胸腺五肽联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎疗效分析

   【摘要】 目的 观察胸腺五肽联合乙肝疫苗治疗慢性乙型肝炎的疗效。方法 应用时间分辨免疫荧光分析法检测胸腺五肽联合乙肝疫苗治疗组、单用乙肝疫苗治疗组、单用胸腺五肽组、一般护肝组治疗前后乙肝病毒标志物滴度的变化。结果 胸腺五肽联合乙肝疫苗组HBsAg、HBsAb、HBeAg滴度较其他组差异有显著性（P<0.05），HBeAb差异无显著性（P>0.05）;联合组治疗后HBV-DNA阴转率与单用乙肝疫苗治疗组、单用胸腺五肽组差异无显著性（P>0.05），与一般治疗组的差异有显著性（P<0.05）。结论 胸腺五肽联合乙肝疫苗有明显降低HBsAg、HBeAg和升高HBsAb的作用，是治疗慢性乙型肝炎有效的治疗方法。

　　关键词 胸腺五肽 乙肝疫苗 慢性乙型肝炎 时间分辨免疫荧光分析

　　 Analysis on therapeutic effectiveness of thymopentin combination with  hepatitis B vaccine on patients suffered from chronic hepatitis

　　B   He Xing’e，Tang Xianming，Wang Gufeng，et al.

　　Liver Disease Research Center，The Second Xiangya Hospital of Central South University，Changsha410011.

　　【Abstract】 Objective To observe therapeutic effectiveness of Thymopentin combined with hepatitis B vaccine on patients suffered from chronic hepatitis B（CHB）.Methods To detect the alteration of HBV-M tite of Thyˉmopentin combinated with hepatitis B vaccine、single hepatitis B vaccine or Thymopentin and regular treatment group by time-reolved fluoroimmunoassay（TRF）.Results HBsAg、HBsAb、HBeAg tite of Combination group had deˉcreased significantly compared with hepatitis B vaccine、Thymopentin and regular treatment group（P<0.05）;HBV-DNA negative rate of Combination group had increased significantly compared with regular treatment group（P<0.05）.Conclusion Thymopentin sombinated with hepatitis B vaccine which can significantly decrease HBsAg、HBeAg tite and increase HBsAb tite，is an effective therapy for chronic hepatitis B.

　　 Key words thymopentin hepatitis B vaccine Chronic hepatitis B time-resolved fluoroimmunoassay 

　　我国是慢性乙型肝炎病毒感染的高发地区，成人HBˉsAg携带率为10%以上。多年以来国内外学者一直致力于慢性乙肝抗病毒的研究，取得了不少进展，到目前仍无特效疗法。虽然α-干扰素、拉米呋定等抗病毒药物作用已被公认，但其毒副作用多，特别对一部分长期处于“免疫耐受”的乙肝病人无明显疗效。胸腺五肽（Thymopentin）与胸腺素α 1 都是胸腺分泌的激素，具有双向免疫调节功能。近年来用胸腺五肽治疗乙肝的报道较多，并取得了一定疗效。但是用胸腺五肽与乙肝疫苗联合治疗乙肝的报道极少。笔者结合多年临床实践，采用此方法治疗，观察其免疫调节，抗乙肝病毒效果。在应用腺腺五肽与乙肝疫苗联合治疗乙肝的试验中，发现该方法治疗效果满意，对HBV-M有明显的影响，现收集其治疗经过予以介绍。

　　1 材料和方法

     1.1 病例选择 全部病例均为本科部分门诊就医的HBˉsAg阳性，HBeAg阳性慢性乙型肝炎患者，诊断均符合2000年病毒性肝炎会议修订标准 ［2］  。胸腺五肽联合乙肝疫苗治疗组54例中，男40例，女14例，年龄18～56岁，平均年龄31岁;单用乙肝疫苗治疗组34例，男28例，女6例，年龄16～52岁，平均年龄32岁;单用胸腺五肽组27例，男  18例，女9例，年龄16～53岁，平均年龄29岁;一般护肝组33例，男24例，女9例，年龄15～51岁，平均年龄35岁。4组病人治疗前肝肾功能等主要临床资料比较，差异均无显著性，具有可比性。

　　1.2 TRF法检查HBV-M 试剂为上海新波生物技术有限公司产品，采用Anytest2000时间分辨仪，严格按产品说明书操作。乙型肝炎病毒标志物（HBV-M）是反应病情的重要指标，临床工作中一般采用酶联免疫吸附法（ELISA）检测HBV-M，而ELISA是一个定性方法，易出现假阴性结果。本研究采用的时间分辨免疫荧光分析法（TRF），是定量检测法，具有高敏感性、特异性强、无放射污染等特点 ［1］  ，能够更精确的动态观察HBV-M滴度的变化。

　　 1.3 HBV-DNA含量测定 采用实时荧光定量PCR法，试剂盒购自广州中山医科大学达安基因诊断中心。仪器为美国Perkin Elmer公司GeneAmpPE5700型PCR仪，严格按产品说明书操作，检测灵敏度为10 3 拷贝/ml。

　　1.4 材料 胸腺五肽由海南中和药业有限公司制药厂生产（1mg/支），乙肝疫苗由卫生部北京生物制品研究所生产（10μg/支）。

     　1.5 治疗方法 （1）胸腺五肽联合乙肝疫苗治疗组:胸腺五肽注射液1mg肌内肉注射，初始20天，每天1次;继后隔日1次，疗程5个月;乙肝疫苗30μg，上臂三角肌肌肉注射，每20天1次，疗程5个月。（2）单用乙肝疫苗30μg，上臂三角肌肉注射，初始20天，每天1次，继后隔日1次，疗程5个月。（3）单用胸腺五肽组:胸腺五肽注射液1mg肌肉注射，初始20天，每天1次，继后隔日1次，疗程5个月。（4）一般护肝组治疗组:均口服维生素等一般药物护肝治疗。

