点击显示 收起
【摘要】 目的 观察盐酸洛拉曲克（THY-110）对小鼠移植肝癌(H-22)、艾氏腹水癌(EAC)和肉瘤(S-180)的抑制作用。方法 实验采用昆明小鼠，体重18～22g，雌雄各半。设80、120和180mg/kg体重3个给药剂量组，一个阳性对照组和一个溶剂对照组。小鼠经左前肢腋下接种0.2ml（1×107/ml）肿瘤细胞悬液，接种后连续腹腔注射给药10天。停药后剥离出肿瘤并称瘤重，计算肿瘤抑制率，试验重复3次。结果 盐酸洛拉曲克对肝癌、艾氏腹水癌及肉瘤的抑瘤率高、中和低剂量组分别为：(70.23±3.1)%，(66.3±6.2)%，(46.8±3.7)%；(69.1±1.4)%，(59.7±6.6)%，(43.8±5.9)%；(73.8±1.7)%，(64.1±4.2)%，(42.2±4.7)%。结论 盐酸洛拉曲克具有显著的抑制肿瘤作用。
【关键词】 盐酸洛拉曲克（THY-110）；移植；肿瘤抑制率
Study on effect of tumor control by abdominal cavity injection of THY-110 for mice
LU Hui-min，DU Wei-xia，FU Ying-hua，et al.
Institute of Radiological Protection and Nuclear Safety，China CDC，Beijing 100088，China
【Abstract】 Objective To investigate the treatment effect of liver cancer H-22，EAC cancer and S-180 by abdominal injection of THY-110 in mice.Methods Mice were divided to five groups including THY-110 doses groups of 80，120 and 180mg/kg body weight；solvent group and positive control group. 0.2ml（1×107/ml） tumor cell solution were inoculated to mice at fore limb subaxilla. After inoculation，mice were continuously injected of THY-110 for 10 days，tumor tissues were peeled off and weighted，the lessening rate of tumors were calculated basis on tumor weight.Results The lessening rate of tumors in present study were show that average values were (70.23±3.1)%，(66.3±6.2)% and (46.8±3.7)% for liver cancer；were (69.1±1.4)%，(59.7±6.6)% and (43.8±5.9)% for EAC cancer；were (73.8±1.7)%，(64.1±4.2)% and (42.2±4.7)% for S-180 respectively.Conclusion THY-110 has a distinct effect for lessening tumors.
【Key words】 THY-110；tumor cell；transplant；tumor control rate
盐酸洛拉曲克(THY-110)已被证明是一种新型的、最有广泛前景的胸苷酸合成酶抑制剂。据文献报道其对多种肿瘤均具有很好的治疗效果［1～5］，如实体瘤、肝癌、结肠癌、肺癌、头颈癌、前列腺癌等。我们参照国家卫生部药政局新药（西药）临床前指导原则汇编规定的研究与评价方法［６］及抗肿瘤药物研究的相关技术，以小鼠为动物实验模型，对国产原料药盐酸洛拉曲克对小鼠体内移植肿瘤的抑制效果进行了研究。结果显示，盐酸洛拉曲克对小鼠移植肝癌、艾氏腹水癌和肉瘤均具有明显的抑制作用，高剂量给药组的肿瘤抑制率三种肿瘤均可达70%以上，剂量效应关系明显，重复性好，与阳性对照药氟尿嘧啶的作用效果相近。盐酸洛拉曲克与其他胸苷酸合成酶类抑制剂相比，还具有毒性反应恢复快，耐受疗程多等特点。
1 材料与方法
1.1 材料 （1）动物：昆明小鼠，由中国医学科学院动物中心提供，体重(18±2)g，雌雄各半。（2）肿瘤细胞株：H-22和EAC由北京市肿瘤研究所提供的荷瘤小鼠，S-180由中国药品生物制品检定所提供的荷瘤小鼠。（3）药物：盐酸洛拉曲克原料药由广州第一军医大学药物研究所提供，批号 20000825，纯度为99.36%，4℃冰箱存放。氟尿嘧啶注射液阳性对照组用药，为目前临床上使用药，由上海旭东海普药业有限公司生产，批号为990805。5%葡萄糖溶液由第二炮兵总医院制剂室生产。
1.2 方法
1.2.1 瘤细胞悬液制备及接种 无菌条件下取接种后肿瘤生长良好的传代鼠腹腔肿瘤细胞悬液于玻璃试管中，冰浴下用生理盐水稀释至细胞浓度为1×106/ml或1×107/ml，每只小鼠左前肢腋下皮下接种0.2ml瘤细胞悬液。
1.2.2 动物分组 动物接种肿瘤细胞后24h称体重，随机分组，每组10～13只，雌雄各半，每株瘤株第一次试验设6组，后2次重复试验分5组：分组如下：阴性对照组（5%葡萄糖溶液）、阳性对照组（氟尿嘧啶）、80、120和160mg/kg体重给药组。
1.2.3 药物配制 药物溶剂为5%葡萄糖溶液，每天新鲜配置。根据动物体重调整给药量。
1.2.4 给药方法 小鼠接种瘤细胞后24h，腹腔注射给药（ip），给药量为0.2ml/10g 体重，每天1次，连续给药10天（根据肿瘤生长情况而定）。
