β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌中表达及临床意义

【摘要】  目的 探讨β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌中的表达及临床意义。 方法 应用免疫组化SP法检测87例子宫内膜癌和30例正常子宫内膜中β-catenin和cyclin D1的表达。 结果 β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌中的阳性表达率分别为37.9%(33/87)和43.7%(38/87)，明显高于正常子宫内膜组(P<0.01)。子宫内膜癌中，β-catenin的表达与病理分级、FIGO分期、肌层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05)，cyclin D1的表达与FIGO分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)。β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌中的表达呈正相关(r=0.458, P<0.01)。 结论 β-catenin和cyclin D1可能在子宫内膜癌发生发展中起重要作用，可作为评估预后的指标。

【关键词】  子宫内膜癌 β-catenin cyclin D1 免疫组织化学

　　Expression of β-catenin and cyclin D1 in endometrial carcinoma patients and its clinical significance.

　　WU Shi-min, GUO Jun-li, ZHOU Sheng, et al.

　　(Institute of Pathology, Tongji Hospital, Tongji Medical College, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan 430030, Hubei，P.R.China; Affiliated Hospital of Hainan Medical College, Haikou 570102, Hainan, P. R. China)
   
　　Abstract：Objective  To investigate the expression of β-catenin and cyclin D1 in endometrial carcinoma patients and its clinical significance.  Methods  SP immunohistochemical method was used to detect the expression of β-catenin and cyclin D1 in 87 cases of endometrial carcinoma and 30 cases of normal endometrium.  Results  The positive rates of β-catenin and cyclin D1 in endometrial carcinoma were 37.9% (33/87) and 43.7% (38/87) respectively, which were significantly higher than those in normal endometrium (P<0.01). In endometrial carcinoma, the expression of β-catenin was significantly correlated with the pathological grade, FIGO stage, myometrial invasion and the lymph node metastasis (P<0.05), while that of cyclin D1 was significantly correlated with FIGO stage and the lymph node metastasis (P<0.05). There was a positive correlation between β-catenin and cyclin D1 in endometrial carcinoma (r=0.458, P<0.01).  Conclusion  β-catenin and cyclin D1 may play important roles in the development and progression of endometrial carcinoma and it can be used as prognostic indicators.
   
　　Key words：Endometrial carcinoma; β-catenin; Cyclin D1; Immunohistochemistry

　　子宫内膜癌是妇科最重要的恶性肿瘤之一，近年来发病率有逐渐上升的趋势。β-catenin是一种多功能胞内蛋白，具有细胞间粘附连接及信号转导的双重功能，并参与Wnt信号转导通路激活cyclin D1等癌基因，与肿瘤的发生、发展关系密切［1］。本研究采用免疫组化SP法，检测子宫内膜癌组织中β-catenin及cyclin D1的表达及其与子宫内膜癌病理分级、FIGO分期、肌层浸润和淋巴结转移的关系，旨在探讨β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌的发生、发展及转移等过程中所起的作用。

　　1  材料与方法

　　1.1  材料  收集2004年5月～2007年4月在华中科技大学同济医学院附属同济医院手术切除的子宫内膜癌标本共87例，术前均无放疗、化疗史，年龄35～76岁，平均年龄54.8岁。取同期同年龄组正常子宫内膜组织30例作为对照组。标本采用4%中性福尔马林固定，常规脱水、石蜡包埋切片。

　　1.2  免疫组化染色方法  采用免疫组化SP法，肿瘤组织切片用EDTA修复液进行微波抗原修复，鼠抗人β-catenin单克隆抗体和鼠抗人cyclin D1单克隆抗体(均为迈新公司产品)分别标记，DAB染色，苏木素复染。

