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1 资料与方法
1.1 病例和标本 收集我院1996~2000年手术切除的肺癌标本104例,男61例,女43例,年龄37~68岁,平均46.2岁。按WHO肿瘤国际组织学新分类标准进行病理学分类,其中鳞癌46例(Ⅰ级10例,Ⅱ级24例,Ⅲ级12例);腺癌33例(Ⅰ级8例,Ⅱ级15例,Ⅲ例10例);小细胞癌10例,其它类型癌(大细胞癌、腺鳞癌、类癌、唾液腺型癌)15例。56例肺癌有淋巴结转移,48例肺癌无淋巴结转移。
1.2 方法 所有标本均经10%福尔马林固定,石蜡包埋,切片厚4μm。切片贴在涂有防脱的载玻片上,脱蜡至水,免疫组化标记采用S-P法 [3] 。所用抗体及试剂盒均购于迈新生物技术公司。切片在做免疫组化染色前先做组织抗原微波修复 [4] 。免疫组化主要步骤:0.3%过氧化氢甲醇室温下孵育10min,以阻断内源性过氧化物酶的活性;10%正常羊血清室温下孵育10min;一抗4℃过夜;生物素标记二抗室温下孵育10min;链霉菌抗生素-过氧化物酶溶液室温下孵育10min;0.03%DAB显色;苏木素复染。用PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判断 β-连环素定位于细胞膜,阳性细胞<10%为(-);阳性细胞>10%为(+)。1.4 统计学处理 采用χ 2 检验。
2 结果
β-连环素在肺癌中组织类型、临床病理分级、淋巴结转移与否的表达结果如表1所示。
结果显示β-连环素的阳性表达与肺癌组织类型无相关性(P>0.05)。淋巴结转移阳性表达与无淋巴结转移阳性表达有显著相关性(P<0.05),病理分级(腺癌、鳞癌)Ⅰ级阳性表达与Ⅱ级阳性表达、Ⅲ级阳性表达,结果显示也存在明显相关性(P<0.05)。
表1 β-连环素在肺癌中各项表达结果(略)
3 讨论
β-连环素是一种分子量约92000的细胞骨架蛋白,β-连环素的arm区域与E-cad的细胞质端结合,氨基端α-cat结合,α-cat再和肌动蛋白丝相连,形成E-cad/cats复合体而发挥细胞间粘附作用。国内外的一些研究显示,β-连环素的表达情况与许多肿瘤的浸润、转移有关。Bank-falvi等 [5] 发现乳腺癌的淋巴结转移的表达有明显相关性。李玉军等 [6] 发现β-连环素的表达与胰腺癌的转移显著相关。本研究中提示到β-连环素的阳性表达与肺上皮性恶性肿瘤无一定相关性。但分化低的其阳性表达越低,无淋巴结转移的阳性表达越高,有明显的相关性。进一步证实了β-连环素作为构成粘附连接的E-cad/cats复合体的细胞内重要成分,其被破坏可导致整个复合体结构破坏与功能障碍,而对上皮性肿瘤临床病理分级、浸润、转移有密切相关,因此检测β-连环素在肺癌的表达可作为判断肺癌的生物学行为和预后的重要指标。
参考文献
1 李文俊,吴人宪.β-连环素与肿瘤发生、浸润和转移.国外医学·分子生物学分册,2001,23:52-55.
2 Jawhari AU,Farthing MJ,Pigneatelli M.The E-cadherin/epidermal growth factor reversible contror of intercelluar adhesion and cell prolifer-ation.J Pathol,1999,187:155-157.
3 Shi ZR,Itzkowitz SH,Kim YS.A comparison of there immunoperosidase techniques for antigen detection in colorrectal carcinoma tissues.J His-tochem Cytochem,1998,36:317-321.
4 Shen JH,Lin YQ,Chen bin,et al.The expression and significance of MDR1gene product P-glycoprotein in colon cancer.Int J Med Cancer Therapy,2001,4:10-11.
5 Bankfalvi A,Terpe HJ,Breukelmann D,et al.Immunophenotyple and prognostic analysis of E-cadherin andβ-catenin exepression during breast carcinogenessis and tumor progression:acomparative study with CD44.Histopathology,1999,34:25-34.
6 李玉军,纪祥瑞.β-连环蛋白、细胞周期蛋白D1和c-myc表达与胰腺癌发生及生物学行为的关系.中华病理学杂志,2003,31:238-241.
作者单位:515031广东省汕头市中心医院病理科