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【关键词】 艾滋病病毒
艾滋病病毒（HIV） 抗体的检测是 HIV 感染诊断的一项重要指标，也是《全国艾滋病检测技术规范》中首推的筛查实验。标准的 HIV 抗体检测是血清的抗体检测。现就 HIV 抗体检测在筛查实验中应注意的几个问题讨论如下：
1 HIV 抗体检测方法的选择
目前，国内外用于 HIV 抗体筛查的方法很多，根据检测原理不同分为酶联免疫吸附法、凝集法和免疫层析法。 在实际工作中常用的是有酶联免疫吸附试验（ ELISA ）、明胶凝集试验和各种快速诊断试剂。自 1985 年第一代 ELISA 试剂问世以来，随着医学技术的飞速发展， ELISA 已发展到第三代双抗原夹心法、第四代抗原抗体联合检测法。 HIV 抗体的检测多采用敏感性、特异性都良好的第三代试剂。
随着 HIV 隐性感染者增加，各种快速诊断试剂在对无症状 HIV 感染者及大面积健康体检起重要作用。快速法（RT）以其快捷、简便被广泛应用。我院用ELISA方法进行HIV抗体检测1 777例，在筛查过程中，第一次呈阳性反应8例，5例两次复检均呈阴性反应，有3例两次复检呈阳性反应，送上级实验室确证3例阳性。用快速法检测HIV抗体1 726例，第一次检测呈阳性反应7例，第二次快速法复检仍呈阳性反应7例，用ELISA法第三次复检4例呈阴性反应，3例呈阳性反应，送上级实验室确证3例阳性、4例阴性。见表1。
表1 两种检测方法阳性反应比较（略）
HIV 的检测，不同于其他病原微生物的检测，要求十分严格，任何错误的诊断都会对被检者产生十分重要的影响。作为临床诊断为目的的 HIV 抗体检测，快速法只能作为紧急状态下的预检。为确保实验结果的准确性，还需以 ELISA 的试验重复检测。
2 HIV 抗体检测流程与报告方式
HIV 抗体的检测一定要遵循检测技术规范所制定的检测流程。 对用 ELISA 试剂或快速诊断试剂进行的筛查实验如呈阴性反应，即报告 HIV 抗体阴性。对呈阳性反应的标本，筛查实验室应用原有试剂和另一种不同原理或不同厂家的试剂进行重复检测，如果两种试剂复测均呈阴性反应，则报告 HIV 抗体阴性。如均呈阳性反应，或一阴一阳，筛查实验室一定不能发出阳性报告，只能发出 HIV 抗体待复检。 HIV 抗体筛查呈阳性的标本由于存在假阳性的可能，必须按检测流程将待复检的标本以三级包装送往 HIV 确证实验室，通过确证实验后，由确证实验室签发报告。
目前， HIV 抗体确证实验阳性是我国 HIV 感染诊断标准中不可缺少的，不能仅凭临床表现判定是否 HIV 感染或艾滋病。
3 检测过程的注意事项
HIV 抗体检测必须严格按照国家制定的《全国艾滋病检测工作管理办法》和《全国艾滋病检测技术规范》进行。无论用哪一种方法做 HIV 抗体的检测均要严格遵守实验室标准操作程序（ SOP ），严格按照试剂盒的说明书操作。
3.1 实验开始前将试剂和样品放置在室温（ 1 8 ～2 3 ℃ ） 30 分钟后试验。
3.2 样品加样器一定要经过校正后使用，以保证加样的的准确。实验中，加样品时，要将样品注入样品孔底部不能留在侧壁。
3.3 洗涤工作是整个实验成功与否的关键。洗板机的状态良好，负压符合规定的要求，洗板时间要准确。洗涤完成以后，样品孔的上方与底部不应残存液体，并禁止在滤纸上拍干。
3.4 整个实验过程温度、孵育时间要准确控制。最后，根据阳性对照、阴性对照、质控、空白对照的吸光度（ OD ）值，判定实验的有效性，判定试验结果。 阴性对照（ NC ）必须＜0.25方可使用，排除 NC ≥ 0.25 值，计算 NC 平均值 NC 界限范围： 0.6 倍 NC 均值＜ NC ＜ 1.4 倍 NC 均值。两个以上的 NC 可用。阳性对照（ PC ）：-NC ≥0.4。根据具体的试剂说明，计算临界值（ Cut off ）值 , 根据 Cut off 值判定结果，＜ Cut off 值为阴性反应，≥ Cut off 值为阳性反应。
每种试剂的 Cut off 值计算不同，应特别注意。
4 HIV 抗体检测试剂
必须是 HIV-1/2 混合型，经国家食品药品监督管理局（ SFDA ）注册批准、批检合格、在有效期内的试剂。推荐使用临床质量评估敏感性好、特异性高的试剂。我院艾筛室使用徐州市疾控中心艾滋病确诊实验室推荐的、北京产华大吉比爱，珠海产丽珠，上海产科华等。其检测结果都很好。建议长期和稳定地使用一种质量好的试剂盒。
5 HIV 抗体检测中的质量控制
5.1 每次实验中必须含有内部质控及外部质控 内部质控血清是指试剂盒内提供的阳性和阴性对照血清。内部对照是质控的基础，每次检测必须使用而且只能在同批号的试剂盒中使用。外部对照质控血清，是为了监控检测的重复性和稳定性以及试剂盒批间或孔间差异，由实验室设置的一套对照血清，包括强阳性、弱阳性和阴性对照，也可以只设置一个弱阳性对照，以该试剂盒临界值（Cut off）的2～3倍为宜。
5.2 建立质控系统 HIV 抗体检测实验的每个细节，包括仪器设备的维护校准，温度的记录，都要严格控制，并将每次实验的质控参数纳入质控系统，确保每次实验的可靠性。
5.3 参加上级实验室质控考评 提高本实验室 HIV 抗体检测的准确性。
6 对筛查阴性和阳性者，均要做好检测前后的咨询工作
7 做好个人防护、各种材料的登记留档及上报工作
由于社会上人们对艾滋病的认识普遍不够全面，对艾滋病存在较大的恐惧心理，任何假阳性或假阴性的结果都会给被检者造成很大的心理压力。所以， HIV 抗体的检测要绝对准确、可靠。
作者单位：江苏省徐州市铜山县第三人民医院，江苏 徐州 221124