玄草健神片抗疲劳作用实验研究

　　【摘要】 目的  观察以玄驹和冬虫夏草为主要成分的中药复方制剂抗疲劳等药效作用，进一步选择并确定最佳用药剂量。 方法  将昆明雄性小鼠192只随机分为16组，灌胃给药（对照组灌胃蒸馏水）4周后，分别进行持续游泳、8000m以上高空低压缺氧及跳台实验。 结果  各给药组游泳时间和高空耐缺氧时间均比正常对照组延长，跳台错误次数均比模型对照组明显减少。综合各项试验结果，复方玄草高剂量组更为理想，最终选择了该配方制成玄草健神片。 结论  玄草健神片具有较好的抗疲劳、耐缺氧和改善学习记忆功能的作用。

    The effects of Xuancao complex tablets on anti-fatigue in mice

    Gu Shuncai，Wang Zhong，Han Yanli，et al.

    The Institute of Aviation Medicine，Air Force，Beijing100036.

    【Abstract】 Objective To investigate the anti-fatigue effects of the Chinese medicine complex which in-cludes Ant and Aweto etc，and further to determine the only dosage.Methods 192Kunming mice were randomly di-vided into sixteen groups.After being given orally medicine or distilled water for4weeks，the sixteen groups of mice were respectively experienced swimming，over8000m hypobaric hypoxia or jumping stand test.Results The time of swimming and the live time of hypobaric hypoxia in medicine groups were longer than that of the control group.Com-pared with the model group，the error times of medicine groups decreased signally.According to the experimental re-sults，we choosed the high dose of Xuancao complex as the final dosage，and it was made Xuancao complex tablet.Conclusion The Xuancao complex tablet has good effects on anti-fatigue，tolerance of hypoxia and improving the study ability of mice.

    【Key words】 Xuancao complex tablets anti-fatigue tolerance of hypoxia

    玄草健神片为我所研制的以玄驹和冬虫夏草为主要原料的内部制剂（总联制字（2004）FP46001号），本制剂主要用于抗疲劳、提高高空缺氧耐力和改善记忆力。我们对本配方的不同剂量进行了优选，现将药效学实验结果总结报告如下。

    1 材料与方法

    1.1 动物 昆明雌性小鼠（二级，18～22g，动物合格证号:01-3024），购自军事医学科学院实验动物中心。

    1.2 药品 实验用药由我所制剂室自制，由玄驹、冬虫夏草、淫羊藿、丹参、桑椹子、首乌、绞股蓝等组成，其中玄驹来源于广西横县山区的昆虫纲膜翅目蚁科双翅多刺蚁，冬虫夏草为青海产鳞翅目蝙蝠科冬虫夏草，其它中药材均购自北京市药材公司，符合中国药典2000年版标准。阳性对照组所用药品为相当于玄草复方高剂量组用量的单味冬虫夏草提取物。正常对照组服用蒸馏水。造成记忆障碍用药为氢溴酸东莨菪碱注射液（上海禾丰制药有限公司，批号:990601）。

    1.3 仪器 恒温游泳槽、动物低压舱、小鼠跳台实验装置。

    1.4 动物分组及给药 各项实验将动物随机分为正常对照组、阳性对照组、复方玄草高剂量组、复方玄草中剂量组、复方玄草低剂量组，小鼠跳台实验增加模型对照组。共计16组，每组12只动物。各组均用药30天，每天1次，每次 0.5ml/只。正常对照组和模型对照组每天灌胃蒸馏水，阳性对照组每天灌胃虫草提取液，复方玄草高、中、低剂量组分别灌胃不同浓度的复方玄草提取液，用药结束后分别实验。跳台实验除正常对照组外，其它各组的每只动物均腹腔注射东莨菪碱（Sigma）3mg/kg，30min后进行跳台学习实验。

    1.5 实验方法

    1.5.1 小鼠游泳实验 ［1］  游泳槽内各玻璃缸均加水至水深30cm，水温保持30℃，各组取10只动物，分别放入玻璃缸中，各组每缸每次2只动物，每只小鼠尾部负重1g，记录动物沉入缸底再不能浮起的连续游泳时间。

    1.5.2 动物低压舱实验 ［2］  以玻璃缸为容器分别标记，各组取10只动物，每次每缸3只小鼠，5组小鼠同时放入动物低压舱内，先以30m/s的速度减压上升，达到8000m高度时停留5min，然后以10m/s的速度继续上升，每上升1000m停留5min，观察记录小鼠死亡（呼吸停止）时间。

    1.5.3 小鼠跳台实验 ［3］  小鼠跳台实验装置为四个长方形反射箱，大小均为10cm×10cm×60cm，箱底部由间距为0.5cm的不锈钢条组成，箱后角放置一4.5cm×4.5cm×4.5cm的橡胶平台，电击强度由一变压器控制。实验时将小鼠置于平台上，当小鼠跳下平台时，则遭到45V电压惩罚。多数动物受到电击后，可能再次或多次跳到不锈钢网栅上，受到电击后又迅速跳回平台，4min后取出动物。24h后，进行重复测试，记录5min内动物跳下平台的次数（错误数）。

