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【摘要】 目的 探讨乙型肝炎患者血清e系统表现模式及其与乙肝病毒复制的关系。方法 对1609例乙型肝炎患者血清e系统表现模式和HBV-DNA定量检测结果进行比较。结果 1609例乙型肝炎患者血清e系统表现模式共13种之多，其中HBeAg+/HBeAb-组合模式6种，HBeAg-/HBeAb+组合模式6种，HBeAg+/HBeAb+组合模式1种。HBeAg+/HBeAb-组合模式组HBV-DNA阳性检出率明显高于HBeAg-/HBeAb+组合模式组和HBeAg+/HBeAb+组合模式组，P值分别<0.01和<0.05。HBeAg+/HBeAb-组合模式组HBV-DNA≥10 5 者显著多于HBeAg-/HBeAb+组合模式组和HBeAg+/HBeAb+组合模式组，P值均<0.01。结论 乙型肝炎患者血清e系统表现模式较为复杂。e系统不同组合模式间HBV-DNA阳性检出率和HBV-DNA水平均存在一定差异。HBeAg+/HBeAb-组合模式与乙肝病毒复制关系密切，可作为乙肝病毒复制活跃的良好免疫学参考指标之一。HBV-DNA定量检测仍是目前评价乙肝病毒复制较为可靠的指标。
关键词 血清e系统表现模式 乙肝病毒复制 乙型肝炎患者
Investigation on HBeAg/HBeAb serological models in hepatitis patients and its relationship with HBV-DNA
Meng Yunyun，Yang Zhiguo，Ju Jiulong.
The81st Hospital of PLA，Nangjing210002.
【Abstract】 Objective To study the HBeAg/HBeAb serological models in hepatitis patients and its relationˉship with HBV-DNA.Methods HBV serological markers and HBV-DNA in the sera of hepatitis patients were deˉtermined by ELISA and fluorescent quantitative PCR respectively.Results Thirteen different combination models of HBeAg/HBeAb in the sera were found in1609hepatitis patients（6were HBeAg+/HBeAb-，6were HBeAg-/HBeAb+，1was HBeAg+/HBeAb+）.The positive percentage of patients with HBV-DNA>10 2 copies/ml in HBeAg+/HBeAb-combination model groups had a significant difference compared with that in HBeAg-/HBeAb+combination model groups（P<0.01）and HBeAg+/HBeAb+combination model groups（P<0.05）;The percentage of patients with HBV-DNA≥10 5 copies/ml in HBeAg+/HBeAb-combination model groups was highter than that in the other combination model groups（P<0.01）.Conclusion The combination models of HBeAg/HBeAb in sera of hepatitis patients are diverse and complicated.The serological model of HBeAg+/HBeAb-has a good correlation with HBV-DNA and could be used as a marker for the active replicating of HBV.The appearance of HBeAb in sera of hepatitis patients indicates that the replication of HBV is inhibited to some extent and the copies of virus is athletic.HBV-DNA quantitative is still a suitable way to evaluate the replication of HBV-DNA.
Key words HBeAg/HbeAb serological models HBV-DNA hepatitis patients
乙型肝炎病毒（HBV）血清免疫标志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）检测是目前临床诊治乙型肝炎的常规项目，其中HBeAg/HBeAb指标在临床分析判断HBV复制时具有一定的参考作用。在大量的临床检测实践中笔者发现血清e系统模式呈多样化表现，为进一步探讨我国乙型肝炎患者血清e系统表现模式及其与乙肝病毒复制的关系，笔者收集我所近年来收治的1609例乙型肝炎患者的HBV血清免疫标志物和HBV-DNA定量检测结果资料，对乙肝病毒血清e系统表现模式以及与HBV复制的关系进行综合评价。现将结果报告如下。
1 对象与方法
1.1 研究对象 收集2002年12月～2004年1月在我研究所就诊并同时检测乙肝病毒血清免疫标志物（HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb）和HBV-DNA定量检测的全部资料。凡血清HBeAg或HBeAb阳性者列为研究对象，符合本组资料要求者共1609例。
1.2 检测方法 HBV血清免疫标志物检测采用ELISA一步法，试剂为河南华美生物工程公司产品。HBV-DNA采用荧光定量PCR法，仪器为罗氏公司Lightcycler，试剂由深圳匹基公司提供（灵敏度为5×10 2 拷贝/ml）。所有操作均严格按试剂说明书进行操作。
1.3 统计学方法 采用χ 2 检验。乙肝病毒血清免疫标志物HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb的代码号依次为1、2、3、4、5。模式代码表示其相对应项目为阳性。
