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【摘要】 目的 了解金黄色葡萄球菌对矽肺临床常用抗菌药物的耐药情况,为临床合理用药提供参考。方法 对各类感染标本分离的62 株金黄色葡萄球菌,采用K-B纸片琼脂扩散法进行药敏试验；头孢西丁纸片扩散法筛选耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)。结果 头孢西丁纸片扩散法共检出37 株(59.7%)MRSA。MRSA 对β内酰胺类抗生素耐药率较高,对青霉素、头孢西丁、头孢曲松、氨苄西林耐药率均达100%；MRSA 和甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA) 对大环内酯类、磺胺类抗生素均有不同程度耐药；复方新诺明对MRSA菌的敏感率比MSSA强得多, MRSA对其的敏感率达78.4% ,MSSA 对其的敏感率仅达8%；MRSA 对红霉素的耐药率极高,达97.3%；MRSA 和MSSA 对万古霉素的敏感率均为100%。MRSA 检出率为59.7%。结论 临床分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物多重耐药,应根据分离株耐药特点选用不同的治疗方案；头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA效果较好。
【关键词】 矽肺；金黄色葡萄球菌；耐药性；微生物；抗菌药物；MRSA；MSSA
随着抗生素的广泛应用,金黄色葡萄球菌已成为医院感染的主要病原菌之一,特别是耐甲氧西林葡萄球菌(MRSA)引起的感染呈逐年增多趋势,并以其多重耐药导致各种感染治疗困难,早已引起医学界的广泛关注［1］ 。由于MRSA 对多种抗菌药物耐药而使得治疗由它引起的感染和控制其传播变得十分困难，因此监测细菌的耐药性,对合理选用抗菌药物,避免耐药菌株的产生及流行具有重要意义。对我院2008年1—12月中住院的矽肺患者分离的62株金黄色葡萄球菌的耐药程度进行研究,以便为临床治疗提供参考。
1 材料与方法
1.1 菌株来源 收集2008年1—12月在本院住院的矽肺患者临床标本中分离出金黄色葡萄球菌62 株(在1周内从同一患者同类标本中分离到的菌株不重复计入)。其中男55例，女7例；年龄最小50岁，最大72岁，平均62.1岁。接种于一次性血/中国蓝琼脂平板35℃孵育18～24h。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC 25923。
1.2 试验用品 一次性血/中国蓝琼脂平板购于郑州博赛有限公司；M2H琼脂购于杭州天和微生物试剂有限公司；抗菌药物纸片购于杭州天和微生物试剂有限公司。
1.3 药敏试验 采用纸片扩散法（K-B法)进行药敏试验,其方法为挑取菌落置于0.5ml生理盐水管浓度校正至0.5麦氏标准，用无菌棉签蘸取菌液均匀涂布于MH琼脂表面，待干燥后用无菌镊子将含药纸片均匀紧贴于琼脂表面，35℃孵育18～24h，然后量取抑菌圈的直径，其结果判读按美国临床实验室标准化研究所(CLSI/ NCCLS) 2005 年标准进行。
1.4 MRSA菌株的筛选 标本用NCCLS 2004 年制定的头孢西丁纸片扩散法,结果判定标准:抑菌圈直径≤19mm 或在抑菌圈内有任何可辨的菌落生长均为耐药。
1.5 统计学方法 采用χ2 检验。
2 结果
2.1 金黄色葡萄球菌标本分布及MRSA检出率 62 株金黄色葡萄球菌中有37 株为表型MRSA,MRSA总检出率为59.7%。不同来源分离株中的MRSA检出率比较，痰液及咽拭子标本与其他标本差异有显著性（χ2= 8.90，P＜0.01）；伤口分泌物标本与痰液及咽拭子标本、伤口分泌物标本与其他标本差异无显著性。尽管痰液及咽拭子标本中分离的金黄色葡萄球菌MRSA 检出率达71.4%,但与MRSA 总检出率相比,差异无显著性(χ2= 1.66,P> 0.05) ，见表1。表1 金黄色葡萄球菌标本分布及MRSA 检出率
