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关键词 排毒养颜胶囊 临床前毒理学评估
Preclinical toxicological evaluation of health and
beauty innerpure capsules
Zhang Ling，Lu Ying，Yang Rong，et al.
Yunnan Pharmacological Laboratories of Natural Products，Kunming650031.
【Abstract】 Objective Oral toxicity of Health and Beauty Innerpure Capsules（HBIC）was evaluated in maxiˉmum tolerated doses（MTD）and chronic（18weeks）studies in Sprague-Dawley rats from both sexes.Methods The main aim is to identify the toxicity target organ/s and to estimate the safety margins of a Health andBeauty InnerˉPure Capsules in laboratory animals.Results The results showed that the data of MTD of HBIC in mice was19.6g/kg body and in chronic toxicity study HBIC promoted and softened the defecation of rats;the body weight of rats inˉcreased slowly（P<0.01）;there was no affection induced by HBIC in the hematoloty，the biochemistry in serum and the pathology examination.Conclusion It was concluded that no adverse effect and fatal toxicity were observed after oral administration of MTD in mice and that HBIC dose of1g/kg body was recommended as a safe one.
Key words health and beauty innerpure capsules preclinical toxicological evaluation
排毒养颜胶囊作为通便、排毒、养颜的中成药已被批准为国药准字药品，其为西洋参、白术、大黄、小红参、青阳参、肉苁蓉、枳实、荷叶、芒硝等9味中药组成的复方制剂，其中大黄为主药之一。大黄基原为蓼科植物掌叶大黄（Rheum Palamatum L.）、唐古特大黄（Rheum tanguticum maxim，ex Reg.）或药用大黄（Rheum officinale Baill.）的根茎，其主要药理作用除泻下作用外，近代研究还发现其具有抗菌、抗肿瘤等作用。大黄的主要成份是几种葡萄糖苷和苷元，泻下作用较强的苷元主要是蒽醌衍生物，包括大黄酚、大黄素、大黄酸和大黄甲醚等 ［1～3］ 。近年来，随着现代研究的进展，大黄的众多生物活性不断被发现，但其毒副作用也引起关注，国内外有研究报道，如大鼠长期服用大黄素可引起体重下降，肾体比值增大，肾小管色素沉积;长期服用蒽醌类致泻剂可引起结肠膜黑病变等。排毒养颜胶囊作为大黄复方制剂，长期服用是否也会产生类似的毒副反应?为确保临床用药的安全性，本文对其进行了毒理学安全性的研究。
1 材料
1.1 供试药品 排毒养颜胶囊（Heath and Beaty InnerPure Capsules）为黄棕色至棕褐色粉末，0.4g/粒（折合生药1.09g）。临床用量为2～12粒/日。由云南盘龙云海药业有限公司提供，批号为B011077。
1.2 动物 健康未交配的ICR小鼠20只，雌雄各半，体重18～22g。由本室动物室提供，合格证号:滇实动证2001034。健康未交配6周龄SD大鼠298只（雌149只，雄149只），雌鼠（111.28±12.28）g，雄鼠（120.52±13.81）g，由上海西普尔-必凯实验动物有限公司提供，合格证号:沪动合证字152号。实验前在动物观察室饲养观察1周。室内温度（20±6）℃，室内相对湿度50%～70%，自由饮水，自然光照。