1.2.5 观察方法 动物给药后每天观察一般状况及肿瘤生长情况，肿瘤长至500mg以上，不出现溃烂前停药，停药后24h称体重，剖取瘤块。瘤块取出后剔除肌肉和脂肪以及表面水分，称瘤重，计算抑瘤率，给药组结果均与溶剂对照组相比较，进行统计学检验分析（t检验）。每个瘤株在相同条件下重复试验３次，肿瘤抑制率按下式计算。
抑制率%=对照组瘤重-治疗组瘤重 对照组瘤重×100
2 结果
盐酸洛拉曲克对小鼠体内移植的三种肿瘤瘤株各重复3次的实验结果分别在下面的表中给出。
2.1 盐酸洛拉曲克对小鼠移植H-22抑制作用的实验结果 见表1～3。
表1 盐酸洛拉曲克对小鼠移植H-22抑制作用（1）（略）
表2 盐酸洛拉曲克对小鼠移植H-22抑制作用（2）（略）
表3 盐酸洛拉曲克对小鼠移植H-22抑制作用（3）（略）
盐酸洛拉曲克在剂量为160mg/kg时对H-22的抑制率，3次实验结果分别为67.1%、70.2%和73.3%，平均值为(70.23±3.1)%；剂量为120mg/kg时，分别为64.0%、61.6%和73.3%，平均值为(66.3±6.2)%；剂量为80mg/kg时，分别为50.9%、45.7%和43.7%，平均值为(46.8±3.7)%。
2.2 盐酸洛拉曲克对小鼠移植腹水癌（EAC）的抑制率3次实验结果 见表4～6。
表4 盐酸洛拉曲克对小鼠移植腹水癌（EAC）抑制作用（1）（略）
表5 盐酸洛拉曲克对小鼠移植腹水癌（EAC）抑制作用（2）（略）
表6 盐酸洛拉曲克对小鼠移植腹水癌（EAC）抑制作用（3）（略）
盐酸洛拉曲克在剂量为160mg/kg时对EAC抑制率，3次实验结果分别为68.5%、70.7%和68.0%，平均值为(69.1±1.4)%；剂量为120mg/kg时，分别为55.0%、56.8%和67.3%，平均值为(59.7±6.6)%；剂量为80mg/kg时，分别为47.0%、37.1%和47.5%，平均值为(43.8±5.9)%。
2.3 盐酸洛拉曲克对小鼠移植肉瘤S-180抑制率3次实验结果 见表7～9。
表7 盐酸洛拉曲克对小鼠移植肉瘤（S-180）抑制作用（1）（略）
表8 盐酸洛拉曲克对小鼠移植肉瘤（S-180）抑制作用（2）（略）
表9 盐酸洛拉曲克对小鼠移植肉瘤（S-180）抑制作用（3）（略）
盐酸洛拉曲克在剂量为160mg/kg时对S-180的抑制率，3组的实验结果分别为75.1%、74.5%和71.9%，平均值为(73.8±1.7)%；剂量为120mg/kg时，分别为61.5%、68.9%和61.9%，平均值为(64.1±4.2)%；剂量为80mg/kg时，分别为47.4%、38.4%和40.7%，平均值为(42.2±4.7)%。
3 讨论
THY-110是一种胸苷酸合成酶抑制剂，药理学作用是通过抑制胸苷酸合成酶的活性，造成体胸腺嘧啶核苷酸的缺乏，而干扰细胞中DNA的合成和阻止其增殖分裂而实现，抑制胸苷酸合成酶的活性，已作为肿瘤治疗中的重要靶点之一。国内虽已有相关胸苷酸合成酶抑制剂类抗肿瘤药物应用于临床，但其主要缺点是副作用大易产生耐药性。因此，研发疗效好、副作用低的新药是临床肿瘤治疗中的迫切需要，THY-110在疗效方面近似于现有的药物，但毒副作用等方面明显占有优势，该药在美国已进入临床后期研究阶段，我国也已进入临床研究。
本实验结果表明，THY-110原料药对小鼠体内移植的三种肿瘤均具有显著的抑制生长，重复性好，剂量效应关系明确。高剂量组的效果最好，但其毒性反应也较其他两组明显，给药后期动物的精神状态和活动均较其他两组差，体重降低也比较明显，中和低剂量组动物毒性反应明显减轻。
我们还对THY-110的最小有效剂量或无效剂量进行了观察，在给药40mg/kg时，三种肿瘤的抑制率分别为24.8%、36.6%、31.1%，提示小鼠的无效剂量或最小有效剂量低于40mg/kg。
【参考文献】
1 Loh KK，Cohn A，Kelly K，et al. Phase Ⅱtrials of ThymitaqTM (AG337) in six solid tumor diseases. Proc Am Socclin Oncol，1996，15：183.
2 Jodrell DI，Bowman A，Rye R，et al. A phase I study of the lipophilic thymidylate synthase inhibitor Thymitaq (nolatrexed dihydrochlorde) given by 10-day oral administration. BR J Cancer，1999，79：915.
3 Hughes AN，Rafi I，Griffin MJ，et al. Phase I studies with the nonclassical antifolate nolatrexed dihydrochloride (AG337，THYMITAQ) administered orally for 5 days. Clin Cancer Res，1999，5(1)：111.
4 Stuart KE，Hajdenberg J，Cohn A，et al. A phase Ⅱ trial of ThymitaqTM (AG337) in patients with hepatocelluiar carcinoma (HCC).Pro Am Soc Clin Oncol，1996，15：202.
5 Clendeninn NJ，Johnston A. Phase Ⅱtrials of ThymitaqTM (AG337) insix solid tumor diseases.Ann Oncol，1996，7(1)：86.
6 中华人民共和国卫生部药政局新药（西药）临床前指导原则汇编（药学 药理学 毒理学），1993，137.
(编辑：守 中)
作者单位：100088 北京，中国疾病预防控制中心辐射防护与核安全医学所