2.2 药敏结果 62 株金黄色葡萄球菌［MRSA 与甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)］对12 种常用抗菌药物的敏感率见表2 。MRSA 对β内酰胺类抗生素耐药率均较高,对青霉素、头孢西丁、头孢曲松、氨苄西林耐药率均为100%，对头孢哌酮、头孢唑林的耐药率分别为81.1%(即1～18.9%)、89.2%(即1～10.8%)；MSSA 对β内酰胺类抗生素相对敏感,但MSSA 对青霉素、氨苄西林的耐药率也非常高,达96%,均只有1 株对MSSA敏感。MRSA 和MSSA 对大环内酯类抗生素如红霉素均有不同程度耐药。复方新诺明对MRSA菌的敏感率比MSSA强得多, MRSA对其的敏感率达78.4%,MSSA 对其的敏感率仅达8%；MRSA 对红霉素的耐药率极高,达97.3%(即1～2.7%)，但MSSA 耐药率较低。MRSA对 β内酰胺类/β内酰胺酶抑制剂相对较敏感，与MSSA对其的敏感性相差不大。MRSA 和MSSA 对万古霉素的敏感率均为100%,无耐药株。表2 MRSA与MSSA对常用抗菌药物的敏感率比较
3 讨论
金黄色葡萄球菌为临床感染常见的病原菌,可致人体所有组织和器官感染。本研究金黄色葡萄球菌标本来源以痰液和咽拭子为主,伤口分泌物标本中也较常见。我院各类临床标本中分离出的金黄色葡萄球菌62 株中,MRSA总检出率达59.7%,稍高于中国细菌耐药检测研究组的报道［2］ ，提示MRSA引起的感染已非常普遍。这与我们采用头孢西丁纸片扩散法筛选MRSA ,其较常用的苯唑西林纸片敏感度较高有关［3］ 。通过分析还证明了头孢菌素类与β- 内酰胺酶抑制剂的复合制剂的抗菌活性较高［4］ 。金黄色葡萄球菌对β内酰胺类药物的耐药机制主要包括产β内酰胺酶和青霉素结合蛋白(PBP2a)的突变［5］ 。由于头孢西丁能诱导mecA 基因表达PBP2a,能更好地检出不均一耐药的菌株,因此,2004 年起NCCLS 规定使用头孢西丁来筛选MRSA 表型。本研究药敏结果显示,金黄色葡萄球菌存在严重的耐药和多重耐药性。除万古霉素外,对其他抗菌药物都存在不同程度的耐药,其中最显著的是青霉素,耐药率达96%。既往常用于金黄色葡萄球菌败血症的苯唑西林、庆大霉素、红霉素等的耐药率已明显升高,不宜作为首选药物。因此,金黄色葡萄球菌败血症的治疗应在细菌学检测的指导下,选择恰当的抗菌药物联合应用至足够疗程。目前对金黄色葡萄球菌唯一允许经验用药的是万古霉素，特别是MRSA 感染，虽然近年已发现有耐万古霉素的菌株［6］ ,但只是个案报道。由于耐药菌株的出现与抗生素的应用密切相关,尤其是具有高潜在耐药性的抗生素,是必须严格限制使用的一类抗生素,如头孢他啶、环丙沙星、亚胺培南、庆大霉素,是有可能导致耐药问题出现的抗生素。所以，在临床进行治疗时应根据药敏结果及时调整用药方案,减少经验用药，掌握细菌耐药机制，加强细菌耐药性监测，合理、正确使用抗生素，使感染得到控制。
【参考文献】
1 倪语星. 质粒介导的产超广谱β- 内酰胺酶耐药性问题及检测. 中华医学检验杂志,1999,22:316-317.
2 赵建平,周秀兰,方君,等. 产超广谱β- 内酰胺酶的检测及应用. 中华医学检验杂志,2002，25(2):112-113.
3 喻华,刘小琦,刘华,等. 头孢西丁纸片扩散法检测耐甲氧西林葡萄球菌的临床应用评价. 国际检验医学杂志, 2006，(12): 1085-1087.
4 蒋荩芳，周黎.金黄色葡萄球菌的分离鉴定及耐药分析.检验医学与临床，2008,（24）：1501-1502.
5 郭洁，郑格林，张平.260株金黄色葡萄球菌的耐药分析.中国卫生检验杂志，2008,12：2637-2638.
(编辑：悦 铭)
作者单位：410008 湖南长沙,长沙市中心医院分院