CAP过敏原检测系统在门诊哮喘患者中的临床应用

【摘要】  目的 探讨CAP过敏原检测系统在门诊哮喘患者中的应用。方法 对64例门诊哮喘患者和84例支气管炎患者（无过敏性）进行吸入性变应原过筛试验、血清尘螨特异性IgE检测。结果 哮喘组吸入性变应原过筛试验阳性率56.2%，支气管炎组吸入性变应原过筛试验阳性率14.3%。两组比较差异有显著统计学意义（χ2=12.2,P＜001）。哮喘组血清尘螨特异性IgE阳性率50%。支气管炎组血清尘螨特异性IgE阳性率4%。两组比较差异亦有显著统计学意义（χ2=17.46,P＜001）。吸入性变应原过筛试验、血清尘螨特异性IgE检测的敏感性分别为56.2%和50%；特异性分别为38%和75%;阳性符合率分别为45.9%和43.2%;假阳性率分别为12%和4%。两组检测方法一致率为91.9%。经一致性χ2检验，有较好的一致性（χ2=72.34，P＜001）。结论 吸入性变应原过筛试验可用于哮喘的筛查；与吸入性变应原过筛试验相比，血清尘螨特异性IgE特异性高，假阳性较低，吸入性变应原过筛试验阳性者应行尘螨特异性IgE检测。尘螨是哮喘的常见过敏原。对于门诊哮喘患者，CAP检测是一种可用于筛查和寻找过敏原的重要体外检测手段

【关键词】  哮喘 支气管激发试验 免疫球蛋白E

    哮喘是一种气道慢性炎症性变态反应性疾病，IgE介导的变态反应是过敏性哮喘的重要发病机制，吸入性变应原对气道的长期反复刺激是引起气道慢性炎症反应的主要原因［1］。因此，哮喘变应原检测对其防治具有重要意义。检测过敏原的体内试验有引起严重不良反应的可能，而且干扰因素较多，而体外过敏原检测系统须用进口试剂，价格较贵。为了较好的降低成本，我国变态反应学专家结合国情建立了以下过敏原诊断流程：（1）如果患者既往有严重的过敏反应史。可以直接采血进行体外试验以策安全；（2）如果患者既往无严重的过敏反应史，具有进行皮肤试验的条件，可先行皮试，对阳性者有选择性的检测特异性IgE;（3）充分利用CAP系统的体外过筛试验优势，先做吸入物或食物过筛试验，如呈阴性，则无需继续进行检查；（4）在临床资料、体内试验、体外试验一致的情况下再做诊断。CAP过敏原检测系统检测过敏原特异性、IgE抗体的准确性和预测值都很高。因而对其结果具有较高的实用诊断价值。可作为过敏原体外实验诊断的一种主要参考方法。CAP过敏原检测系统在变应性哮喘的应用已有报道，笔 者于2006年10月~2007年10月对门诊64例哮喘患者和84例支气管炎患者进行CAP检测，以探讨CAP过敏原检测系统在哮喘中的应用价值。

    1  对象与方法

    11  研究对象  选择临床符合哮喘诊断标准的患者64例和支气管炎84例，哮喘中男47例，女17例。年龄4岁~62岁，平均38岁；支气管炎（无过敏史）中男45例，女39岁，年龄6岁~84岁，平均36岁。两组年龄差异无统计学意义（P＞005）。

    12  方法和材料

    121  方法  空腹采静脉血约2 ml并分离血清，将血清样本、参照血清等分别加入已包被有变应原的反应杯中，经孵育、洗涤后加入酶标记人IgE抗体、再孵育即形成变应原-特异性IgE酶标记抗体复合物，再加荧光底物发色。

    122  仪器  Phadiatop CAP System FELA酶系统荧光检测仪，包括master、CAP抗体、自动冲洗仪、荧光检测器、阅读板及CAP移动器。

    123  试剂  均由瑞典Phadiatop公司提供。

    124  结果判断  （1）大于参考血清荧光强度判断（作为cut-off值）Phadiatop阳性，小于则阴性［2］；（2）sIgE检测结果按照WHO制定的检测sIgE的75/502标准进行定量，其浓度进行0~Ⅵ分级，按说明书，0级为阴性，Ⅰ~Ⅵ为阳性。sIgE（KU/L）分级：0级0.35，Ⅰ级0.35~0.7，Ⅱ级0.7~3.5，Ⅲ级3.5~17.5，Ⅳ级50~100，Ⅴ级100。0级~Ⅵ级代表其浓度分别为：未检出、低水平、中等、较高、明显高、甚高、极高。

