胃癌组织Survivin蛋白表达及其与HP感染关系

【摘要】  　　目的 探讨Survivin蛋白在胃癌中的表达及其与幽门螺杆菌（HP）感染之间的关系。方法 应用免疫组化方法检测70例胃癌及癌旁组织标本Survivin蛋白的表达,WarthinStarry染色法检测胃癌组织中HP感染情况。结果 胃癌组织中Survivin阳性表达率74.3％，癌旁组织为41.4％，胃癌组织中Survivin的表达强度明显高于癌旁组织(Z=5.33,P<0.05)。Survivin蛋白表达与病人性别、Borrmann分型无关(P>0.05)；而其表达强度与胃癌分化程度、浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关（Hc=-4.52～14.70，P<0.05）。Survivin蛋白表达强度与HP感染有关(Z=2.46,P<0.05)。结论 Survivin蛋白的表达与胃癌发生、演进有关；HP感染可增强胃癌Survivin的表达强度。

【关键词】  Survivin蛋白质；胃肿瘤；螺杆菌感染;病理学,临床

　　EXPRESSION OF Survivin PROTEIN IN GASTRIC CANCER AND ITS RELATIONSHIP WITH HELICOBACTER PYLORI INFECTION

　　DONG LILI, XIANG FENGGANG, GAO JIANQING

　　(Department of Pathology, The Affiliated Hospital of Qingdao University Medical College, Qingdao 266003, China)

　　［ABSTRACT］ObjectiveTo study Survivin protein expression in gastric cancer and its relationship with Helicobacter pylori (HP) infection.  MethodsExpression of Survivin protein was detected in cancer and its paraneoplastic tissue by immunohistochemistry technique, and HP infection in cancer determined by WarthinStarry.ResultsThe positive rate of Survivin in cancer tissue was 74.3%, and paraneoplastic was 41.4％, much highly expressed being in cancer (Z=5.33,P<0.05). The expression of Survivin was not related with sex and Borrmann grouping (P>0.05), but related with cancer differentiation, depth of infiltration, and lymph node metastasis (Hc=-4.52-14.70,P<0.05), as well as HP infection (Z=2.46,P<0.05). ConclusionExpression of Survivin protein is related with carcinogenesis, and HP infection may enhance the Survivin expression in gastric cancer.
   
　　［KEY WORDS］Survivin protein; Stomach neoplasms; Helicobacter infections; Pathology, clinical

    Survivin蛋白是近年来发现的一种抗凋亡因子，是凋亡抑制基因家族中的新成员。生理状态下，除胎盘和胸腺组织中发现存在不同程度的Survivin蛋白表达外，大多数组织均未见Survivin蛋白的表达[1]。它在正常分化成熟的组织中不表达，而广泛表达于人类常见的肿瘤组织，它能够促进细胞的恶性转化，与肿瘤的发生发展有关。幽门螺杆菌(HP)感染已被WHO列为胃癌的第一致病因子，然而，HP感染与Survivin的关系鲜有报道。本文采用免疫组化方法检测胃癌组织中Survivin蛋白的表达并探讨其与临床病理因素及HP感染的关系。

　　1  材料与方法

　　1.1  标本来源

    收集青岛大学医学院附属医院2007年间手术切除并经病理证实的胃癌标本70例（术前均未行放、化疗）。均经40 g/L的中性甲醛固定，常规石蜡包埋，4 μm厚常规切片，苏木精伊红（HE）染色和复核病理诊断，并按WHO标准分型、分级。70例中男49例，女21例，年龄34～83岁，平均62.3岁；中高分化25例，低分化45例；其中BorrmannⅠ型3例，BorrmannⅡ型47例，Borrmann Ⅲ型11例，Borrmann Ⅳ型9例；有淋巴转移47例。癌组织浸润至黏膜下层及以上9例，浸润至肌层18例，浸润至浆膜层及以下43例。

　　1.2  方法

    Survivin蛋白的检测采用免疫组化SP法。羊抗人Survivin（1∶150）购自美国Santa cruz公司，羊SP试剂盒购自北京中杉金桥生物工程有限公司。操作按说明书进行，用已知阳性片作阳性对照，阴性对照省略一抗，用封闭血清代替。

