uPA和uPAR在乳癌组织中的表达及其临床意义

【摘要】  目的 观察尿纤溶酶原激活物（uPA）和尿纤溶酶原激活物受体（uPAR）的表达与乳癌生物学行为的关系。方法 采用免疫组化PV 6000两步法检测20例乳腺导管内癌和50例浸润性导管癌组织中uPA和uPAR的表达。结果 乳腺浸润性导管癌组织中uPA和uPAR阳性表达率高于导管内癌(χ2=6.41、6.27，P<0.05)。uPA和uPAR在有腋窝淋巴结转移者的阳性表达率为80.6%和83.9%，无淋巴结转移者为47.4%和52.6%，其差异有显著性(χ2=5.99、5.70，P<0.05)。uPA与uPAR在乳腺浸润性导管癌组织中的表达呈显著正相关(r=0.86，P<0.01)。结论 uPA和uPAR的激活在乳癌浸润和转移过程中起重要作用。

【关键词】  乳腺肿瘤；尿激酶型纤溶酶原激活物；免疫组织化学

    EXPRESSION OF uPA AND uPAR AND ITS CLINICAL SIGNIFICANCE IN HUMAN BREAST CARCINOMA HAO QING,  WU GE (Department of Pathology, Central Hospital of Binzhou, Huimin 251700, China) ［ABSTRACT］ObjectiveTo study the expression of urokinasetype plasminogen activator (uPA) and its receptor (uPAR) as well as its relationship with biological behavior of human breast cancer. MethodsThe expression of uPA and uPAR in 50 cases of infiltrating duct carcinoma and 20 cases of intraductal carcinoma was detected by PV 6 000 twostep immunohistochemical method.  ResultsThe positive rates of uPA and uPAR in infiltrating duct carcinoma were significantly higher than those in intraductal carcinoma (χ2=6.41,6.27;P<0.05). The positive rates of uPA and uPAR in infiltrating duct carcinomas with axillary lymph node metastasis were significantly higher than those without (χ2=5.99,5.70;P<0.05). There was a positive correlation between the expression of uPA and uPAR in breast infiltrating duct carcinoma (r=0.86,P<0.01). ConclusionThe activation of uPA and uPAR plays an important role in the infiltration and metastasis of breast carcinoma.

    ［KEY WORDS］breast neoplasms; urokinasetype plasminogen activator; immunohistochemistry

    肿瘤的侵袭转移是一种不受调控的肿瘤组织取代正常组织的重建过程,在该过程中肿瘤细胞分泌或诱导分泌的蛋白水解酶对细胞外基质的降解是肿瘤组织重建的重要决定条件［1］。因此，肿瘤组织中一些蛋白水解酶尤其是尿纤溶酶原激活物（uPA）和尿纤溶酶原激活物受体（uPAR）系统被认为在肿瘤的侵袭转移过程中具有重要作用。本文应用免疫组织化学方法检测uPA和uPAR在乳腺导管内癌和浸润性导管癌组织中的表达，探讨其与乳癌生物学行为的关系。

    1  材料与方法

    1.1  材料

    20例乳腺导管内癌和50例浸润性导管癌标本为我院外科2000～2004年手术切除的组织。病人术前均未接受化疗和放疗。年龄27～75岁，平均48岁。50例浸润性导管癌中，有腋窝淋巴结转移者31例，无转移者19例。

    1.2  方法

    所有标本均经40 g/L中性甲醛固定，石蜡包埋，4 μm厚连续切片。免疫组化染色采用PV 6000两步法。uPA和uPAR单克隆抗体及PV 6000试剂盒均购北京中杉生物试剂公司（即用型）。每批染色均用已知阳性切片作阳性对照，用PBS替代一抗作阴性对照。

    1.3  免疫组化阳性结果判定

    uPA阳性颗粒呈黄色，主要位于癌细胞浆；而uPAR阳性信号主要位于癌细胞膜，亦为黄色颗粒。阳性细胞数≥25%为阳性，阳性细胞数<25%为阴性。

    1.4  统计方法

    根据资料性质采用χ2及Spearman相关检验。

    2  结    果

    2.1  uPA和uPAR在乳腺导管内癌和浸润性导管癌中的表达

    50例浸润性导管癌组织中uPA和uPAR的阳性表达率分别为68.0%和72.0%，20例乳腺导管内癌中uPA和uPAR的阳性表达率分别为35.0%和40.0%。二者阳性率比较差异有显著意义(χ2=6.41、6.27，P<0.05)。

