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【摘要】 目的 探讨电热恒温培养箱应用于Ziehl-Neelsen氏染色的操作步骤及临床效果。方法 电热恒温培养箱加热至80℃保持5min固定涂片；在电热恒温培养箱中滴加碱性复红乙醇染液加热到80℃保持10min进行染色。结果 可以克服传统火焰固定涂片的不确定性；可以克服常规染色火焰加热技术的各种缺点,保证了染色结果的准确可靠。结论 电热恒温培养箱应用于染色使操作更简捷,更容易,更好掌握,从而能更好地应用于实际临床检验，是一种方便、实用、有效的染色技术。
【关键词】 抗酸染色；Ziehl-Neelsen氏染色；电热恒温培养箱
Ziehl-Neelsen氏染色在临床检验中主要用于抗酸菌与非抗酸菌的鉴别,由于传统火焰固定涂片的不确定性，碱性复红乙醇染色时加热不易掌握,易沸腾,给实际操作带来许多不便。采用电热恒温培养箱应用于Ziehl-Neelsen氏染色可以克服传统染色的各种缺点，应用于临床检验取得了很好的效果。
1 材料与方法
1.1 电热恒温培养箱 连云港市医疗设备厂型号 DYX-120型电热恒温培养箱。
1.2 标本 各种常规标本。
1.3 方法 (1)电热恒温培养箱加热至80℃保持5min固定涂片；(2)在电热恒温培养箱中滴加碱性复红乙醇染色液盖满膜后加热至80℃保持10min；(3)流水自玻片背面上端轻洗,洗清染色液；(4)自膜上端外缘滴加脱色液,需脱色至膜无可视红色为止；(5)流水自玻片背面上端轻洗,去脱色液；(6)滴加亚甲蓝复染液,染色30s；(7)流水自玻片背面上端轻洗,去复染液。
2 结果
(1)电热恒温培养箱加热至80℃保持5min固定涂片能杀死细菌，改变其通透性，保持细菌的原有形态和结构，使细菌在染色过程中不被水冲掉。(2)在电热恒温培养箱中滴加碱性复红乙醇染色液盖满膜后加热至80℃保持10min进行染色不会出现沸腾、煮干,更不会飞溅。染色制作的涂片,其细菌形态和结构非常清晰,菌体着色与背景对比更鲜明,无脱片、破碎、沉渣等现象。
3 讨论
Ziehl-Neelsen氏染色法在临床检验中主要用于抗酸菌与非抗酸菌的鉴别。抗酸染色的原理目前认为不同抗酸细菌所含分枝菌酸的质和量不同，菌体中所含的脂类成分也不同，所以它们的抗酸染色程度亦有差异［1］。
电热恒温培养箱应用于Ziehl-Neelsen氏染色法的技术原理是利用电热恒温培养箱进行加热达到固定涂片和滴加碱性复红乙醇染色液染色所需的持续恒温和染色时间，使染料与菌体达到充分着色。
传统的火焰固定涂片不能很好地把握固定温度和时间，使固定涂片效果不确定，碱性复红乙醇染色时火焰加热需要特别小心，时刻观察蒸汽，切勿使染液沸腾，而且很易使涂片上的染液煮干或者沸腾，甚至飞溅，造成污染，使染色效果具有不确定性。采用电热恒温培养箱能恒定地保持所需温度和时间，使染料与菌体达到充分着色,从而保证了准确确切的染色效果。通过实际反复操作,证明电热恒温培养箱加热至80℃保持5min固定涂片；滴加碱性复红乙醇染色液在电热恒温培养箱中80℃保持10min左右,可以克服传统火焰固定涂片的不确定性；可以克服传统染色火焰加热技术的各种缺点,保证了染色结果的准确可靠。使操作更简捷,更容易,更好掌握,从而能更好地应用于实际临床检验，是一种方便、实用、有效的染色技术。
【参考文献】
1 唐珊熙,刘锡光.微生物学及微生物学检验.北京:人民卫生出版社,2001,72.
作者单位：330800 江西高安,高安市人民医院检验科
(编辑：海 涛)