　　1.3  免疫组化结果判断标准  每张切片随机选择10个高倍视野，用高倍视野计数100个肿瘤细胞，β-catenin阳性表达定位于胞质/胞核，cyclin D1阳性表达定位于胞核。综合染色强度和阳性肿瘤细胞的百分比进行分级。将染色强度分为：无着色为0分，浅黄色为1分，黄色为2分，棕黄色为3分。将阳性肿瘤细胞的百分比分为：＜10%为0分，10%～50%为1分，51%～75%为2分，＞75%为3分。两项相加后分阴性(-)和阳性(+)：0～1分为(-)，2分以上为(+)。

　　1.4  统计学分析  采用SPSS 11.0统计学软件进行χ2检验或Fisher’s精确概率法检验及Spearman等级相关分析。

　　2  结果

　　2.1  β-catenin表达与子宫内膜癌临床病理学特征的关系  β-catenin在子宫内膜癌和正常子宫内膜中的阳性表达率分别为37.9% (33/87)和10% (3/30)，子宫内膜癌组明显高于正常子宫内膜组(P<0.01)。子宫内膜癌中，β-catenin的表达与病理分级、FIGO分期、肌层浸润和淋巴结转移密切相关(P<0.05)，见表1。

　　2.2  cyclin D1表达与子宫内膜癌临床病理学特征的关系  cyclin D1在子宫内膜癌和正常子宫内膜中的阳性表达率分别为43.7% (38/87)和13.3% (4/30)，子宫内膜癌组明显高于正常子宫内膜组(P<0.01)。子宫内膜癌中，cyclin D1的表达与病理分级和肌层浸润无明显相关性(P>0.05)，但与FIGO分期和淋巴结转移密切相关(P<0.05)，见表1。

　　表1  子宫内膜癌中β-catenin和cyclin D1的阳性表达与临床病理学特征的关系（略）

　　Table 1  The relationship of positive expression and clinical pathological characteristics between β-catenin and cyclin D1 in endometrial carcinoma 

　　2.3  子宫内膜癌中β-catenin表达与cyclin D1表达的关系  β-catenin和cyclin D1在子宫内膜癌中的表达有极显著意义的正相关(r=0.458，P<0.01)。

　　3  讨论
   
　　β-catenin是一条由多肽链组成的胞质内蛋白，既是一种重要的细胞粘附分子，也是Wnt/Wingless(Wg)信号通路中一个重要组成部分，在正常情况下β-catenin与E-cadherin的胞内区形成复合体定位于细胞膜，维持上皮细胞的极性和完整性。在多种因素作用下Wnt信号异常激活或β-catenin发生突变，肿瘤细胞中β-catenin的磷酸化和降解不能正常进行，游离的非磷酸化β-catenin在胞浆内大量聚积后进入核内，在核内异常蓄积的β-catenin与Tcf/Lef (T cell transcriptional factor/Lymphoid enhancer factor)形成复合物，通过Tcf/Lef核转录系统激活相应靶基因(如c-myc、cyclin D1等)，引起细胞增殖和分化失控，最终导致肿瘤的发生和发展［2～3］。β-catenin结构和功能的异常，不仅使肿瘤细胞间粘附作用减弱，肿瘤细胞迁移能力增加，还刺激肿瘤细胞的增殖，有利于肿瘤的侵袭和转移，这些都在肿瘤的恶化进展中起重要作用［4］。本研究结果显示，β-catenin在子宫内膜癌中的表达明显高于其在正常子宫内膜中的表达，β-catenin在子宫内膜癌中的表达与病理分级、FIGO分期、肌层浸润和淋巴结转移密切相关，与文献报道［5］相似，提示β-catenin可能在子宫内膜癌的发生、发展、侵袭及转移过程中起着重要作用。
   
