儿童异位性皮炎患儿血清ECP水平的测定

　　【摘要】 目的 探讨儿童异位性皮炎患儿血清ECP水平的测定。方法 用法玛西亚CAP ECP荧光酶标法测定30例儿童异位性皮炎和20名正常儿童血清嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP）水平。结果 儿童异位性皮炎血清ECP值为（25.76±2.45）μg/L，正常对照组为（3.3±0.74）μg/L。患者组明显高于正常组（P<0.01）。结论 在异位性皮炎的发病过程中，ECP可能起着一定的作用。
   
　　关键词 异位性皮炎 嗜酸细胞阳离子蛋白
     
　　Determination of serum eosinophil cationic protein in  patients with atopic dermatitis of children  

　　Wang Yongping，Hou Xiuhua
    
　　Changchun Children’s Hospital，Jilin130051.
   
　　【Abstract】 Objective To determine the levels of serum eosinophil cationic protein（ECP）in the ohildren patients with atopic dermatitis.Methods Serum eosinophil cationic protein（ECP）was measured by pharmacia CAP ECP FEIA in30patients with atopic dermatitis and20normal controls.Results Serum ECP level was25.76±2.45μg/L in atopic dermatitis of children patient group and3.3±0.74μg/L in normal healthy individuals.The mean level of ECP in atopic dermatitis of children patient group was significantly higher than that in normal controls（P<0.01）.Conclusion ECP may play an important role in the pathogenesis of atopic dermatitis of children.

　　Key words atopic dermatitis eosinophil cationic protein  

　　儿童异位性皮炎是种极为常见的皮肤病，但其病因及发病机制却较为复杂，不少学者在各个方面对其进行了多方面的研究，其中血清ECP在儿童异位性皮炎中的作用，国内少有报道。笔者采用法玛西亚CAP ECP荧光酶标法检测系统（phamacia CAP system ECP FEIA）对儿童异位性皮炎患儿血清中ECP水平进行测定，以探讨ECP在临床应用中的意义。
   
　　1 资料与方法
   
　　1.1 一般资料 患者均来自本科门诊，共30例，男19例，女11例;年龄2个月～7岁，平均（2.2±2.41）岁;病期最短6周，最长5年。均有红斑丘疹、渗出、结痂的临床表现。另选20名正常人作为对照组，男12例，女8例，年龄2个月～8岁，平均（2.91±8.6）岁。根据病史及有关检查排除其他过敏性疾病、寄生虫感染和自身免疫性疾病。
   
　　1.2 试剂 酶标抗ECP抗体（enzymeanti-ECP），半乳糖苷（4-methylumbeliferry-D-glacteside）;ECP标准品（ECP starˉdardo）;抗ECP免疫CAP（anti-ECP immuno CAP由pharmacia公司提供）。
   
　　1.3 主要仪器 （1）进口Becton Dickinson4mL SST管;（2）Master CAP assay manager version1.11软件;（3）定位加样器;（4）自动冲洗仪;（5）荧光分光光度计;（6）检测板、阅读板;计算机选用486（均由pharmacia公司提供）。
   
　　1.4 血清标本的采集及处理 （1）受试者应空腹采血，用SST管采集和分离血清;（2）将4ml SST管充满，并轻倒转试管5次;（3）在18℃～23℃下静置凝血60～120min，以1000～1350r/min离心10min;（4）血清标本以小体积分装，在-20℃下保存备用。
   
　　1.5 血清ECP测定 采用pharmacia CAP system ECP，待检血清，ECP标准品。室温下孵育30min，用冲洗仪洗去未结合部分，将酶标抗ECP抗体加入上述反应体系，室温下孵育2.5h，以终止液中止反应，时间必须准确，并将带有荧光的生成物洗脱到阅读板中，将阅读板置入Eluor count96，吸光度值反馈至计算机，报告结果。
　　1.6 统计学方法 采用t检验。
   
　　2 结果

　　30例儿童异位性皮炎的患儿的血清ECP值为（25.76±2.45）μg/L，其中有5例患儿血清ECP值高达37.1～51.7μg/L（临床表现为红斑，其上有针尖大丘疹和丘疱疹、渗出和结痂，境界不清，病程长，反复发作）。20名正常儿童组ECP值为（3.3±0.74）μg/L。异位性皮炎患儿组血清ECP值明显高于正常儿童对照组，差异有非常显著性（P<0.01）。
   
　　3 讨论

　　新近的研究表明，嗜酸粒细胞在变态反应中起着重要作用。其细胞的主要特征之一是含有颗粒，大约200个/细胞。这些颗粒含有强碱性的毒性蛋白，具有细胞毒性蛋白的主要来源，正是这些蛋白导致了某些疾病的病理学改变。在被激活后，释放的主要强碱性颗粒蛋白之一是嗜酸细胞阳离子蛋白（ECP），占颗粒的30%，是单链的，含锌、强碱性的糖蛋白，分子量为22KD，它是嗜酸粒细胞的特异标志 ［1］  ，被认为与过敏性皮肤病密切相关。其作用机制是通过损伤细胞膜而表达出对哺乳动物的细胞有很强的毒性作用。它在脂质的细胞膜上形成离子通道，这些通道的形成可以导致阳性离子的通过率明显增加，损伤靶细胞膜。在炎症过程中诱导肥大细胞释放组胺，使角质形成细胞损伤。还通过改变与C 3b  结合的途径抵制补体的活性，并对C 1 的结合途径亦有影响。
   
　　本研究通过对儿童异位性皮炎患儿和健康儿童人群的血ECP测定，观察到患儿组血清ECP水平明显高于健康儿童组（P<0.01）。并且注意到症状和体征重者ECP值更高，推测ECP在儿童异位性皮炎的发病中起到了一定的作用，这种作用包括参与变态反应和细胞毒性作用，引起肥大细胞释放组胺。国外有学者观察到症状消退或接受抗组胺药物治疗后，血清ECP值会明显下降 ［2］  ，这对观察治疗效果有一定帮助，是一种反应治疗效果的客观指标。另外，在治疗上若能干扰嗜酸粒细胞的激活，可能会改进对该病治疗方式 ［3］  。
   
　　通常认为患儿症状和ECP水平与循环中嗜酸粒细胞的增多有相关性。但是有不少学者认为ECP与外周血的嗜酸粒细胞数量无关，ECP增高是反应整个嗜酸粒细胞池的活化状态和脱颗粒分泌蛋白的能力，ECP是嗜酸粒细胞激活后的表达形式。
   
　　因此，血清ECP测定对探讨儿童异位性皮炎病因、机制、治疗、疗效等有一定的意义，且方法灵敏、快速、特异性高和操作自动化 ［4］  。

　　参考文献
    
　　1 Juhlin L，Venge P.Eosinophil cationic protein（ECP）in skin disorders.Acta Derm Venereol，1991，71（6）:495-501.
   
　　2 Spry CJ，Tai PC，Barkans J.Tissue localization of human eosinophil cationic proteins in allergic diseases.Int Arch Allergy Appl Immunol，1995，77（1～2）:252-254.
   
　　3 Sehneider I，Magyarlaki M，Toth K.Value of determining serum ECP in different skin disorders.Orv Hetil，1994，135（44）:2411-2414.
   
　　4 Kleine-Tebbe J，Eickholt M，Catjen M，et al.Comparison between MAGICLITE and CAP system.Clin Exp Allergy，1992，22（3）:475-477. 

　　（收稿日期:2004-04-30）

　　（编辑李 木）

　　作者单位:130051吉林省长春市儿童医院