　　1.3  免疫组化结果判定

    Survivin阳性染色为棕黄色颗粒，定位于细胞浆或细胞核，部分细胞膜少量表达。每张切片随机选取10个高倍视野（400倍），每个高倍视野计数100个癌细胞，观察阳性细胞染色强度，并计数阳性细胞百分数。首先按染色强度计分：无染色为0分，淡黄色为1分，棕黄色为2分，深棕黄色或棕褐色为3分；再按阳性细胞计数计分：≤5％为0分，6%～30％为1分，31%～70％为2分，≥71为3分；两者计分相加所得总分进行判断，总分0分为阴性（－），1～2分为弱阳性（+）,3～4分为中阳性（），5～6分为强阳性（）[2]。

　　1.4  统计学处理

    应用统计软件SPSS 11.5软件包进行统计学分析，不同组间阳性表达率比较用χ2检验，等级资料比较用Wilcoxon法（两样本）或KruskalWallis法（多样本）秩和检验，P<0.05为差异有显著性。

　　2  结果

　　2.1  胃癌组织Survivin蛋白表达

    Survivin阳性染色为棕黄色颗粒状，定位于细胞浆或细胞核，70例胃癌组织中有52例Survivin表达阳性，阳性表达率为74.3％（52/70），癌旁组织阳性表达率为41.4％。40例远癌黏膜组织无阳性表达,胃癌组织Survivin的阳性表达率高于癌旁组织,二者比较差异有统计学意义(χ2=33.30,P<0.05)；胃癌组织中Survivin的表达强度明显高于癌旁组织(Z=5.33,P<0.05)。见表1。表1  Survivim在胃癌及相应的癌旁组织的表达(略)

　　2.2  Survivin蛋白表达与胃癌临床病理特征间的关系

    Survivin蛋白表达与病人性别、Borrmann分型无关(P>0.05)；而其表达与胃癌的分化程度，浸润深度、临床分期、淋巴结转移有关（Hc=－4.52～14.70，P<0.05）。见表2。表2  Survivin蛋白在胃癌组织表达及与临床病理特征间的关系（略）

　　1.3  HP感染与胃癌组织Survivin蛋白表达关系

    HP阳性胃癌组织Survivin蛋白的阳性表达率为85.11%(40/47),HP阴性组胃癌组织中Survivin蛋白的阳性表达率为52.17%(12/23),二者比较差异有显著性(χ2=9.44,P<0.05)。HP阳性组胃癌组织中Survivin的表达强度高于HP阴性组(Z=2.46,P<0.05)。见表3。表3  HP阳性和HP阴性胃癌组织Survivin表达（略）

　　3  讨论

    Survivin是IAPs家族中最小成员[3],是凋亡抑制蛋白家族成员之一,它在正常分化成熟的组织中不表达,而广泛表达于人类常见的肿瘤组织。它可以促进细胞的恶性转化、抑制细胞凋亡、促进细胞增殖、参与调节细胞的有丝分裂，并可能参与血管生成，对肿瘤的浸润、转移可能起重要作用。研究表明，Survivin在几乎所有被检测过的恶性肿瘤组织中有不同程度的表达,表达率为30%～100%,且Survivin的表达与多种肿瘤的生物学特性和(或)疾病分期有关[4]。王东升等[5]研究显示，Survivin在胃癌组织中的表达率为70％，不典型增生胃黏膜组织中的表达率为42％。正常胃黏膜组织、浅表型胃炎组织中不表达，提示Survivin蛋白的表达发生在胃癌恶性转化的早期和进展期，表明Survivin蛋白与胃癌的发生发展有关。郭燕等[6]研究结果表明，Survivin蛋白在胃癌组织中高表达，相应癌旁组织中无表达。本研究采用免疫组化法检测了胃癌组织中Survivin的表达,结果显示胃癌病人Survivin阳性表达率为74.3%,阳性染色均定位于胃癌细胞浆中,远癌黏膜组织中Survivin不表达，胃癌组织中Survivin的阳性表达率明显高于癌旁组织，提示Survivin蛋白的表达与胃癌的发生有关。OKADA等[7]研究显示，Survivin蛋白表达与肿瘤预后、淋巴结转移、组织学分级无关。董吉顺等[8]在胃癌的研究中显示，Survivin蛋白的表达与胃癌组织浸润深度和淋巴结转移密切相关。本研究显示，Survivin蛋白表达强度与胃癌的不同分化程度、浸润程度、临床分期及淋巴结转移有关，分化程度低者,浸润深度深者,临床分期晚者及淋巴结转移者,Survivin蛋白的表达增强（P<0.01），提示Survivin蛋白与胃癌细胞生物学行为及演进有关。
   