1.3 主要仪器及试剂来源
1.3.1 主要仪器 蓝宝石TMS-1024全自动生化分析仪（JAPAN）、Abbott公司（USA）的CEU-DYN-1600型血球分析仪、SHIMADZU公司（JAPAN）的LIBROR AEG-220电子分析天平、SHIMADZU公司（JAPAN）的LIBROR EB-3200D电子分析天平、OLYMPUS公司（JAPAN）的BH-2系统生物显微镜、LEICA RM2145轮转式石蜡切片机（德国）、真彩色病理显微图像分析系统（北京天地电子科技公司）。
1.3.2 试剂来源 上海长征公司，北京中生公司。
2 实验方法 ［4～8］
2.1 急性毒性试验（最大给药量测定，MTD） 18～22g ICR小鼠，雌雄各半，按19.6g·40ml -1 ·kg -1 灌胃给药，观察7天。
2.2 长期毒性试验 SD大鼠经适应性饲养1周后，进入正式试验。将298只（雌雄各半）动物雌雄分开，按体重随机分为4组，低、中、高剂量组分别为1、2、4g/kg（折合生药2.73、5.45、10.9g/kg）体重，对照组为纯净水。除高剂量按1.2ml/100g灌胃给药外，其余各组按1.0ml/100g灌胃给药。每周灌胃给药6天，连续灌胃26周，停药恢复7周。每周称量动物体重及进食量一次，根据体重变化调整给药容量。于给药9、18、26周分别随机抽取约1/4动物进行检查，余1/4停药7周作为恢复期观察。各期均由股动脉放血处死动物，采集血样标本进行血液学及血清生化指标检测;解剖动物肉眼观察各脏器有无病变，称量动物心、肝、脾、肺、肾、脑、脑垂体、肾上腺、胸腺、前列腺、子宫及卵巢、睾丸重量并计算脏器系数，并取胃、肠（十二脂肠、结肠、回肠）、甲状腺、附睾、胸腺、淋巴结、眼球、胰腺及膀胱用10%福尔马林液固定，对照组和高剂量组动物进行病理切片，光镜下作24个项目检查，并对胃肠进行AB、AB-PAS特殊染色观察，如发现异常再对低剂量组及中剂量组进行切片观察。
2.3 统计学方法 用SPSS统计软件对试验数据进行方差分析，方差不齐时用秩和检验进行统计学分析处理。
3 结果
3.1 急性毒性试验 20只小鼠全部存活，精神良好，活动正常，其MTD为19.6g/kg体重。
3.2 长期毒性试验
3.2.1 动物一般状况 试验期间，给药组动物出现间歇性稀便，尤以高剂量组明显，同时高剂量组雄性动物体重增长明显低于其余各组，差异有显著性（P<0.05，P<0.01）。进食量给药组高于对照组（P<0.05，P<0.01），但停药恢复期各组间比较差异并无显著性（P>0.05）。（见图1～4）3.2.2 血液学检测与结果 由表1～4可见，给药中期Hb和Ret、给药末期RBC和PLT，高、中剂量组高于对照组，有统计学意义（P<0.05，P<0.01）;恢复期各剂量组之间差异无显著性（P>0.05）。
3.2.3 血清生化学检测与结果 由表5～8可见，给药中期ALT、BUN、ALB，给药末期BUN和TBIL组间有统计学意义
图1 排毒养颜胶囊雌性大鼠体重生长曲线
图2 排毒养颜胶囊雄性大鼠生长曲线
图3 排毒养颜胶囊雌性大鼠耗食量
图4 排毒养颜胶囊雄性大鼠耗食量（P<0.05，P<0.01）;恢复期各剂量组之间差异无显著性（P>0.05）。
3.2.4 系统尸体解剖和病理组织学检查
3.2.4.1 动物系统尸体解剖观察 动物尸体解剖各主要脏器、器官表面光滑，色泽正常，未见充血、粘连等异常改变。
3.2.4.2 脏器重量及脏器系数 由表9～16可见，给药中期、末期和恢复期观察，给药组动物心、肺、肝、肾、垂体、肾上腺等脏器系数均大于对照组，而且差异有显著性（P<0.05，P<0.01）;主要脏器如心、肝、脾、肾绝对重量虽然组间差异有显著性（P<0.05，P<0.01），但无剂量-反应关系。
3.2.4.3 病理组织学检测 对照组及高剂量组动物脑、视神经、心、肝、脾、肺、肾、肾上腺、胸腺、胃、肠（十二脂肠、空肠、回肠、结肠）、甲状腺、睾丸、附睾、前列腺、子宫、卵巢、脑垂体、胸腺、淋巴结、胰腺及膀胱共22个脏器进行病理组织学检查，HE染色镜下未发现由药物引起的病理组织学改变。同时对胃肠组织增加AB染色，可见各肠段腺体分布正常，粘膜基本完整。AB-PAS染色可见肠段层次清楚，血管及肠腺体基底膜完整，腺体结构及分布正常。