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【摘要】 目的 观察消化性溃疡病（peptic ulcer）患者外周血中IL-17和IL-25水平的变化,探讨IL-17和IL-25在消化性溃疡病中的作用。方法 采用ELISA法测定20例消化性溃疡患者及34例健康体检者血清IL-17和IL-25的含量。结果 消化性溃疡病患者和健康体检者血清IL-17的水平分别为（197.79±25.77）pg/ml和（174.85±27.38）pg/ml，差异无显著性（P>0.05）。血清IL-25的水平分别为（1051.58±185.96）pg/ml和（837.73±107.66）pg/ml，差异有显著性（P<0.01）。消化性溃疡病患者中包括十二指肠球溃疡12例和复合溃疡8例，血清中IL-17的水平分别为（222.19±32.98）pg/ml和（161.17±27.00）pg/ml，十二指肠球溃疡病人血清中IL-17的水平明显高于健康体检组（P<0.01），复合溃疡组的IL-17水平与健康体检组比较差异无显著性（P>0.05）。血清IL-25的水平分别为（1011.65±122.63）pg/ml和（1111.49±151.79）pg/ml, 与健康体检者比较差异均有显著性（P<0.05）。结论 消化性溃疡病人外周血中IL-17和IL-25均可发生有意义的变化，提示该两种细胞因子参与消化性溃疡病的炎症过程；IL-25的水平升高较IL-17更为明显，提示 IL-25水平的变化可能与消化性溃疡病发生发展关系更为密切。
【关键词】 IL-17;IL-25;消化性溃疡
The changes and clinical sinificance of IL-17 and IL-25 levels in serum from patients with peptic ulcer
CHEN Xia，LU Chang-long，LI Cheng，et al.Department of Immunology, China Medical University, Shenyang 110001, China
【Abstract】 Objective To investigate the changes and clinical significance of interleukin 17（IL-17） and IL-25 levels in serum from patients with peptic ulcer.Methods The levels of IL-17 and IL-25 in the serum from 20 patients with peptic ulcer （including 20 patients with duodenal ulcer and 8 with complex ulcer）and 34 health control were detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA）.Results The level of IL-17 was（197.79±25.77）pg/ml in the patients and（174.85±27.38）pg/ml in the control repectively, no significant difference betreen the two groups（P>0.05）. The level of IL-25 in the patients （1051.58±135.96）pg/ml was significant higher than that in the control（837.73±107.66）pg/ml（P<0.01）. The level of IL-17 in 12 patients with duodenal ulcer（222.19±32.98）pg/ml is significantly higher than that in the control（P<0.01）, but no difference between the group of 8 patiets with complex ulcer（161.17±27.00）pg/ml and the control（P>0.05）. The levels of IL-25 in both groups with duodenal（1011.65±122.63）pg/ml and complex（1111.49±151.79）pg/ml ulcer are significantly different from that of the control group（P<0.05）.Conclusion The level of cytokines IL-17 and IL-25 in sera from the patients with peptic ulcer were showed to be significantly increased, indicating that both cytokines should be related to the inflammatory development of peptic ulcer.Particuly, IL-25 might be more important.
【Key words】 IL-17; IL-25; peptic ulcer