　　2.2  uPA和uPAR的阳性表达率与乳腺浸润性导管癌腋窝淋巴结转移的关系

    31例有局部淋巴结转移的乳癌组织中uPA和uPAR的阳性表达率分别为80.6%和83.9%，19例无淋巴结转移者分别为47.4%和52.6%。二者间比较差异有显著性(χ2=5.99、5.70，P<0.05)。

    2.3  uPA和uPAR在乳腺浸润性导管癌组织中表达的相关性

    50例乳腺浸润性导管癌组织中，uPA和uPAR均呈阳性表达者30例，两者同时呈阴性表达者10例。二者在乳腺浸润性导管癌中的表达呈显著正相关(r=0.86，P<0.01)。

    3  讨    论

    细胞外基质的降解是肿瘤浸润和转移的重要组成部分，这个过程需要4组蛋白酶的参与，即金属蛋白酶、胱氨酸蛋白酶、天门冬氨酸蛋白酶、丝氨酸蛋白酶。许多研究表明，丝氨酸蛋白酶和金属蛋白酶在恶性肿瘤的浸润和转移过程中首先参与了宿主组织的降解。近年来人们对uPAuPAR系统进行了深入的研究，发现uPA是一种丝氨酸蛋白酶，由肿瘤细胞或基质中的其他细胞以单链原酶形式分泌，与肿瘤细胞表面uPAR结合，成为双链活性uPA，激活纤溶酶系统，引起细胞外基质和基底膜的降解，从而导致肿瘤细胞的浸润转移，这一过程被认为是肿瘤侵袭转移的首要步骤［2］。1988年有文献报道了uPA、uPAR与肿瘤浸润和转移的相关性［3］。近年来的研究结果显示，uPA和uPAR的表达水平与许多恶性肿瘤的浸润转移及预后有密切关系［4～6］。YANG等［5］对59例结肠癌组织中uPA和uPAR的检测结果显示，uPA和uPAR高表达与结肠癌的浸润、远处转移和病人生存率密切相关。

    本文应用免疫组化技术对20例乳腺导管内癌和50例浸润性导管癌组织中uPA和uPAR检测结果显示，乳腺浸润性导管癌中uPA和uPAR阳性表达率高于导管内癌，uPA和uPAR在有腋窝淋巴结转移者的阳性表达率明显高于无淋巴结转移者，并且uPA与uPAR在乳腺浸润性导管癌中的表达呈显著正相关。此结果说明乳癌组织中存在uPAuPAR系统的异常激活和过量表达，可引起细胞外基质和基底膜的降解，为乳癌细胞浸润和进一步转移创造了一个局部的微环境。

    总之，我们认为uPAuPAR系统的异常激活在乳癌的浸润和转移过程中起着重要作用，uPA和uPAR的表达水平可以作为判断乳癌分子生物学行为的指标。

【参考文献】
  ［1］DANO K, ROMER J, NIELSEN B S, et al. Cancer invasion and tissue remodeling cooperation of protease systems and cell types ［J］. APMIS, 1999,107(1):120127.

［2］REUNING U, MAGDOLEN V, WILHELM O, et al. Multifunctional potential of the plasminogen activation system in tumor invasion and metastasis (review) ［J］. Int J Oncol, 1998, 13 (5): 893.

［3］MACCHINE E, EPIFANO O, STEFANINI M, et al. Urokinase redistribution from the secreted to cell bound fraction in granulosa cells of rat preovulatory follicles ［J］. Biol Reprod, 2000， 62(4): 895.

［4］孙显路,孙仁寿,李玉军,等. 尿激酶型纤溶酶原激活物及其受体表达与胰腺癌浸润和转移的关系［J］.青岛大学医学院学报，2003,39(3):244.

［5］YANG J L, SEETOO D, WANG Y, et al. Urokinase type plasminogen activator and receptor in colorectal cancer: independent prognostic factors of metastasis and cancer specific survival and potential therapeutic targets ［J］. Int J Cancer, 2000, 89 (5): 431.

［6］毛昕,李延江,李玉军,等. uPA与uPAR在肾细胞癌中的表达及其意义［J］. 齐鲁医学杂志, 2003,18(2):121.

作者单位：（1 滨州市中心医院病理科，山东 惠民 251700； 2 滨州市人民医院病理科）