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【摘要】 目的 对新生儿溶血病“三项试验”检查、抗体放散试验阳性的结果中存在的交叉反应性抗体(抗C)与新生儿溶血病(HDN)的关系作初步研究。方法 对母婴血型不合、出生7天内患高胆红素血症的新生儿静脉血进行HDN血型血清学检查，对抗体放散试验结果阳性的79例再进行抗C的检查。结果 在102例母/子血型O/A组合中，抗体放散试验阳性39例，抗C存在13例;在99例母/子血型O/B组合中，放散试验阳性40例，抗C存在10例;另外，存在抗C与不存在抗C的患儿红细胞免疫性破坏的程度即患儿总胆红素水平几乎一致。结论 在抗体放散试验阳性结果中，交叉反应性抗体并不一定存在即发生新生儿溶血病的患儿红细胞上并不一定存在抗C;但患儿红细胞上有抗C的存在即可诊断为新生儿溶血病。
【关键词】 交叉反应性抗体;抗体放散试验;新生儿溶血病
O型人血清中除有抗A和抗B外，还有一种不可分离的交叉反应性抗体(简称抗C;抗A、B;抗A+B等)，它针对的特异性是A和B抗原所共有的，它不等于把B血清(抗A)和A血清(抗B)的混合，因而它能凝集A型和B型红细胞，有关O型人血清和脐血中IgG抗A、B的效价已有报道[1]，但新生儿溶血病检查中抗C与抗体放散试验阳性的关系少有报道。为了探讨新生儿溶血病(抗体放散试验阳性)与抗C的相关性，自2009年8月以来，笔者对母/子血型O/A(B)组合的201例患儿红细胞做了抗体放散试验和抗C的检测，现报告如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源
201例标本来自本院新儿科出生7天内，母/子血型O/A(B)组合，患有高胆红素血症且临床诊断疑似HDN的住院患儿，其中母/子血型O/A组合102例，O/B组合99例。
1.2 材料
0.8%A、B、O标准红细胞由市中心血站提供的三人以上新鲜红细胞，经生理盐水三次洗涤配制而成，微柱凝胶管、离心机由美国DiaMed公司提供。
1.3 方法
抗体放散试验：将患儿红细胞用生理盐水洗涤三次后再56℃放散8min，56℃保温离心得放散液，将放散液各50μl加入三孔微柱凝胶管中，分别加入25μl A、B、O标准红细胞，37℃孵育15min，离心观察结果。如患儿为A或B型，单放散出抗A或抗B，则抗C阴性，如同时放散出抗A、抗B抗体，则抗C阳性。
1.4 HDN诊断标准
[2] 母子血型不合;抗体放散试验阳性或直接抗人球蛋白试验阳性;发生高胆红素血症。
1.5 新生儿高胆红素血症诊断标准
[2] 满足以下其中一条即可：(1) 24h>102.6μmol/L;(2) 48h>154μmol/L;(3) 3天以上>220.6μmol/L;以间接胆红素为主。
1.6 统计学分析
采用χ2检验
2 结果
2.1 抗体放散试验结果比较
在102例母/子血型O/A组合中抗体放散试验结果阳性有39例，而39例中存在抗C 13例，占33. 33%;在99例母/子血型O/B组合中抗体放散试验结果阳性有40例。其中抗C阳性10例，占25%;经过统计学分析，O/A组合与O/B组合抗体放散试验阳性结果差异无显著性(χ2=0.04，P>0.05);抗C阳性率差异也无显著性，(χ2=2.76，P>0.05)。在201例患儿中，抗体放散试验阳性79例，占39%。而抗C阳性23例，占11.5%，约为放散试验阳性的1/3，即被抗C致敏的患儿显著小于不被抗C致敏的患儿。
2.2 胆红素水平比较
对56例抗体放散试验阳性但抗C阴性、23例抗体放散试验阳性而抗C阳性的两组患儿的胆红素检查，它们的胆红素水平之间差异无显著性。
3 讨论
新生儿溶血病是发生在胎儿和早期新生儿的一种免疫性溶血性疾病，该病由母子血型不合引起，是新生儿发生高胆红素血症的主要原因。临床上以ABO血型系统的HDN多见，在HDN血型血清学检测中，抗体放散试验是判断新生儿红细胞是否被通过胎盘来自母体的IgG抗A(B)所致敏的最灵敏、准确的方法。一般认为，被IgG抗A(B)致敏的红细胞的免疫性破坏能否引起新生儿发生高胆红素血症，主要与致敏在新生儿红细胞上的IgG抗A(B)亚类[3]、吞噬细胞的粘附能力、溶胞素的含量以及新生儿肝脏功能等诸多因素有关。有文献报道O型人血清中每例均存在交叉反应性抗体，只是强度并不相同[4]。但存在母体血清中的抗C是否均会通过胎盘并致敏在胎儿红细胞上导致溶血。这方面从未见过报道，抗体放散试验阳性提示患儿红细胞已被来自母体血液中的IgG抗体致敏，抗C的阳性提示抗C与IgG抗A(B) 一样可通过胎盘进入胎儿血液中并同样可致敏患儿红细胞引起胎儿溶血。由于抗C阳性率在抗体放散试验中存在的比例很小，本文提示虽然母体中抗C的存在与HDN的发生没有必然的关系，但患儿红细胞上抗C的存在必然可诊断为HDN，只不过发生HDN的并不都是一定有抗C的存在，我们同时也发现被抗C致敏的患儿红细胞与不被抗C致敏的红细胞免疫性破坏程度无显著性区别。新生儿HDN发生率7.14%，本文占24. 9%[5]，是因为本试验选用的病例皆是已发生高胆红素血症的患儿。本试验也说明HDN的发生与血型O/A (B)组合无关。
【参考文献】
1 吴远军，朱学海.O型孕妇IgG抗A、B对新生儿红细胞致敏作用的研究.中国输血杂志，2009，22 (7)：559-561.
2 叶应妩，王毓三.全国临床检验操作规程，第2版.南京：东南大学出版社，1997: 110-113.
3 刘孟黎，张艳，刘晟，等.新生儿溶血病患儿母亲血清中IgG亚类水平的临床意义.细脆与分子免疫学杂志，2006，(4)：498-499.
4 陈忠，杨凤英.O型人血清中交叉反应性抗体的初步研究.临床检验杂志，1997,15 (4): 213-216.
5 金汗珍，黄德珉，官希吉.实用新生儿学，第2版.北京：人民卫生出版社，2000: 216-217.