消化性溃疡（peptic ulcer）主要是指发生在胃和十二指肠球部的慢性溃疡，约10%～15%的消化性溃疡无症状，是一种世界性分布的严重危害人民身体健康的常见病，估计约有10%人口一生中患过此病［12］。消化性溃疡是各种原因导致胃肠道黏膜受损，激活体内免疫系统，导致各种炎症细胞活化，并向炎症部位聚集，释放多种炎性细胞因子，从而导致胃肠黏膜组织的炎症反应［1］。其中主要是具有炎症介导活性（如IL-1、IL-6、TNF等）和免疫调节活性（如IL-2、IL-4、IL-5等）的细胞因子。近年来，人们对细胞因子进行了广泛的临床和基础研究，要真正弄清各种细胞因子在胃肠黏膜损伤和修复中的作用依然是胃肠黏膜免疫研究者今后的重要课题。IL-17和IL-25是近来新发现的具有促炎症作用的重要细胞因子，二者同属于IL-17家族，分别称为IL-17A和IL-17E。已有的研究证明IL-17和IL-25参与维持消化道内环境的稳定，并与胃肠道黏膜炎症的发生发展有关。本研究观察了临床消化性溃疡病人外周血中IL-17和IL-25水平的变化,以便进一步了解IL-17和IL-25与消化性溃疡病发生的关系。
1 资料与方法
1.1 一般资料 根据临床表现及病理、胃肠镜检查确诊的消化性溃疡病例20例,男8例,女12例,年龄24～76岁,平均年龄（49.95±15.6）岁。十二指肠球溃疡12例，复合溃疡8例。对照组选择健康体检者34例,均为体检健康者, 无胃肠道症状或其他疾病，男16例,女18例,年龄20～77岁,平均年龄（46.55±16.22）岁。两组研究对象在年龄、性别等方面差异无显著性（P>0.05）。
1.2 标本采集 患者血清均为入院第2天（即治疗前或治疗初）清晨空腹肘静脉无菌抽取采集血液样品。4000r/min离心，取血清并于-70℃贮存使用。
1.3 血清IL-17和IL-25的测定 血清IL-17和IL-25的测定采用ELISA方法检测，试剂盒分别购于美国PeproTech公司和BPB公司。检测过程按照试剂盒说明书操作。通过标准曲线计算样品的IL-17和IL-25的含量。
1.4 统计学方法 数据以均数±标准差表示，采用t检验，均用Shortcut to SoftMax Pro 4.3.1 LS统计软件在计算机上完成。
2 结果
2.1 血清IL-17和IL-25的检测结果 消化性溃疡病人血清IL-17水平为（197.79±25.77）pg/ml，健康体检者血清IL-17水平为（174.85±27.38）pg/ml，二者间差异无显著性（P>0.05）。消化性溃疡病人血清IL-25水平为（1051.58±135.96）pg/ml，健康体检者血清IL-25水平为（837.73±107.66）pg/ml，二者差异有显著性（P<0.01）。见表1。表1 消化性溃疡与健康体检者组细胞因子检测结果比较
2.2 十二指肠球溃疡和复合溃疡病血清IL-17和IL-25的检测结果 见表2。表2 十二指肠球溃疡和复合溃疡与健康体检者组细胞因子检测结果比较注:与健康体检者组比较，①P<0.1,②P>0.1,③P<0.05
12例十二指肠球溃疡和8例复合溃疡病人血清中IL-17的水平分别为（222.19±32.98）pg/ml和（161.17±27.00）pg/ml。其中十二指肠球溃疡病人血清中IL-17的水平明显高于健康体检组，P<0.1，复合溃疡组的IL-17水平与健康体检组比较差异无显著性（P>0.1）。十二指肠球溃疡和复合溃疡病人血清中IL-25水平分别为（1011.65±122.63）pg/ml和（1111.49±151.79）pg/ml, 二者与健康体检组比较差异均有显著性（P<0.05）。
3 讨论
消化性溃疡包括十二指肠球溃疡和复合溃疡，可能与感染、遗传、环境、免疫等多种因素有关。多种原因导致胃肠道黏膜受损，激活体内免疫系统，导致各种炎症细胞活化，并向炎症部位聚集，释放多种炎性细胞因子，从而导致胃肠黏膜组织的炎症反应［1］。与胃肠黏膜免疫有关的细胞因子包括介导炎症的因子（如IL-1、IL-6、TNF等）和免疫调节的因子（如IL-2、IL-4、IL-5等）。而消化性溃疡的发病机制中，免疫调节起着相当重要的作用。有资料表明，致炎性细胞因子的升高水平可能与消化道炎症的严重程度有关［2］。
本实验中检测的IL-17和IL-25（即IL-17A和IL-17E），同属于IL-17家族，此家族包括六个配体（IL-17A-F）H和五个受体（IL-17RA-IL-17RE），是典型的促炎症因子。此家族在宿主抵抗感染和自身免疫病时可以促进细胞炎症反应，诱导炎症介质的表达，并与中性粒细胞的增殖、成熟和趋化有关［10］。在消化性溃疡病等黏膜免疫时，IL-17A主要与白细胞募集有关,而IL-17E能诱导TH2细胞因子和嗜酸细胞生产，两者均具有免疫调节作用。
人的IL-17（既IL-17A）主要来源于活化的记忆CD+4T细胞［6］，由155个氨基酸残基编码组成，分子量约为20～30kDa的糖蛋白。近来报道显示除T细胞外，中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、CD8+T细胞可能也是IL-17A的来源［7～9］。IL-17具有很强的致炎性，能促进机体局部产生趋化因子，如IL-8、MCP-1（单核细胞趋化因子-1）、Gro-α（生长调节因子-α），从而有助于单核细胞和中性粒细胞的迅速增多，刺激产生IL-6和PGE-2，增强局部炎症；IL-17A还能刺激炎症因子、趋化因子和造血因子产生，并通过中性粒细胞和趋化因子促进白细胞募集，发挥促炎症反应功能。在DSS诱导的肠炎模型中施予IL-17，发现其可以抑制炎症的严重程度［3］。
