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【摘要】 目的 为急性泌尿道感染患者提供快速选药依据，避免抗生素滥用。方法通过亚硝酸盐（NIT）和白细胞（LEU）酯酶试验进行菌尿标本筛选，阳性尿样直接加入到药敏分析试剂板经35℃18～24h培养后进行药敏分析。尿样同时进行传统培养鉴定、药敏试验和直接涂片找细菌，比较两种方法药敏结果及NIT、LEU菌尿筛定的符合程度。结果 96例急性泌尿道感染患者尿液标本中，NIT和LEU均阳性样本90份，NIT阴性、LEU阳性样本6份，经培养均检测出病原菌;LEU<100/μl的样本直接涂片找细菌阳检率低。NIT和LEU均阳性样本中的83株革兰阴性杆菌（G - B）两种方法药敏结果一致，7株革兰阳性球菌（G + C）存在敏感药物漏选，但有敏感药物供快速选用;NIT阴性、LEU阳性样本中的6株G + C两种方法药敏结果一致。结论 急性泌尿道感染经NIT、LEU菌尿筛定后用KH-21细菌药敏分析试剂板直接进行药敏分析，方法简单、快速，能在24h内为临床治疗提供选药依据，避免抗生素滥用，有实用价值。
关键词 急性泌尿道感染 菌尿 亚硝酸盐 白细胞酯酶 快速选药
The selection of bacteriuria and rapid choice
of medicine testing for acute urinary infection
Yang Liu，Luo Minghui，Tong Nengsheng
Department of Laboratory，The Second Hospital of Huangshi，Hubei435002.
【Abstract】 Objective To provide the basis of the rapid choice of the medicine for the patients，and to avoid the misuse of the antibiotic.Methods According to the selection of the sample of bacteriuria througth NIT and LEU esterase testing，add to the positive sample directly to the antimicrobial susceptibility analytic board，to culture the bacˉteria at35℃for18～24hours，then take and analysis of antimicrobial susceptibility.The urinary sample is on tradiˉtional culture and appraise，antimicrobial susceptibility testing，search after bacteria directly in microscopic examinaˉtion.Then take the contrast of the two antimicrobial susceptibility testing and the extent of the coincidence of the selecˉtionof the NIT and LEU bacteriuria testing.Results In96patients of the acute urinary infection，90positive sample of both NIT and LEU，and6NIT-negative LEU-positive sample，and through culture both samples examine the bacˉteria.The positive rate is low in the LEU<100/μl sample in directly microscopic examination.In the NIT and LEU postive sample，the results of the83Gram-negative bacillus（G - B）sample is in coincidence of the two methods.7Gram-positive coccus（G + C）exist leakage of the susceptible antibiotic，but have susceptible medicine for choice.Inthe NIT-negative LEU-positive sample，6G + C have an unanimous results through both methods.Conclusion The method of antimicrobial susceptibility analytic directly after the selection of the NIT、LEU bacteriuria testing is simple and rapid，the primary results may be provided the basis of clinic treatment in24hours and to avoid the misuse of the antibiotic.
Key words acute urinary infection bacteriuria nitrite leucocyte esterase rapid choice of medicine