　　已有研究显示，在胃癌的形成过程中，HP感染可明显增加胃黏膜增殖。HP感染可引起胃黏膜损伤，同时可引起DNA的损伤及基因突变。HP感染可上调胃黏膜组织中rasp21和p53基因的表达，参与胃癌的发生发展。在肠化生的过程中HP可诱导细胞凋亡，但在不典型增生过程中，HP可以抑制细胞凋亡[9]。HP感染与Survivin的表达之间的关系,目前尚缺乏研究。李风朝[10]等研究显示，胃癌组织中HP感染阳性组Survivi蛋白的表达显著高于阴性组,提示Survivin蛋白在胃癌组织中的表达与HP感染有关,两者在胃癌的发生中可能有协同作用。本文研究显示,HP阳性胃癌组织中Survivin蛋白的阳性表达率高于HP阴性组，HP阳性胃癌组织中Survivin蛋白的表达强度显著高于HP阴性者，提示HP感染可促使胃癌组织Survivin蛋白的表达水平的增高。
   
　　综上所述，Survivin蛋白在胃癌的发生发展中起重要作用，而且与胃癌的演进有关；HP感染可促使胃癌组织Survivin蛋白表达增强，提示HP感染及Survivin在胃癌发生中发挥不同的作用。

【参考文献】
  　　[1]吕同德,黄启普,惠玲,等. 生存素、MMP2和NM23在胃黏膜及胃癌组织中的表达[J]. 兰州大学学报：医学版, 2008,34(1):1719.

　　[2]LU C D, ALTIERI D C, TANIGAWA N, et al. Expression of a novel antiapoptosis gene, survivin, correlated with tumor cell apoptosis and P53 accumulation in gastric carcinomas[J]. Cancer Res, 1998,58(22):18021086.

　　[3]LACASSE E C, BAIRD S, KORNELUK R G. The inhibitors of apoptosis (IAPS) and their emerging role in cancer[J]. Oncogene, 1998,17:32473259.

　　[4]ALTIERI D C, MARCHISIO P C, MARCKISIO C. Survivin apoptosis: an interloper between cell death and proliferation in cancer[J]. Lab Invest, 1999,79:13271333.

　　[5]王东升,仲蓓,姜艳. 胃癌组织中Survivin、PTEN、P53基因的表达及意义[J]. 山东医药, 2003,43(36):68.

　　[6]郭燕,赵清喜,刘春霞. 幽门螺杆菌感染与胃癌Survivin蛋白表达的关系[J]. 齐鲁医学杂志, 2007,22(2):126130.

　　[7]OKADA E, MURAI Y, MAISAI K, et al. Survivin expression in tumor cell nuclei is predictive of a favorable prognosis in gastric cancer patients[J]. Cancer Lett, 2001,95(1):9295.

　　[8]董吉顺,倪灿荣. 胃癌中survivin、PTEN、CyclinD1和P53基因的表达及其相关性[J]. 临床与实验病理学杂志, 2003,19(4):396400.

　　[9]ZHANGH Z, YUAN Y, GAO H, et al. Apoptosis, proliferation and p53 gene expression of H. pylori associated gastric epithelial lesions[J]. World J Gastroenterol, 2001,7(5):779.

　　[10]李风朝,孔庆,杨学梅. 胃癌中生存素蛋白的表达及其与幽门螺杆菌的关系[J]. 徐州医学院学报, 2004,24(6):504506.

作者单位：1 青岛大学医学院附属医院病理科，山东 青岛 266003; 2 日照市妇幼保健院