2 结果
2.1 血清e系统表现模式 本组1609例乙肝患者中HBeAg、HBeAb与HBsAg、HBsAb、HBcAb间的组合模式共有13种，其中HBeAg+/HBeAb-组合模式6种，HBeAg-/HBeAb+组合模式6种，HBeAg+/HBeAb+组合模式1种。在HBeAg+/HBeAb-组合模式中以1、3、5模式最为常见占91.25%，其次为1、3和1、2、3、5模式，分别占5.61%和2.61%;在HBeAg-/HBeAb+组合模式中以1、4、5模式最 为常见占85.63%，2、4、5和4、5模式分别占6.76%和4.37%;HBeAg+/HBeAb+仅见1种组合模式。本组e系统13种表现模式中可见8种少见模式，共计59例，占全部病例的3.67%，见表1。
表1 1609例乙型肝炎患者血清e系统组合模式分布表（略）
2.2 血清e系统模式与HBV-DNA的关系 不同e系统 模式组HBV-DNA检测结果见表2。
表2 e系统模式与HBV-DNA定量检测结果比较（略）
表2显示HBeAg+/HBeAb-模式组HBV-DNA阳性检出率明显高于HBeAg-/HBeAb+模式组（P<0.01）和HBeAg+/HBeAb+模式组（P<0.05）。HBeAg+/HBeAb-模式组中HBV-DNA拷贝数/ml≥10 5 者占87.09%（776/891），HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式式组中HBV-DNA拷贝数/ml≥10 5 以上者分别占15.77%（112/710）和37.50%（3/8），HBeAg-/HBeAb+模式组HBV-DNA拷贝数/ml≥10 5 以上者显著多于HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式组，P<0.01。HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式组之间HBV-DNA拷贝数/ml≥10 5 者差异无显著性（P>0.05）。
3 讨论
本组研究资料表明，血清乙肝病毒e系统表现模式较为复杂，如表1所示，本组1609例乙肝患者中血清e系统表现模式共有13种之多，其中HBeAg+/HBeAb-组合模式6种，HBeAg-/HBeAb+组式模式6种，HBeAg+/HBeAb+组合模式1种。在HBeAg+/HBeAb-组合模式中以1、3、5模式最为常见占91.25%，其次为1、3模式占5.61%;在HBeAg-/HBeAb+组合模式中以1、4、5模式最为常见占85.63%，2、4、5和4、5模式分别占6.76%和4.37%。常见模式的种类和比例与国内文献报道基本相同 ［1，2］ 。本组e系统少见模式有8种共59例，占全部病例总数的3.67%，所有结果均经2次以上重复检测确定，与典型的两对半模式比较，其主要表现为HBsAg、HBcAb缺失或HBsAg/HBˉsAb、HBeAg/HBeAb同时阳性。对于HBsAg、HBcAb的缺失，如1、3，3、5，2、3、5，2、3，2、4，4组合模式，推测可能与乙肝病毒S、C区基因变异有关。乙肝病毒S基因位点的突变可使a抗原决定簇二级或三级结构发生改变而导致其抗原性发生明显改变或造成HBsAg合成障碍或HBsAg低水平表达，使一般常规免疫学方法不能检出［3，4］ 。乙肝病毒前C区、C区突变导致HBcAg变异或低水平HBcAb可能是造成HBˉcAb阴性的原因之一 ［5］。对于HBsAg、HBsAb同时阳性则认为可能系HBV血清标志模式转换的中间模式或由于HBV变异株感染引起 ［1，6］ 。此外，由于ELISA一步法方法学上存在的假阴性问题，也可能影响到检测结果的准确性 ［7，8］ 。因此笔者认为，对于HBV血清e系统少见模式尚须采用ELISA二步法或微粒子荧光酶免疫分析法进行确认，以提高检测结果的准确性。
通常认为，血清HBeAg阳性表示病毒复制活跃，传染性强，HBeAb阳性则表示病毒复制减弱、传染性小。荧光定量PCR法能直接检测血清中HBV拷贝数，因此是反映体内HBV复制的可靠指标。本文对1609例乙型肝炎患者血清e系统不同模式与HBV载量的相关性研究结果显示，HBeAg+/HBeAb-模式组HBV-DNA阳性检出率明显高于HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式组，P值分别<0.01和<0.05，说明血清e系统模式与HBV复制之间存在一定的相关关系。当血清e系统标志呈HBeAg+/HBeAb-时，提示体内HBV大多呈复制状态。
研究结果还显示，HBeAg+/HBeAb-模式组HBV-DNA拷贝数≥10 5 者显著多于HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式组，P均<0.01，表明当血清e系统标志为HBeAg+/HBeAb-时乙肝病毒多呈高水平复制，可作为临床评价HBV复制活跃的免疫学参考指标之一。本组资料中HBeAg-/HBeAb+模式组和HBeAg+/HBeAb+模式组血清HBV-DNA拷贝/ml≥10 5 以上者分别占15.77%和37.50%，两组间HBV高水平复制率无明显差异，提示HBeAg在向HBeAb血清转换的动态过程中HBV的复制水平正在逐渐减少。笔者还观察到，在HBeAg+/HBeAb-模式中有6.17%的患者HBV-DNA拷贝数/ml<10 2 ，是否 由于HBV基因变异或HBV-DNA低水平复制而未能检出有待进一步探讨。此外HBeAg-/HBeAb+模式中HBV-DNA阳性者中有39.02%的患者HBV-DNA拷贝数/ml≥10 5 （112/287），其中>10 7 者占2.09%（6/287），说明当血清e系统表现模式为HBeAg-/HBeAb+时，并不能确定HBV是否复制，建议应进一步进行HBV-DNA定量测定。
综上所述，乙型肝炎患者血清e系统表现模式较为复杂，部分少见模式可能与HBV变异有关;e系统不同模式间HBV-DNA阳性率和HBV-DNA含量均存在一定的差异;HBeAg+/HBeAb-模式与乙肝病毒复制关系密切，是反映乙肝病毒复制活跃的良好免疫学参考指标，建议临床尽可能同时检测HBV-DNA含量对HBV复制进行综合评价。
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（收稿日期:2004-08-07）
作者单位:210002江苏南京解放军第81医院南京军区肝病研究所
（编辑一 坤）