    1.6 统计学方法 实验数据用SAS软件或Mann-Whitney U非参数法进行方差分析。

    2 结果

    2.1 冬虫夏草及其复方对小鼠游泳实验的影响 结果见表1。实验表明，各用药组小白鼠游泳时间和对照组比较均明显延长。但并不存在明确的量效关系。

    2.2 冬虫夏草及其复方对小白鼠缺氧实验的影响 结果见表2。低压舱实验表明，复方玄草高剂量组和中剂量组作用相当，均能明显延长小鼠的存活时间。

    2.3 冬虫夏草及其复方对小鼠跳台实验的影响 结果见表3。实验表明，复方玄草高、中、低各剂量组均能明显改善东莨菪碱所导致的记忆障碍，尤其是高剂量组，可使小鼠记忆恢复至正常水平，说明本方有较好的抗精神疲劳作用。综合各项试验结果，复方玄草高剂量组在抗疲劳、耐缺氧和改善学习记忆各方面作用均较理想，最终选择了该配方制成玄草健神片。

    表1 小白鼠游泳实验结果 （略）注:用SAS软件统计分析，与对照组比较 ★ P<0.05

    表2 小白鼠低压舱缺氧实验结果 （略）注:用SAS软件统计分析。存活时间>21min（>11000m）或<7min（<9000m）不列入统计。与对照组比较 ★ P<0.05

    3 讨论

    祖国医学认为，劳倦、情志内伤或外感六淫可致肾、肝、脾、心等脏腑功能失调。肾为先天之本，肾精亏，则髓海空虚，头晕、耳鸣;肝主筋、主情志、主疏泄、为罢极之本，情志不畅、所欲不得，心理压力过大都可致肝气不畅;腰为肾之腑，膝为筋之汇，肝肾不足，故腰膝酸软;脾为后天之本，气血生化之源，脾失健运，则清阳不升，浊阳不降，四肢肌肉失养，故见四肢酸痛无力、头晕头痛、食欲不振;心藏神，主血脉，劳神过度，精血暗耗，心血不足，则心补失养，故见失眠、 

    表3 小白鼠跳台实验结果 （略）注:本组实验数据用Mann-Whitney U非参数检验法统计分析。与东莨菪碱模型对照组比较 ★ P<0.05， ★★ P<0.01;与正常对照组比较 ▲▲ P<0.01健忘、心慌、气短。劳则气耗，劳神劳力都会耗伤人体正气，产生脑力和体力的过度疲劳。故认为，增强体质、防治过度疲劳，解决肾、肝、脾、心等脏腑功能失调是关键。现代研究证实，补脾益肾中药在促进长期大运动量训练与机体免疫功能恢复方面有显著作用 ［4］ ;补肾益元方可提高机体细胞免疫功能并在一定程度上拮抗大强度运动引起的细胞和体液免疫功能降低 ［5］ ;扶正理气中药能使大鼠运动后肝糖原含量提高 ［6］ 。这些研究结果与传统中医药理论非常吻合。本方中玄驹入药已有悠久历史 ［7，8］ ，具有温补肝肾、益气养血、荣筋坚骨、祛瘀通络之功效，是为君药。冬虫夏草补肺益肾;淫羊藿补肝肾、强筋骨;制首乌补肝肾、益精血，共为臣药。丹参活血通络，清心除烦;桑椹子滋阴补血，生津润燥;绞股兰益气健脾，养心安神，共为方中佐药。诸味配伍正应张景岳所论“善补阳者，必须阴中求阳，则阳得阴助而生化无穷”。方中诸药共奏温补肝肾、益气健脾、养心安神、和血通络、强筋壮骨、消除疲劳之功效。本实验证明了玄草健神片抗疲劳、耐缺氧、改善记忆力的作用，符合扶正气、益肾气、强筋骨的中医理论。其明显的抗体力及精神疲劳、增强缺氧耐力等功能，对体虚乏力、精神不佳等症有较好的预防和治疗作用。

    参考文献

    1 Beaton J R，FelekiV.The effect of nutritional state on ability of the rat to swim to exhaustion.Canad J Physiol Pharmacol，1966，44:597-603.

    2 肖爱珍，王忠，谷顺才，等.芦荟及其复方制剂的抗疲劳作用.航空军医，2003，31（6）:249-250.

    3 徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学.第二版.北京:人民卫生出版社，1994，660.

    4 郭建军，邓静.补脾益肾中药有助于长期大运动量训练大鼠免疫功能的恢复.中国运动医学杂志，2000，19（4）:362.

    5 周志宏，石幼琪.补肾益元方对运动小鼠抗疲劳能力的影响.中国运动医学杂志，2001，20（1）:83.

    6 徐晓阳，张爱芳.扶正理气中药对大强度耐力训练大鼠糖代谢某些指标的影响.中国运动医学杂志，1998，17（3）:220.

    7 明.李时珍.本草纲目（下）校点本.北京:人民卫生出版社，1982， 2288.

    8 邓明鲁.中国动物药.长春:吉林人民出版社，1981，175.

    作者单位:100036北京航空医学研究所