泌尿道感染是临床常见感染性疾病，多由细菌引起 ［1］ 。其急性感染的临床诊断并不困难，实验诊断方法亦趋成熟 ［2］ 。然而，在急性发病期间，如果得不到及时有效的抗菌治疗，细菌可通过上行性感染或血行播散引起肾盂肾炎、膀胱炎等，用药不当可使细菌产生耐药或导致慢性感染，加大了治疗难度。因此，避免抗生素的滥用，快速正确的选药尤为重要。将有泌尿道感染临床症状患者的尿样用干化学分析中的亚硝酸盐（NIT）和白细胞（LEU）酯酶试验进行菌尿标本筛选，经筛选后的尿样直接加入到药敏分析试剂板中进行快速选药有其实用价值。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标本来源 本院门诊和住院有泌尿道感染临床症状和体征患者留取的中段尿。
1.1.2 仪器与试剂 尿液干化学分析仪及试带为长春迪瑞公司产品，细菌鉴定/药敏分析仪及试剂板为合肥恒星科技公司产品。
1.2 方法
1.2.1 标本选择 有尿频、尿急、尿痛、膀胱刺激等急性尿道感染症状的患者，嘱其按尿培养标本留取方法留取中段尿 ［3］ 15～20ml。尿液标本先行常规检查和干化学分析（干化学试带中含有NIT和LEU测试模块），凡NIT阳性、LEU阳性的标本即适合于直接药敏分析。
1.2.2 尿液直接药敏分析 根据NIT结果决定药敏分析试剂板种类的选用:NIT与LEU同为阳性标本选用肠杆菌科药敏试剂板;NIT阴性、LEU阳性（白细胞≥100/μl）的标本选用肠球菌/链球菌药敏试剂板。用加样器取尿样加入到药敏分析试剂板小孔中，每孔100μl。盖上试剂板盖，轻轻振摇试剂板，待小孔中的试剂溶解后，置35℃培养18～24h，肉眼或仪器判读结果。肉眼判读:试剂孔中的尿液变浑浊为耐药;试剂孔中的尿液澄清为敏感。对照孔尿液必须变浑浊，表示尿样中有菌生长，如果对照孔中澄清，表示尿样中无细菌生长，为选药失败。
1.2.3 尿培养及对照药敏试验 用传统方法 ［3］ 进行细菌学培养和菌株分离，然后通过HK-21细菌鉴定/药敏分析仪进行病原菌鉴定和药敏分析，比较尿液直接药敏分析和传统培养法药敏分析结果。
1.2.4 尿样直接涂片找细菌 取混匀尿样1滴滴在载玻片上，空气中自然干燥，固定后革兰染色，在油镜下观察20个视野。比较NIT和LEU试验进行菌尿症筛选选样的可行性。
2 结果
96例急性泌尿道感染患者尿液标本中，NIT和LEU均阳性样本90份，NIT阴性、LEU阳性样本6份。病原菌中革兰阴性杆菌（G - B）83株，革兰阳性球菌（G + C）13株，检出率见表1。90份NIT和LEU均阳性尿液标本直接用肠杆菌科药敏试剂板进行药敏分析，其中的83株GB与传统培养用后HK-21细菌鉴定/药敏分析仪进行药敏分析选药结果一致，7株G + C则存在敏感药物漏选。NIT阳性标本中G - B 直接药敏分析与传统培养法选药结果见表2。NIT阳性标本中的7株G + C传统培养后用HK-21细菌鉴定/药敏分析仪进行药敏分析选药结果见表3。这7株G + C均对万古霉素敏感，其中3株对苯唑西林敏感，3株对头孢曲松钠敏感，4株对克林霉素敏感，5株对阿齐霉素敏感，5株对利福平敏感。在肠杆菌科药敏试剂板药物组合中不含这6种药物。对这6种药物敏感的菌株又分别对头孢唑林、头孢噻肟、庆大霉素、丁胺卡那霉素、氧氟沙星、环丙沙星、四环素、呋喃妥因等药物中的一种或几种敏感，肠杆菌科药敏试剂板药物组合中含这几种药物。6份NIT阴性、LEU阳性尿液标本选用肠球菌/链球菌药敏分析试剂板选药，结果与传统培养后用HK-21细菌鉴定/药敏分析仪进行药敏分析选药结果一致，见表4。
表1 96例急性泌尿道感染病例病原菌及检出率
表2 NIT阳性标本中的83株G - B直接药敏分析及传统培养后药敏分析选药结果
注:配伍1:哌拉西林/他唑巴坦 配伍2:头孢哌酮/舒巴坦 S:敏感 R:耐药
表3 NIT阳性标本中的7株G + C传统培养后药敏分析选药结果
注:配伍3:阿莫西林/棒酸
表4 NIT阴性标本中的6株G + C直接药敏分析及传统培养后药敏分析选药结果
尿样直接涂片找细菌，96份尿样中LEU<100/μl者13份，7份直接涂片未找细菌，5份20油镜视野中平均细菌数<1;LEU≥100/μl者38份，2份直接涂片未找细菌，36份20油镜视野中平均细菌数≥1;LEU≥200/μl者45份，20油镜视野中平均细菌数均≥2。
3 讨论
引起泌尿道感染的细菌以肠杆菌科细菌、假单胞菌、肠球菌、葡萄球菌多见 ［2］ ，这些细菌大多能产生硝酸盐还原酶还原硝酸盐生成亚硝酸盐。同时符合三个条件的尿液样本可使干化学试带亚硝酸盐呈阳性反应:（1）尿中存在有能产生硝酸盐还原酶的细菌;（2）尿液中含有适量的硝酸盐;（3）尿液标本在膀胱停留间隔4h以上。正常情况下，尿液都存在有适量的硝酸盐（食物中的硝酸盐、体内蛋白质正常代谢产物的硝酸盐、体内由氨内源性合成的硝酸盐）。因此，晨尿用干化学试带检测到尿中存在亚硝酸盐，即说明尿中有能产生硝酸盐还原酶的细菌存在。该方法的敏感性为59%，特异性为78% ［4］ 。
泌尿道感染后引起炎性反应，尿中的多形核白细胞产生白细胞酯酶，通过检测尿中白细胞酯酶间接推断出炎性细胞数量，炎性细胞数量可反映出感染程度，其感染程度与尿中细菌数量相关。本文96份尿样直接涂片革兰染色后镜检找细菌:LEU<100/μl者阳检率38%，LEU≥100/μl者阳检率95%，LEU≥200/μl者阳检率100%。菌尿症的确定，用尿样直接涂片革兰染色后镜检找细菌的方法进行菌尿症的筛选，对于菌量超过10 5 CFU/ml的尿样来说，是经济且敏感性较高的检测方法，由于临床送检的尿样标本数量多，而阳性结果少，对每份尿样都进行涂片染色，工作繁重，目前较少使用 ［2］ 。文献报道:白细胞酯酶的阳性，指示尿中有白细胞数量的增加，常伴有炎症出现，其灵敏度较高，和传统培养法比较差异无显著性（χ2 =3.79，P>0.05） ［5］ 。资料报道，用NIT+LEU组合诊断泌尿道感染性和特异性分别为89.8%和92.0%，阴性预侧值98.6% ［6］ 。本文用NIF、LEU所选96例急性尿道感染病例尿样经培养均分离出病原菌。急性泌尿道感染常由单一细菌引起 ［2］ ，以肠杆菌科细菌最多见，尤其是大肠埃希氏菌，文献报道其检出率为74.1% ［7］ ，资料报道达85.0% ［6］ 。引起本文中96例急性泌尿道感染的病原菌中肠杆科细菌占92.3%，大肠埃希氏菌占83.1%。经NIT、LEU筛选，NIT、LEU均阳性的尿样选用KH-21细菌药敏试剂