点击显示 收起
【摘要】 目的探讨急性脑梗塞（ACI）患者血小板膜糖蛋白与梗死部位及卒中严重程度的关系。方法应用流式细胞仪（FCM）全血检测62例急性脑梗塞患者和35例健康对照组血小板膜活化GPⅡb-Ⅲa复合物（PAC-1）、血小板α颗粒膜蛋白140（CD62P）的阳性百分率。结果（1）脑梗塞组PAC-1、CD62P的阳性百分率均明显高于对照组，两组间差异有显著性（P<0.05）。（2） 血小板膜糖蛋白的表达在不同梗死部位及卒中严重程度患者中比较差异无显著性（P>0.05）。结论急性脑梗塞患者体内存在血小板活化；血小板膜糖蛋白的表达与梗死部位及卒中严重程度无关。
【关键词】 PAC-1 CD62P 脑梗塞
Study of platelet function in acute cerebral infarction(ACI)
WANG Lei, LIU Yi. Department of Neurology , Tianjin Minzu Hospital,Tianjin 300122, China
【Abstract】ObjectiveTo investigate the association of platelet membrane glycoproteins with infarction location and severity.MethodsWe conducted a case-control study of 62 hospital cases with ACI and randomly selected 35cases of healthy control subjects without evident cerebral arterial disease( sex, age suited ). To detect the positive percentage of activated GPⅡb/Ⅲa complex（PAC-1）、GMP-140（CD62P）with flow cytometer (FCM) in all patients.Results（1） Comparing the data with the clinical control: the positive percentage of PAC-1、CD62P were significantly higher in the patients（P<0.05）.（2） There was no difference between the two groups in infarction location and severity on platelet membrane glycoproteins（P>0.05）.ConclusionAcute cerebral infarction depend on platelet activation .The expression of platelet membrane glycoproteins was no correlated with infarction location and severity.
【Key words】PAC-1；CD62P；cerebral infarction
近年来随着缺血性心脑血管病发病机理研究的不断深入，有关血小板与缺血性卒中的关系已成为研究的热点。缺血性卒中的病理基础是血栓形成，血小板的活化、粘附和聚集在病理的血栓形成过程中起着重要作用。关于血小板膜糖蛋白与梗死部位及卒中严重程度关系的报道不一，我们对62例脑梗塞患者进行检测，以期发现它们的关系。
1资料与方法
1.1研究对象急性脑梗塞患者62例，男37例，女25例，年龄45~72岁，平均年龄（60.74±8.52）岁。符合1996年全国脑血管病学术会议修订的各类脑血管病的诊断标准。均经头颅CT或MRI证实诊断成立，病程1~5天。合并高血压患者39例，糖尿病患者14例，心肌缺血患者26例。按梗塞部位不同分为前循环梗死组和后循环梗死组，依据美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评分将NIHSS≥18分为重度卒中组，<18分为轻度卒中组［1］。正常对照组35例，为同期天津地区健康体检中随机选取。男20例，女15例，年龄43~76岁，平均年龄（59.45±8.94）岁。除外心脑血管缺血性卒中、血栓栓塞性疾病，无严重肝肾功能障碍及明显动脉硬化症，无炎症、肿瘤、外伤、血液病、痴呆等。两组年龄、性别相匹配，近2周内均无服用阿司匹林等抗血小板类药物史。
1.2主要试剂和仪器异硫氰酸荧光素标记的抗活化GPⅡb/Ⅲa复合物的单克隆抗体(PAC-1 FITC)。藻红素标记的抗P-选择素单抗 （CD62P PE）。采用FACSort流式细胞仪进行数据获取，以上均为美国Becton-Dickson公司产品。
1.3实验方法PAC-1、CD62P表达的测定采用流式细胞术三色荧光分析方法［2］。
1.4统计学处理采用SPSS11.5统计软件包进行统计学分析。计量资料以均数±标准差表示；两组间均数比较采用非配对t检验。P< 0.05为统计显著性界值。
2结果
2.1病例组与对照组血小板膜糖蛋白的比较病例组与对照组比较，病例组血小板膜糖蛋白PAC-1和CD62P均明显高于对照组，差异有显著性。见表1。
2.2脑梗塞患者不同梗死部位及不同卒中严重程度的比较血小板膜糖蛋白的表达在不同梗死部位及卒中严重程度患者中比较无统计学差异。见表2，表3 。表1病例组与对照组血小板膜糖蛋白阳性百分率 及四参数的比较表2脑梗塞患者不同梗死部位的比较表3不同卒中严重程度的比较注：两组比较，P>0.05
