注射用拉氧头孢钠的细菌内毒素检查

【摘要】  目的：建立注射用拉氧头孢钠的细菌内毒素检查法。方法：按照《中国药典》2005年版（二部）附录细菌内毒素检查法和细菌内毒素检查法应用指导原则。结果：注射用拉氧头孢钠在最大有效稀释浓度下对鲎试剂反应无干扰作用。 结论：这是一种简单、快速、可行的方法 。

【关键词】  注射；拉氧头孢钠；细菌内毒素；检查；干扰试验

 注射用拉氧头孢钠是新型半合成β-内酰胺类的广谱抗生素。目前尚未建立细菌内毒素检查法。为了扩大细菌内毒素检查法的品种，我们按照《中国药典》2005年版（二部）附录细菌内毒素检查法的规定［1］,选用3个批号的注射用拉氧头孢钠和2个生产厂家的鲎试剂,对其进行了细菌内毒素检查法的方法学研究。

    1  材料与方法

    1.1  实验材料  鲎试剂为湛江博康海洋生物有限公司,批号080105,灵敏度0.5 EU/ml，厦门鲎试剂实验厂有限公司,批号071022,灵敏度0.5 EU/ml，细菌内毒素检查工作标准品为中国药品生物制品检定所, 批号080112,注射用拉氧头孢钠为海南海灵化学制药有限公司，批号080211，080225，080314，规格0.25 g/支。

    1.2  方法

    1.2.1  鲎试剂灵敏度复核  按照细菌内毒素检查法,用细菌内毒素检查，用水将细菌内毒素工作标准品溶解稀释制定 2.0 λ、1.0 λ、0.5 λ、0.25 λ浓度的细菌内毒素标准溶液,进行灵敏度复核,结果符合规定(见表1)。表1  鲎试剂灵敏度复核试验结果

    1.2.2  细菌内毒素限值(L)的确定  公式L=K/M。K为按规定的给药途径,以EU/(kg·h ）表示,静脉用药为5 EU/ (kg·h ），M为人用每kg体重每小时可接受的最大内毒素剂量（人均体重按60公斤计）,该供试品成人剂量一般每日静脉注射量为2 g,分2次给药,每次至少给药60分钟,即M=1 000 mg/（60 kg·h）=16.67 mg/(kg·h),L=K/M。 L=5 EU/(kg·h)/16.67 mg/(kg·h)=0.3 EU/mg。

    1.2.3  供试品干扰试验最大有效稀释倍数(MVD)的确定  MVD=C·L/λ=1 000×0.3/λ,选用鲎试剂灵敏度为0.5 EU/ml，MVD为600倍,计算供试品的测试浓度,C=1.67 mg/ml。

    1.2.4  供试品干扰试验  取3个批号供试品,用检查用水溶解制成测试浓度为1.67 mg/ml的供试液,将细菌内毒素工作标准品制成含细菌内毒素1.0、0.5、0.25、0.125、0.0625 EU/ml浓度,对不同厂家的鲎试剂进行干扰试验(见表2)。表2  注射用拉氧头孢钠细菌内毒素干扰试验结果

    Es，以细菌内毒素检查用水制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值；Et，以供试品溶液或其稀释液制成的内毒素标准溶液的反应终点浓度的几何平均值。

    1.2.5  细菌内毒素检查  将3个批号注射用拉氧头孢钠 ，以检查用水分别将其溶解制成 1.67 mg/ml的供试液，分别用两个厂家的鲎试剂进行细菌内毒素检查，每批供试品做2管,另做1管阴性对照,1管阳性对照,1管供试品阳性对照,(见表3)。表3  注射用拉氧头孢钠试验结果

    2  结果

    选用灵敏度为0.5 EU/ml鲎试剂对注射用拉氧头孢钠进行细菌内毒素干扰试验:结果显示Et值均在0.5 λ～2 λ范围内,并且Es值在0.5 Et～2 Et之间,故可以判定注射用拉氧头孢钠对细菌内毒素检查试验无干扰。3批供试品每1 mg含细菌内毒素的量均小于0.3 EU。

    3  结论

    鲎试剂用于细菌内毒素的检测，具有操作简单、灵敏度高、重现性好、实用性强等优点,是一种简单、快速、可行的方法，用灵敏度为0.5 EU/ml鲎试剂对注射用拉氧头孢钠进行细菌内毒素检查是可行的。

【参考文献】
  ［1］ 中华人民共和国药典委员会.中国药典2005年版［M］.（二部）北京：化学工业出版社，2005：附录.

作者单位：宁夏银川市第一人民医院，宁夏 银川 750001