    13  统计学方法  计量资料结果用均数±标准差（±s）表示。记数资料比较用卡方检验。方法评价：一致性检验采用卡方检验。差异性检验采用MeNemar检验。

    2  结果

    21  两组患者检测阳性率比较  见表1。表1  哮喘组和支气管炎组Phadiatop及尘螨sIgE检测结果从表1可以看出，哮喘患者组和支气管炎患者组相比，两种方法在哮喘患者组检测阳性率高于支气管炎组，差异有显著意义。哮喘患者组，Phadiatop检测阳性为36例，尘螨sIgE检测阳性为32例。其中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ和Ⅵ级分别为2例，4例，5例，6例，7例，8例；支气管炎组：Phadiatop检测阳性为12例，尘螨sIgE检测阳性为4例，均为Ⅰ级。

    22  两种检测方法的比较  两种检测的特异性高于敏感性，假阳性率低于假阴性率（表2）。表2  两组检测方法的诊断评价

    23  两种检测的一致性  Phadiatop与sIgE两种检测方法的一致率为91.9%（136/148）（表3）。经一致性检验，（χ2＝72.34，P＜001）；差异性检验，Phadiatop阳性与sIgE阴性的情况多于Phadiatop阴性与sIgE阳性的情况，差异有显著统计学意义（χm2=34.64,P＜001）。表3  148例两种检查方法结果对照

    3  讨论

　　近年来世界多数国家的哮喘病发病率及死亡率有上升趋势，在我国发病率有1%~4%，目前国内外的研究病因还不十分明确，也无特效治疗方法。完整的过敏反应诊断应包括三部分，即详细的病史、体内试验和体外试验。体内试验开展从上个世纪，至今已有上百年的历史，由于结果受到患者皮肤条件、用药史及操作手法等影响，且有可能引起严重的不良反应，甚至有致死的报道，故应用受到限制。国外从上世纪60年代起开始研发过敏原体外实验诊断技术，用于检测过敏原特意性IgE抗体，其中具有代表性的方法是CAP过敏原检测系统［3］。对门诊哮喘患者进行吸入性变应原过筛试验、血清尘螨特异性IgE检测，有助于哮喘的防治。支气管哮喘是一种常见的过敏性疾病，大多与接触的周围环境的过敏原有关，疾病反复发作、加重，严重影响患者的生活质量，甚至危及生命，过敏原如屋尘、尘螨、霉菌、花粉、昆虫排泄物等，广泛存在于人们的生活环境中，要预防哮喘的发生、发展，查明过敏原，避免接触过敏源或进行特异性免疫治疗［4］。CAP过敏原检测系统中，Phadiatop的固体载体CAP内包被有95%的空气中常见的过敏原，Phadiatop采用荧光酶标分析，具有较高的灵敏度［5］。本组结果显示：两种检测阳性率中高危哮喘组显著高于支气管炎组，高危哮喘组36例Phadiatop阳性，尘螨sIgE检测阳性为32例，尘螨sIgE浓度居多，说明尘螨是最常见的过敏原。本研究结果还表明，Phadiatop检测和尘螨sIgE检测的敏感性分别为56.2%和50%，与国内文献报道相比，敏感性较低，特异性相似。从表3可见，两组检测方法具有较好的一致性，对于Phadiatop阳性患者应作sIgE检测。以上结果表明，Phadiatop试验可作为高危哮喘的筛查，Phadiatop检测和尘螨sIgE检测一致性高，复合率近似，与Phadiatop相比，尘螨sIgE检测特异性高，假阳性低，CAP过敏原检测是一种可以用于筛查和寻找变应原的重要体外检测手段。

【参考文献】
  1 叶世泰.变态反应学.北京：科学出版社，1998，117-118.

2 荣光声.Phadiatop在变态反应病诊断中的应用.中华微生物和免疫杂志,1996，19（增刊）：20.

3 殷凯声.哮喘病的治疗.南京:南京大学出版社,1995，5-10，449.

4 钟寒荣，于声华.CAP过敏原检测系统在高危哮喘儿中的应用.中华儿科杂志,2002，40（10）：605-607.

5 Cots P，Pena JM，Botey J，et al.Detemination of total and specific IgE using UNICAP100：comparative study with the CAP system.Allergol Immunopathol,1998,26（1）:223-227.

作者单位：528318 广东佛山，佛山市顺德区龙江医院