　　cyclin D1参与细胞周期调控，是调节细胞进入细胞周期中增殖的主要因子，在细胞周期G1～S期进展中发挥重要作用。阻滞cyclin D1的表达可以阻断细胞从G1期进入S期，而cyclin D1的过度表达则使细胞G1期缩短，细胞增殖加速［6］。本研究发现，cyclin D1在子宫内膜癌中的表达明显高于其在正常子宫内膜中的表达，cyclin D1在子宫内膜癌中的表达与病理分级和肌层浸润无明显相关，但与FIGO分期和淋巴结转移密切相关，提示cyclin D1作为细胞周期正性调控因子，其过度表达与细胞增殖失控有关，可能在子宫内膜癌的发生、发展及转移过程中具有重要作用。但文献报道仅15%～20% cyclin D1过度表达是由于cyclin D1基因扩增所致［7］，因此肿瘤组织内可能还存在其他的机制促使cyclin D1过度表达。有研究发现cyclin D1是核内异常蓄积的β-catenin通过Tcf/Lef核转录系统直接激活的靶基因之一［3］。Gotoh等［8］报道在鼠肝肿瘤中β-catenin的细胞质、细胞核表达与cyclin D1的过度表达相关和Wong等［9］在53例散发结直肠癌中发现cyclin D1的过度表达总是与β-catenin的核表达伴行，说明β-catenin的表达失调也是导致肿瘤细胞中cyclin D1过度表达的因素之一。本研究结果表明，在子宫内膜癌中β-catenin和cyclin D1的表达呈极显著意义的正相关，并且β-catenin和cyclin D1的表达都与FIGO分期和淋巴结转移密切相关，提示子宫内膜癌的发生、发展在一定程度上是由β-catenin的异常表达导致靶基因cyclin D1的过度表达所致，两者起一定的协同作用，故β-catenin和cyclin D1的联合检测可作为预测子宫内膜癌生物学行为及预后的指标。

【参考文献】
  　　［1］ Behrens J,Lustig B. The Wnt connection to tumorigenesis［J］. Int J Dev Biol,2004 ,48(5-6) :477～487.

　　［2］ Hugh TJ,Dillon SA ,O’Doud G,et al. Bata-Catenin expression in primary and metastatic colorectal carcinoma［J］. Int J Cancer,1999,82(4):504～511.

　　［3］ Shtutman M,Zhurinsky J,Simcha I,et al. The cyclin D1 gene is a target of the beta-catenin/LEF-1 pathway［J］. Proc Natl Acad Sci USA,1999,96(10):5522～5527.

　　［4］ Jawhari AU,Farthing MJ,Pignatelli M. The E-cadherin/epidermal growth factor receptor interaction: a hypothesis of reciprocal and reversible control of intercellular adhesion and cell proliferation［J］. J Pathol,1999,187(2):155～157.

　　［5］ Schlosshauer PW,Ellenson LH,Soslow RA. Beta-catenin and E-cadherin expression patterns in high-grade endometrial carcinoma are associated with histological subtype［J］. Mod Pathol,2002,15(10):1032～1037.

　　［6］ Wang C,Li Z,Fu M,et al. Signal transduction mediated by cyclin D1 : from mitogens to cell proliferation : a molecular target with therapeutic potential［J］. Cancer Treat Res,2004,119:217～237.

　　［7］ Fu M,Wang C,Li Z,et al. Cyclin D1: Normal and abnormal functions［J］. Endocrinology,2004,145(12) :5439～5447.

　　［8］ Gotoh J,Obata M,Yoshie M,et al. Cyclin D1 over-expression correlates with beta-catenin activation, but not with H-ras mutations, and phosphorylation of Akt , GSK3 beta and ERK1/2 in mouse hepatic carcinogenesis［J］. Carcinogenesis,2003,24(3) :435～442.

　　［9］ Wong NA,Morris RG,McCondochie A,et al. Cyclin D1 overexpression in colorectal carcinoma in vivo is dependent on beta-catenin protein dysregulation , but not k-ras mutation［J］. J Pathol,2002,197(1) :128～135.

作者单位：华中科技大学同济医学院附属同济医院病理研究所, 湖北 武汉 430030; 海南医学院附属医院病理科, 海南 海口 570102.