    　1.6 观察指标 治疗前和治疗结束后行HBV-M的定量，HBV-DNA（PCR）检测。

   　 1.7 统计学分析 各组治疗前后均数比较用t检验，组间 比较采用X 2 检验，P<0.05表示有统计学差异有显著性。

　　2 结果

    　2.1 TRF检测HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb结果 联合组治疗前后比较HBsAg、HBeAg的滴度均明显下降，而保护性HBsAb却明显上升，差异有显著性（P<0.05），联合组治疗结果的好转程度优于其他组，结果差异有显著性（P<0.05），见表1。表1 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb结果 （略） 注:治疗后与治疗前比较 ˇ P<0.05， ˇˇ P<0.01，联合组与其他组比较P<0.052.2 HBV-DNA阴转率 HBV-DNA<10 3 /ml为阴性。联合组治疗后HBV-DNA阴转率与单用乙肝疫苗治疗组、单用胸腺五肽差异无显著性（P>0.05），与一般治疗组的差异有显著性（P<0.05）见表2 表2 HBV-DNA阴转率 （略）

    　2.3 不良反应 所有的病人在治疗期间均定期检测血尿常规和肝肾功能，没有发现任何毒副作用。

　　3 讨论

　　现已证实，人体抗病毒免疫功能低下、免疫调节紊乱以及免疫耐受是造成慢性乙型肝炎病毒呈持续感染状态的重要原因，也是治疗上的一个难点。因此治疗慢性乙型肝炎的基本策略是提高宿主抗病毒的免疫功能。CHB抗病毒治疗，α-干扰素、拉米夫定等核苷类药物是目前临床上公认有效的药物。但是有效率也只有30%～60%，干扰素、拉米夫定各有一定的副作用，有其严格的适应证，处于免疫耐受状态的CHB患者效果差。而拉米夫定极易诱发HBV的变异株。因此，近年来临床上大多采用联合用药以克服单独抗病毒药的副作用。我们试用“胸腺五肽+乙肝疫苗”的联合疗法，在抗病毒打破免疫耐受方面确有一定疗效，可能与激活机体自身免疫的清除功能、打破机体的免疫耐受状态有关。联合组HBV-M的HBsAg、HBeAg的滴度均明显下 降，而保护性HBsAb滴度却明显上升，指标的改善程度均优于其他治疗组;所有用药患者在2个月左右查ALT正常，说明在治疗的同时能够在一定程度上保护肝功能。联合组治疗后HBV-DNA阴转率与其他组的差异性不明显，但有改善趋势，说明该治疗方法仍有一定抗病毒作用。胸腺五肽是胸腺生成素的有效成分，有资料显示其能使血液中超氧化物歧化酶含量升高，超氧负离子自由基含量显著下降的功能，此外还具有诱导T细胞分化作用，与T细胞特异受体结合，使细胞内cAMP水平上升，从而诱导一系列胞内反应，达到调节免疫功能的作用 ［3］  。提示其对抑制乙肝病毒复制有一定疗效，同时症状改善，肝功能ALT等好转，表明对改善肝脏炎症活动有一定作用。治疗中无明显不良反应，本文发现随疗程的延长，胸腺五肽对病毒抑制作用也相应提高。乙肝疫苗可通过“旁路”激活机体处于免疫耐受成或低下状态的免疫细胞，提高特异性免疫应答、刺激机体产生保护性抗体、清除血液内病毒，而病毒一旦进入宿主细胞内，抗体即失去作用 ［4］  。

　　因此，乙肝疫苗与胸腺五肽联合应用可增强其抗原性，通过免疫反应类型的改变，尽可能多地激活细胞免疫反应，能最终达到清除细胞内病毒和改善病情的目的。同时本研究应用TRF检测HBV-M是一定量检测，这样在治疗过程中我们能够精确的动态观察HBV-M滴度的改变，了解病情变化。

　　本实验表明上述联合疗法，在抗病毒、调节免疫、打破免疫耐受等方面确有一定疗效，同时未增加不良反应，值得临床应用。

　　参考文献

　　1 罗开忠，杨旭，苏先狮，等.时间分辩免疫荧光法检测乙型肝炎病毒标志物.中华肝病杂志，2003，11:569.

    　2 中华医学会传染病与寄生虫病分会、肝病学分会联合修订.病毒性肝炎防治方案.中华内科杂志，2001，40:62.

   　 3 蒋定文，李楚芳.胸腺五肽研究进展.国外医学·预防、诊断、治    疗用生物制品分册，1999，22:69.

　　4 邹中华，文志军，李振汉，等.134例乙肝疫苗加卡介苗治疗慢性乙型肝炎近期疗效分析.实用预防医学，2004，11:94.

 

ˇ 基金项目:国家自然科学基金项目（30371102） 作者单位:410011湖南长沙中南大学湘雅二医院肝病研究中心