗生素是引发ESBLs菌株感染的重要原因之一。特别是第三代头孢菌素的滥用，细菌在药物的选择压力下，能筛选出发生突变的产ESBLs的菌株。此外，免疫抑制剂的使用，侵袭性操作应用也是ESBLs菌株感染原因。由于ESBLs菌株是呈多重耐药，造成治疗十分困难，因此,加强ESBLs菌株的监控和管理对指导临床用药具有十分重要的意义。
表1 各年度大肠埃希菌非产酶株与产酶株耐药率（略）
从表1可见，产ESBLs菌不仅对第三代头孢菌素和氨曲南耐药，而且对氨基糖菌类，喹诺酮类存在交叉耐药，与毛向群［1］检测结果基本一致，产ESBLs菌对环丙沙星耐药率＞75.1%，并有上升趋势；对阿米卡星耐药率＞65.4%，5年内耐药率变化不大;含酶抑制剂对该菌抗菌活性较高，对阿莫西林/克拉维酸耐药率均＜58.6%，对哌拉西林/他唑巴坦耐药率＜23.8%。阿莫西林/克拉维酸抗菌活性低于哌拉西林/他唑巴坦，这可能与复合剂中所含基础抗菌药物抗菌活性低以及酶抑制剂的种类及其含量有关。5年中均未检出耐亚胺培南耐药株。结果显示ESBLs菌对亚胺培南的敏感率达100%，是治疗产ESBLs菌引起感染的最佳药物，与报道［2］一致。因此，治疗产ESBLs菌引起的感染可用碳青酶烯类和含酶抑制剂抗菌素。
从分析结果可见，产ESBLs菌株分离率比非产ESBLs菌株分离率低，但产ESBLs菌株分离率呈逐年上升趋势，这与三代头孢菌素的广泛应用有关，国外资料大肠埃希菌产ESBLs率为10.2%～20%［4,5］，国内部分地区大肠埃希菌产ESBLs率为30.21%［6］。由此可见产ESBLs大肠埃希菌引起感染日趋严重，临床治疗已面临严峻挑战，应引起我们高度重视，必须采取相应对策，加强对该菌耐药性监测与控制，掌握其耐药性动向，合理使用抗生素，减少或延迟细菌耐药性的产生。
【参考文献】
［1］ 毛向群，洪秀华，项明洁，等. 大肠埃希氏菌和克雷伯菌属超广谱β-内酰胺酶的检测［J］. 中华医院感染学杂志，2001，11（3）:92 .
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［4］ Hadziyannis E, Tuohy M, Thomas L, at el. Screening and confirmatory testing for extended spectrum beta-lactamases (ESBLS) in Escherichia coli and Klebsiella oxytoca clinical isolates［J］. Diagn Microbiol Infect Dis, 2000, 36:113～117.
［5］ Ho PL, Tsang DN, Que TL, et al. Comparison of screening methods for detection of extended-spectrum beta-lactamases and their prevalence among Escherichia coli and Klebsiella species in Hong Kong［J］. APMIPS, 2000, 108:237～240 .
［6］ 林庆安，罗大侗，修清玉，等. 上海部分地区肠杆菌科细菌产超广普β-内酰胺酶情况及药敏监测［J］. 中华结核和呼吸杂志，2000，23:420～422.
作者单位：广东省农垦中心医院,广东 湛江 524002.