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放射免疫分析（radioimmunity assay,RIA）和免疫放射分析的方法（immuneradiomethod assay,IRMA）很早就广泛用于临床、科研及教学等方面。目前生物化学、酶联免疫以及分子生物学等新的检测方法和技术不断出台，但放免技术仍因其结果可靠，简便易行，成本低廉及其高灵敏度，高特异性等优点而仍被广泛应用于临床，但又因其放免物质的特殊性，室内室间质控工作仍不尽完善。本文就如何注意日常放免工作中的诸多环节，以保证检验质量，做如下分析。
1 标本的采集与保存
1.1 采血时间 一般采血时间以早晨空腹为宜，且禁食相关药物3天后，如：甲状腺功能，胰岛素和C-肽，铁蛋白等。长期监测用药治疗者，应尽量固定每次抽血时间，而为了方便病人所采取的“随来随抽”的做法因其种种原因并不可取［1］。
1.2 采血体位 一般采用平卧或坐位。
1.3 采集标本注意事项 血标本要注意及时分离血清，影响结果的标本报告均须注明。如：溶血标本。由于溶血可使大量的血红蛋白释放，蛋白质浓度升高而使NSB升高，从而影响结果，同时，红细胞内所含有的特异酶释放后对待测物质也有破坏作用；有些物质如铁蛋白等，红细胞内、外浓度是有差异的，溶血后，也会使该类物质结果受影响。又如：脂血标本。由于脂蛋白有碍抗原、抗体结合反应，同时影响沉淀、黏附管底不牢固而使结果偏高。体液标本应注意防腐，尿液标本最好用新鲜尿。
1.4 标本的保存 普通项目的血清标本（如C-肽）需4℃～8℃冷藏保存，特殊项目的血清标本需冷冻保存，复溶后必须充分混匀后再加样，以免上稀下浓，影响结果。
1.5 其他 注意性别、年龄、饮食等生理状态对结果的影响。
总之，要合理采集，妥善处理，适宜保存标本，这是常被忽视却又极其重要的分析前质量保证的重要环节。
2 试剂盒的合理使用
根据放免的测量方法，试剂盒主要分为液相法和固相法两大类，包括标准品、质控品、标记物、抗血清、分离剂及温育液等组分。（1）试剂盒必须在有效期内使用，不同批号的试剂不得混用，且每次检测时，应根据标本用量将两瓶或以上的碘标记品或抗体或分离剂混合后再加样，以保证同批实验所加试剂的一致性。（2）试剂盒从冰箱取出后，应平衡至室温后使用，加样前必须彻底颠倒混匀所有试剂，特别是分离剂，否则影响结果。（3）所有冻干品复溶10～15min后方可使用，并按说明书冷藏或冷冻保存，以免失效。（4）在溶解试剂和加样时，应使用固定移液器和一次性吸量用具，防止试剂间的交叉污染。
3 测量仪的合理使用
（1）固定打印机和γ-放免计数仪的开关顺序。（2）γ-放免计数仪应经常维护和保养，保证其高效稳定，测量时试管上部的内外壁应干燥，以防探头污染。（3）可依据仪器性能，适当将测量时间缩短30s。两者间误差为允许范围。（4）仪器自动打印剂量反应曲线：X轴为浓度，Y轴为B/B（IRMA为CPM）。如遇曲线有明显漂移时，应重做实验，必要时及时与仪器工程师联系。
4 操作中的注意事项
（1）操作人员必须严格按照操作规程进行操作，不能随意颠倒标本、碘标记物和抗体的加入顺序，如液相平衡法为：标本+碘标记物+抗体混匀 温育+分离剂混匀离心，而非平衡法为：标本+抗体混匀 温育+碘标记物混匀 温育+分离剂混匀离心。（2）选择高质量的加样器且加样倾斜角度一致，并根据需要选择正向或反向加样，定期校准加样器［2］。（3）注意温育温度（37℃+1℃），并使所有实验的每支反应管受热均匀。（4）DPR分离剂用前必须彻底混匀，离心速度3600rpm（相对离心力2300g左右），离心时间20min，离心机温度控制在15℃以保证反应生成的沉淀物不易解离，并及时分离上清液。
5 实验后的结果分析
（1）所测样品的CPM为负值或接近本底时应复查，复查时要做双管平行试验。（2）所有结果均在所用标准品量的范围内有效，超范围结果，应对其标本用零血清或专用稀释液稀释后再做。（3）因放免法为放射性物质与免疫学结合的方法，所以，对标本浓度过高而产生的“带前”或“带后”反应（钩状效应）应引起重视，以免结果误报。（4）对所有可疑结果或与临床体征不符结果或与其他指标相矛盾结果均应与医生及时联系。
总之，放免实验室的质量控制工作与其他实验室一样，是要建立在室内质量控制的基础之上并应实施一系列措施的工作。放免室所采用的试剂均有较大的变异性，另外放射性同位素标记物（125I）的半衰期短，每天大约有1%的衰变，这使得放免室的质控工作显得尤其重要。因此，一定要树立全面的质量控制意识，杜绝过失误差，校正系统误差，减少随机误差，这是做好放免室工作的重要保障。
【参考文献】
1 孙京凤，白艳萍，和桂云.放免实验室质量控制的探讨.中华临床医学研究杂志,2005,11（2）:274.
2 毛朝明,李龙.RIA及IRMA的质量保证.放射免疫学杂志,2002,15（6）:361-363.
作者单位： 102401 北京,北京房山区良乡医院检验科放免室
（编辑：丁 薇）