IL-25（即IL-17E）主要来源于活化的Th2细胞和肥大细胞，由161个氨基酸残基构成，质量约为17kDa。由于翻译起始点不同，用Western blot分析测的质量为24.7kDa。虽然Lee et al［4］报道的IL-17E和Fort et al［5］报道的IL-25之间N-和C-端有明显不同，但却有95%以上的同源性，因此IL-25最初常被报道为IL-17E。IL-25主要是诱导细胞因子和嗜酸细胞聚集，促进趋化因子产生趋化活性，可以说是通过作用于其他因子来参与炎症反应，具有双重免疫调节作用，既促进炎症反应发生又抑制炎症反应扩散。
本实验的结果显示，消化性溃疡患者血清IL-17的水平虽然增高，但无统计学意义；而血清IL-25的水平明显高于健康体检者组，差异有显著性（P<0.01）。其中十二指肠球溃疡病者（12例）的IL-17水平明显高于健康体检者（P<0.1）;而复合溃疡病者（8例）与健康体检者比较差异无显著性（P>0.1），提示IL-17可能主要在肠道黏膜免疫发挥的作用;血清IL-25的水平与健康体检者比较均差异有显著性（P<0.05）。实验结果提示IL-17与IL-25均参与黏膜免疫的炎症过程,但表达方式和作用可能不同，IL-25在胃肠道溃疡病人血清中的水平变化明显高于IL-17，提示在胃肠道黏膜免疫中IL-25可以较好的反映炎症反应的强弱和胃肠组织损伤程度。由此我们认为，黏膜免疫病患者血清中IL-25的水平测定，对于了解患者炎症程度、免疫功能、评价疗效和预后有重要的价值。
【参考文献】
1 Fiocchi C.Inflammatory bowel disease：etiology and pathogenesis.Gastroenterology，1998，115（1）：182-205.
2 S Fujino, A Andoh, S Bamba,et al.Increased expression of interleukin 17 in inflammatory bowel disease.Gut,2003,52:65-70.
3 Atsuhiro O, Akira A，Yoshio A.Neutralization of interleukin-17 aggravates dextran sulfate sodium-induced colitis in mice.Clin Immunol,2004,110：55-62.
4 Lee J, Ho W-H, Maruoka M, et al. IL-17E, a novel proinflammatory ligand for the IL-17 receptor homolog IL-17Rh1. J Biol Chem,2001,276:1660-1664.
5 Fort MM, Cheung J, Yen D, et al. IL-25 induces IL-4, IL-5, and IL-13,Th2-associated pathologies in vivo. Immunity,2001,15:985-995.
6 Yao Z, Fanslow WC, Seldin MF, et al. Herpes virus saimiri encodes a new cytokine, IL-17, which binds to a novel cytokine receptor. Immunity,1995,3:811-821.
7 Teunissen MB,Koomen CW,de Waal MR,et al.Interleukin-17 and interferon-gamma synergize in the enhancement of proinflammatory cytokine production by human keratinocytes.J Invest Dermatol，1998，111:645-649.
8 Ferretti S,Bonneau O,Dubois GR,et al.IL-17,produced by lymphocytes and neutrophils,is necessary for lipopoly-saccharide-induced airway neutrophilia: IL-15 as a possible trigger.J Immunol，2003，170:2106-2112.
9 Chakir J,Shannon J,Molet S,et al.Airway remodeling-associated mediators in moderate to serve asthma:effect of steroids on TGF-beta,IL-11,IL-17and type I,type III collagen expression.J Allergy Clin Immunol，2003，111:1293-1298.
10 Witowski J,Ksiazek K,Jorres A. Interleukin-17: a mediator of inflammatory responses. Cell Mol Life Sci，2004，61:567-579.
11 Kleinschek MA, Owyang AM, Joyce-Shaikh B.IL-25 regulates Th17 function in autoimmune inflammation.J Exp Med，2007，22;204（1）:161-170.
12 叶任高，陆再英.内科学.北京：人民卫生出版社，2004,384-392.
作者单位：110001 辽宁沈阳，中国医科大学免疫教研室