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【摘要】 目的 对0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）的消毒洗手液进行了哺乳动物的亚急性毒性试验，以研究消毒剂多次接触对实验动物的蓄积毒性作用及其靶器官，并为亚慢性、慢性毒性或致癌试验的剂量设计提供依据。 方法 试验依据卫生部的《消毒技术规范》（第2002版）消毒产品毒理实验规范［1］，选用SPF级的SD大鼠，进行大鼠急性经口毒性LD50试验、亚急性毒性试验。 结果 大鼠急性经口毒性试验LD50>5 000mg/kg·BW，属实际无毒级；亚急性毒性试验，一般生理体征无异常，对大鼠生长曲线无明显影响，血常规指标无异常，生化指标无异常，脏体系数无异常，脏器组织病理学检查未发现异常。 结论 0.3%盐酸聚六亚甲基胍消毒洗手液为实际无毒级，亚急性试验各指标无异常。
【关键词】 盐酸聚六亚甲基胍； 毒性研究； LD50
Observation on the subacute toxicity of polyhexamethylene biguanide hydrochloride.
HU Yong-cheng, TAN Jian-bin, LI Zhi, et al.
（Guangdong Provincial Center for Disease Control and Prevention, Guangzhou 510300, Guangdong, P. R. China）
盐酸聚六亚甲基胍（Poly hexamethylene biguanide hydrochloride PHMB）是新的胍类消毒剂。其具有广谱、杀菌明显，低毒，环保等优点，但目前针对盐酸聚六亚甲基胍衍生物的研究文献多为急性毒性研究，对其亚急性毒性研究较少。我们对0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）配成的消毒洗手液进行亚急性毒性试验，以了解其亚急性毒性。
1 材料与方法
1.1 受试物 0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）消毒洗手液，某公司提供。
1.1.1 实验动物 SPF级SD大鼠，由南方医科大学实验动物中心提供急性经口毒性试验试鼠体重在180～220g；亚急性毒性试验试鼠6～8wk龄均。颗粒饲料由南方医科大学实验动物中心提供
1.1.2 动物实验室条件 SPF级动物房，室温（22±2）℃；湿度50%～75%。
1.2 方法
1.2.1 急性经口毒性试验 按消毒技术规范操作，采用一次限量法，设5 500mg/kg·BW剂量，20只试验鼠，雌雄各半。按1.0ml/100g体重灌胃，一次给予受试物。
1.2.2 亚急性毒性试验 按消毒技术规范操作，依据大鼠急性经口LD50分别设100、300、1 000mg/kg·BW剂量组和阴性对照组共四个试验组，随机分组，每组20只，雌雄各半,分笼饲养。样品组给予各剂量受试物，阴性对照组给予纯净水，连续灌胃30d。
1.2.2.1 观察指标试验动物一般生理体征、外观、行为、大小便、皮毛等。
1.2.2.2 第30d将动物断头处死，采血用于血液常规和生化指标测定，进行系统解剖，肉眼观察动物的肝脏、肾脏、胃及小肠等器官有无损伤和异常。称量上述器官重量，计算脏/体比系数。
1.2.2.3 血液常规和生化指标项目包括血红蛋白、红细胞计数、白细胞数及分类计数、谷丙转氨酶、谷草转氨酶、血糖、总蛋白、白蛋白、总胆固醇、总胆红素、碱性磷酸酶、肌酐和尿素氮等。上述指标用日立7060全自动生化仪和雅培3700全自动血球计数仪检测，试剂由仪器生产商供应。
1.2.2.4 组织病理学检查 选取动物的肝脏、肾脏、胃及小肠等器官，经固定、切片、镜检。
1.2.2.5 统计处理 数据用 SPSS11.0软件包进行方差分析。
2 结果
2.1 大鼠急性经口毒性试验：连续观察14d，未见到中毒表现，其对雌雄SD大鼠的经口LD50>5 000mg/kg·BW。
2.2 亚急性毒性试验
2.2.1 大鼠一般生理体征、行为、大小便、皮毛等均无异常。
2.2.2 体重的变化 从表1可见本受试物对大鼠生长无明显影响。
2.2.3 血常规指标 从表2可见雌性中剂量组白细胞数与阴性对照组比较，差异有统计学意义（P<0.05）；雌性高剂量组白细胞数与阴性对照组比较差异有统计意义（P<0.01），但白细胞数在本实验室历史对照值范围内（白细胞数: 3.82-15.95 109/L）。其余各剂量组血常规指标与阴性对照组之间差异无统计意义（P>0.05）。显示该受试物血常规指标无影响。
2.2.4 血生化指标 从表3可见，雄性低剂量组肌酐与阴性对照组比较差异有统计意义（P<0.05）,但数值在本实验室历史对照值范围内（肌酐: 33.97～56.53 U/L），无生理学意义。其余指标各剂量组与阴性对照组之间差异无统计意义（P>0.05）。显示该受试物生化指标无影响。
2.2.5 脏器重与脏体系数 该受试物脏器重与脏体系数指标无异常。
表1 0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）消毒洗手液亚急性毒性试验大鼠体重变化情况 （略）
表2 0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）消毒洗手液亚急性毒性试验终期血常规指标（略）
注：与阴性对照组比较,表示P<0.05，表示P<0.01。
2.5 病理学检查
2.5.1 大体检查 对肝脏、肾脏、胃及小肠等器官的大体检查，未见异常情况。
2.5.2 组织病理学检查 对肝脏、肾脏、胃及小肠进行组织病理学检查，未见与受试物有关的特殊病理改变。
3 讨论
国内外已有对盐酸聚六亚甲基胍衍生物的毒性研究报道，俄罗斯检疫部门酸盐酸聚六亚甲基胍实验结果鼠类LD50为25 000mg/kg［2］；广州工业微生物检测研究中心的实验结果小鼠LD50>20 900mg/kg。
表3 0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）消毒洗手液亚急性毒性试验终期血清生化指标（略）
注：与阴性对照组比较 *表示P<0.05
本次研究的0.3%盐酸聚六亚甲基胍（PHMB）按《消毒技术规范》（第2002版） 评价, 大鼠急性经口毒性试验LD50>5 000mg/kg BW，属实际无毒级［3］；亚急性毒性试验结果，大鼠一般生理体征、行为无异常。血常规、生化指标观察指标均无异常；对肝脏、肾脏、胃及小肠进行组织病理学检查均无异常。本次结果0.3%盐酸聚六亚甲基胍的LD50和文献的较接近, 并进一步做了亚急性毒性研究,显示其有一定安全性，有较好的开发前景。
【参考文献】
［1］ 中华人民共和国卫生部.消毒技术规范［S］.2002，11:135.
［2］ 薛广波. 现代消毒学［M］.北京：北京人民军医出版社， 2002，7:464.
［3］ 黄晓波,郑立国.几种消毒剂的毒性研究［J］.中国卫生检验杂志，2002，03.
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