3讨论
缺血性脑血管病的发病机制较为复杂,有研究提示血小板活性增高与其发生有密切关系［3，4］。在正常血液循环中,血小板处于静止状态;而当受到生理或病理刺激因子作用时,血小板在vonWille-brand因子（威勒布兰特因子， vWF）作用下粘附于受损血管处暴露的内皮组织。随后,粘附的血小板被内皮下组织或局部形成的凝血酶所活化,发生释放反应和花生四烯酸代谢,由前者分泌释放的二磷酸腺苷（ADP）和后者形成的血栓烷A2(TXA2)都可以引起血小板的聚集。血小板的粘附、聚集和活化反应都是通过其表面膜糖蛋白的功能实现的。GPⅡb-Ⅲa复合物（PAC-1）是血小板表面含量最多的膜糖蛋白，被激活后的血小板就主要依靠GPⅡb-Ⅲa与纤维蛋白原结合,互相桥连成网,才形成牢固的血栓。因此GPⅡb-Ⅲa复合体是血小板表面纤维蛋白原的Ca2+依赖性受体，调节引起血小板聚集的纤维蛋白原依赖性共同通道［5］。而CD62P仅分布于血小板内的α颗粒膜上和血管内皮细胞Weibel-Palade小体内。当血小板活化时, α颗粒膜迅速与质膜融合从而在血小板表面呈现CD62P,这一特征已使CD62P成为血小板活化的标志［6］。我们在本试验中也得到同样结论：急性脑梗塞患者与正常对照组比较PAC-1、CD62P、SZ22、CD61阳性百分率明显增高（P<0.001），证明急性脑梗塞患者体内存在血小板活化。关于血小板活化状态与卒中严重程度的相关性近年来国内外也有报道，Hagberg等［7］报道CD62P变化与病情严重程度有关。轻型脑梗塞患者CD62P的表达无显著升高，中、重型脑梗塞患者CD62P的表达显著升高。提示血小板膜CD62P的表达可作为急性脑梗塞患者病情严重程度的判断指标。Cha等［8］发现血小板膜糖蛋白在缺血性中风急性期持续增高，并与临床恶化程度明显相关。国内郑悦等［9］研究了脑梗塞患者血浆颗粒膜蛋白140动态变化与神经功能缺失水平的关系，得出其浓度变化与梗死灶直径、神经功能缺失水平呈正相关，即血浆颗粒膜蛋白140浓度越大、升高越明显，脑梗塞的面积越大，神经功能缺失程度越严重，提出针对这类患者的抗血小板药物的时间和剂量应与轻症患者不同。我们在本试验中未发现膜糖蛋白与卒中严重程度和梗死部位的关系，可能是病例数过少或统计方法不同所致。还需要进一步扩大样本例数并改进统计方法进行更深入的研究。
【参考文献】
1Mangiafico S, Cellerini M, Nencini P, et al. Intravenous glycoprotein GPIIb/IIIa inhibitor (tirofiban) followed by intra-arterial urokinase and mechanical thrombolysis in stroke. AJNR,2005，26(10):2595-2601.
2Michelson AD, Barnard MR, Krueger LA. Evaluation of platelet function by flow cytometry. Methods,2000,21:259-270.
3Mitsios JV, Stamos G, Rodis FI, et al. Investigation of the role of adjacent aminoacids to the 313-320 sequence of the alphaⅡb beta3. Platelets,2006,17(5):277-282.
4Kozuka K, Kohriyama T, Nomura E, et al.Endothelial markers and adhesion molecules in acute ischemic stroke-sequential change and differences in stroke subtype. Atherosclerosis, 2002, 161(1):161-168.
5Ofosu FA,Nyarko KA. Human platelet thrombin receptors roles in platelet activation. Hematology,2000，14:1185-1198.
6Goto S, Ichikawa N, Lee M, et al. Platelet surface P-slectin molecules increased after exposing platelet to a high shear flow. Int Angiol,2000,19(2):147-151.
7Hagberg IA, Roald HE, Lybern T,et al. Platelet activation in flowing blood passing growing arterial thrombi. Arterioscler Thromb Vasc Biol，1997，17: 1331.
8Cha JK, Jeong MH, Kim EK, et al. Surface expression of P-selection on platelet is related with clinical worsening in acute ischemic stroke. J Korean Med Sci,2002,17(6):811-816.
9郑悦，吴军，尹林.脑梗塞患者神经功能缺失水平与血浆颗粒膜蛋白140的动态变化.中国临床康复.2006，10（10）：116-117.
(编辑：守中)
作者单位：300122 天津，天津市民族医院神经内科