巯基蛋白酶抑制肽C在检测肾功能中的应用价值

巯基蛋白酶抑制肽C（cystatin C）是一种小分子的蛋白质，自由滤过肾小球，在近端肾小管全部重吸收并分解。血清cystatin C能够敏感准确地反映GFR ^［1，2］ 。本课题通过测定50例血清cystatin C，并与血清肌酐对照，以探讨血清cys_ˉtatin C在临床中的应用价值。本课题旨在探讨应用全自动生化分析仪测定cystatin C的方法，并比较血清cystatin C与血清肌酐在反映GFR中的优缺点，以期指导临床应用。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 主要仪器 日本产Hitachi7170A型全自动生化分析仪，离心机。

1.1.2 试剂盒 cystatin C PET试剂盒（美国DAKO公司），肌酐试剂盒。

1.2 方法

1.2.1 研究对象 总受试人数68例，其中健康志愿者20例，男12例，年龄36.3±9.5岁，女8例，年龄34.3±10.6岁，均排除心、肝、肾等疾患;患者48例，男26例，女20例，均为内科住院病例，患病情况如下:急性肾炎2例，慢性肾炎11例，原发性肾病综合征4例，急性肾功能衰竭3例，慢 性肾功能衰竭28例。根据矫正肌酐清除率将患者分成3组:Ⅰ组（n=20）:Ccr≥80ml/（min·1.73m ² ），Ⅱ组（=26）:Ccr25～80ml/（min·1.73m ² ），Ⅲ组（n=22）:Ccr≤25ml/（min·1.73m ² ）。

1.2.2 实验方法 （1）标本收集:清晨空腹收集病人静脉血3ml。2000转/min，离心20min，分离血清置-24℃冰箱待测。（2）测定方法:血清cystatin C用颗粒增强透射免疫比浊法。血清肌酐用肌氨酸氧化酶-PAP法。均用Hitachi7170A型全自动生化分析仪测定。计算内生肌酐清除率（creatinine clearance rate，Ccr）:Ccr=Ucr×V/Scr，式中V为尿量，单位ml/min。根据患者的身高、体重求得体表面积，再按标准体表面积1.73m 2 计算矫正肌酐清除率。

1.3 统计学处理 采用SPSS软件统计，t检验、直线相关分析，P<0.05为差异具有显著性。

2 结果

（1）血清cystatin C、Scr、Ccr测定结果见表1，Ⅰ组与健康人的血清cystatinC浓度差异无显著性（P>0.05）。而Ⅱ组较Ⅰ组、Ⅲ组较Ⅱ组、Ⅳ组较Ⅲ组病人的血清cystatin C浓度均差异具有显著性（P<0.001），呈明显的阶梯状。

表1 血清cystatin C、Scr及Ccr测定结果

注: ˇˇ 为相邻两组比较，P<0.001

（2）血清cystatin C和Scr浓度相关性良好（r=0.87）。

（3）Ccr与cystatin C的相关性（r=0.76）显著优于Ccr与Scr的相关性（r=0.63），各组相关关系均有统计学意义（P<0.05）。

3 讨论

在临床中，血清肌酐一直被用来作为检测肾小球滤过功能的指标，但不是一个敏感的标志物，只有当GFR降低到正常的1/3以下时，血清肌酐才明显升高，不能很好的反映肾功能。血清肌酐的这些缺点促使人们致力于寻找更好的监测GFR的标志物。Cystatin C是一种小分子量的蛋白质，分子量为13.26KDa ^［3］ ，它是一种半胱氨酸蛋白酶抑制剂，属cystatin家族成员，所有的有核细胞均可分泌。其产生量恒定。它可自由通过肾小球滤过膜，并全部由近端肾小管上皮细胞重吸收和代谢。作为GFR的标志物，血清cystatin C的敏感性和特异性均优于血清肌酐。但由于以前测定cystatin C的EIA和SRID等方法复杂且费时，因而未广泛应用于临床 ^［3］ 。检测cystatin C同临床上测定肌酐一样 完全自动化，可大批量测定，测定迅速，每批可检测120份标本，10min左右即可测定一批，紧急标本可马上得到结果，用全自动生化分析仪检测血清cystatin C简便可靠，一般医院即可做到，适于临床常规应用。

本研究检测了20例健康人的血清cystatin C水平，测得正常人血清cystatin C浓度为1.23±0.16mg/L，与文献报道一致 ^［4］ ，血浓度稳定。肾脏病患者的血清cystatin C随着Ccr的下降而升高，呈负相关，相关性显著优于Ccr与血清肌酐的相关性，r值分别为0.76和0.63。从总受试者的整体水平来看，血清cystatin C与血清肌酐相关性良好（r=0.87），使其可能成为GFR的新的内源性标志物 ^［5］ 。

在临床应用中，用血清cystatin C监测肾小球滤过率优于Scr。Scr的浓度范围跨度大，且影响因素较多，而血清cystatin C由于浓度稳定，范围较窄，不受年龄、身高、体重、性别的影响，能够准确地反映肾小球滤过率。血清cystatin C监测肾小球滤过率不用考虑炎症、药物及饮食的影响，增加了诊断及监测的可靠性。随着新治疗方法出现，如新药的临床应用，肾移植、心脏移植及透析等，血清cystatin C较Scr更快、更准确、更简单，为治疗提供可靠依据。因此在临床中血清cystatin C有广泛的前景。

血清cystatin C作为GFR的标志可能较Scr更敏感，且不受年龄、性别的影响，是一种理想的反映肾小球滤过率的标志物。有广泛的应用前景。

参考文献

1 Grubb A.Diagnostic value of analysis of cystatin C and proteain HC in biological fluids.Clin Nephrol，1992，38（suppl1）:20-27.

2 Andersen KJ，Schmidt C，Nordin G，et al.Serum cystatin C，determined by a rapid，automated particle-enhanced turbidimetric method，is a bet_ˉter marker than serum creatinine for glomerular filtration rate.ClinChem，1994，40（10）:1921-1926.

3 Grubb A.Lofberg H.Humanγ-trace，a basic microprotein:amino acid sequence and presence in the adenohypophysis.Proc Natl Acad Sci USA，1982，79:3024-3027.

作者单位:272029山东省济宁医学院附属医院肾内科