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【摘要】 目的 比较不同染色方法对纤维素的染色效果。 方法 选取我科2007年1~12月份诊断有纤维素性渗出的病例69例及血管栓塞病例10例，组织经固定、脱水、石蜡包埋、切片，分别采用改良Lendrum的MSB法、Mallory’s磷钨酸苏木素法（PTAH）和改良PTAH法3种染色方法进行对比染色。 结果 3种染色方法对纤维素均有表达，改良PTAH法显示新鲜纤维素呈细丝网状，部分陈旧性纤维素呈团块状，定位清晰，对比明显；改良Lendrum的MSB法染色组织镜下色彩斑斓，步骤繁多；PTAH染液等待成熟和染色时间都太长。 结论 改良PTAH法显示纤维素效果明显优于其它两种染色，且染色时间短，操作简便，易掌握，结果可靠，值得推广。
【关键词】 纤维素；染色方法；比较
纤维素染色在病理学研究和临床病理诊断中具有非常重要的意义。主要应用于：以纤维素性炎症为主的疾病（如大叶性肺炎、白喉、细菌性痢疾及结核性胸膜炎等）的诊断；证明弥散性血管内凝血（DIC）的存在，观察HE染色所不易发现的微小血栓；在小血管及组织内发现疏松的纤维细丝可帮助诊断风湿性肉芽组织、恶性高血压以及一些胶原性疾病等；在全身性结缔组织疾病的组织切片中可出现纤维蛋白样变性；用于观察肾小球包氏囊内纤维素沉着的量，量的多少和预后相关；还可鉴别坏死组织、玻璃样变等病变；特别在尸检工作中应用较普遍。纤维素染色方法有很多种，我们选择了以下常用的3种染色方法作比较。
1 材料与方法
1.1 材料 选择2007年1~12月份我科诊断肺炎症性病变69例；血管栓塞病例10例。取材组织经10％中性福尔马林固定，常规脱水，石蜡包埋，切片厚3μm。
1.2 方法 每个病例都连续切片3张，分别用：改良Lendrum的MSB法、PTAH和改良PTAH法等3种染色方法进行染色。
1.2.1 改良Lendrum的MSB法[1]用10％中性福尔马林固定组织，其他染液配制及操作步骤按照常规操作进行。
1.2.2 PTAH法[2] 染液配制及操作步骤按照常规操作进行。
1.2.3 改良PTAH法 ⑴改良磷钨酸苏木素染液的配制：苏木素0.1g，磷钨酸2g，蒸馏水100ml，30％双氧水液适量备用。将苏木素溶于20ml蒸馏水中加热溶解，再将磷钨酸溶于80ml蒸馏水中，待磷钨酸苏木素液冷却后将二者混合，再加入1滴（约25μl）30％双氧水液，此时混合液颜色逐渐由浅变深，呈深棕红色，约3h后即可使用。⑵改良PTAH的染色步骤：切片常规脱蜡至水，蒸馏水洗，切片滴加1~2滴30％双氧水液氧化1~2min，充分水洗。入改良PTAH液1h，95%乙醇快速分化脱水，无水乙醇脱水，TO生物制剂透明，中性树胶封片[3，4]。
2 结果
纤维素不同染色方法及对照染色结果，见表1。
表1 纤维素不同染色方法及对照染色结果比较（略）
注: 1、“-” 表示组织成分不显色；“+”表示纤维显示的多少。2、纤维素分布情况：分布于肺泡腔、变性坏死区；直接显示血栓；早期微量纤维素渗出PTAH染色显色效果较好。
3 讨论
纤维素又称纤维蛋白，它是由存在于血液内的纤维蛋白原分子聚合形成的特殊蛋白质。纤维素样变是指结缔组织中胶原纤维或血管壁的一种变性，常见于胶原性疾病及恶性高血压和胃溃疡底部的动脉壁等。不同疾病出现纤维素渗出或纤维素样物质，都具有嗜酸性的共同特性，通常呈HE红染的细丝，并互相连接成网状；有时则形成较粗大的纤维素网。陈旧性纤维素可相互融合、凝集成无定形的团块。实验中改良Lendrum的MSB法含酸性品红，传统PTAH和改良PTAH染色法是利用磷钨酸苏木素的奇特染色性质——单一染液能染出两种主要的颜色（紫蓝色和棕红色），从而很好的辨别出纤维素或纤维素样物的存在，进而对相关疾病作出准确的诊断。
我们的实验显示：①改良Lendrum的MSB法：实验用10％中性福尔马林固定组织，基本上可以达到组织着色鲜艳的效果。但此种染色法存在染色步骤繁多，不易操作，结果色彩斑斓，对比性较差等缺点（图1）。②传统PTAH法染液等待自然成熟的时间长，如果加高锰酸钾促其成熟却导致染液不稳定，且染片时间太长，还需主要防止过染现象，影响报告的发出时间。③改良PTAH染色法染色原理是双氧水使苏木精分子脱掉2个氢原子变成苏木红，苏木红通过与钨结合生成蓝色色淀，这种色淀能与横纹肌组织成分牢固地结合使横纹肌显示蓝色，其余组织被磷钨酸染成玫瑰红色。本法加入30％双氧水1滴，可加快其成熟，约3h即可使用。与传统方法相比，结果可靠，纤维素、横纹肌显示清晰，尤其可清晰显示微小血管内纤维素细丝，操作简便快捷，节约试剂。本法利用双氧水具有氧化和漂白的双重作用，节约了时间及试剂，且背景干净。染液置冰箱内可反复使用，保存期可达一年之久。染色过程中双氧水液主要起氧化作用，所以30%浓度一定要足够，若浓度达不到要求，会导致染色失败。染色后不要用水洗，以免脱去红色部分，用95%乙醇快速进行分化（图2）。此染色法显示纤维素，定位清晰，着色鲜艳；对于组织中一些微量、细小的纤维素也能很好地显示出来。
经过比较和实践，我们认为改良PTAH法显示纤维素效果明显优于其它两种染色，且染色时间短，操作简便，易掌握，结果可靠，值得推广。
图1 改良Lendrum的MSB法显示肺泡腔内纤维素呈鲜红色，不规则团块状，血管壁胶原纤维蓝色，细胞核蓝褐色，红细胞黄色，色彩斑斓。中倍放大。（略）
图2 改良PTAH染色显示肺泡腔内纤维素呈紫蓝色，不规则团块状，血管壁胶原纤维棕红色，细胞核蓝色，定位清晰。中倍放大。（略）
【参考文献】
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