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【摘要】 目的 探讨血清核苷二磷酸激酶A（NDPK-A）含量与浆细胞增生性疾病的相关性。 方法 应用酶联免疫吸附试验定量测定38例浆细胞增生性疾病患者［浆细胞白血病（PCL）患者4例，多发性骨髓瘤（MM）患者24例，Waldenstrom巨球蛋白血症（WM）患者4例，6例意义未明单克隆免疫球蛋白血症（MGUS）患者］和健康体检者20例血清NDPK-A含量。 结果 PCL、MM、WM、MGUS组和对照组血清NDPK-A含量分别为16.06±5.03μg/L，8.80±6.96μg/L，7.31±1.88μg/L，4.18±3.69μg/L和3.77±0.51μg/L;分别与对照组比较PCL、MM、WM组差异有非常显著性（P<0.05），MGUS组无统计学意义（P>0.05）。24例MM患者治疗前后NDPK-A含量分别为10.23±6.21μg/L，7.05±5.10μg/L，差异有显著性（P<0.001）。 结论 NDPK-A含量测定可作为辅助诊断浆细胞增生性疾病和疗效观察的指标之一。
【关键词】 核苷二磷酸激酶;浆细胞增生性疾病;酶联免疫吸附试验
Determination of serum NDPK-A in plasmacytosis and its clinical significance
WU Xin-zhong，HUANG Xian-zhang，HEWen-jun，et al.
Guangdong Provincal Hospital of TCM，Guangzhou510120，China
【Abstract】 Objective To investigate the relationship between the serum NDPK-A level and the diagnosis and prognosis judgement of plasmacytosis.Methods The serum NDPK-A concentration was detected by ELISA in20healthy people and38patients with plasmacytosis including4PCL patients，24MM patients，5WM patients and6MGUS patients.Results The serum NDPK-A concentrations of PCL group，MM group，WM group，MGUS group and controls were16.06±5.03μg/L，8.80±6.96μg/L，7.31±1.88μg/L，4.18±3.69μg/L，3.77±0.51，re-spectively.There were significant difference between PCL group，MMgroup，WMgroup and controls（P<0.05），re-spectively，but it was no difference between MGUS group and controls（P>0.05）.The serum NDPK-A concentra-tions of MM group before treatment and after treatment were10.23±6.21μg/L，7.05±5.10μg/L and were signifi-cant difference（P<0.001）.Conclusion NDPK-A level might be an index of diagnosis and prognosis judgement of plasmacytosis.
【Key words】 NDPK-A;Plasmacytosis;ELISA
Steeg等 ［1］ 于1988年分离鉴定出一种新的肿瘤转移抑制基因，命名为Nm23H1基因，其转录产物为核苷二磷酸激酶（NDPK-A），分子量17KD，NDPK的首要功能是通过催化核苷二磷酸（NDP）和核苷三磷酸（NTP）之间的磷酸基转移反应来维持细胞内的NTP浓度 ［2］ 。有研究表明NDPK是一种肿瘤转移相关蛋白，它的表达量与多种肿瘤的转移潜能呈负相关 ［3］ ，这一关系在肺癌、膀胱癌、乳腺癌、胃癌、卵巢癌等恶性肿瘤患者中尤为明显 ［4］ 。另外，NDPK是多种血液肿瘤的分化抑制因子，在体外可以抑制鼠和人髓系白血病细胞的分化，因而可以作为一种血液病的预后指标之一。有研究报道血清NDPK-A含量与白血病的预后相关，高NDPK-A含量的白血病患者预后差 ［5，6］ 。浆细胞增生性疾病包括多种，常见的有浆细胞白血病（PCL）、多发性骨髓瘤（MM）、Waldenstrom巨球蛋白血症（WM）、意义未明单克隆免疫球蛋白血症（MGUS）等，为了探讨不同浆细胞增生性疾病血清NDPK-A含量的变化与其诊断和预后之间的关系，笔者检测了不同浆细胞增生性疾病38例，现报道如下。
1 材料与方法
1.1 标本来源 全部病例均来自2003年5月～2005年5月广东省中医院血液科门诊和住院浆细胞增生性疾病患者，共38例，其中男16例，女22例;按浆细胞增生性疾病的诊断标准 ［7］ 分为PCL4例，MM24例，WM4例，MGUS6例。健康体检者20例。分别采取无抗凝管血液标本，分离血清后-70℃保存。
1.2 主要仪器和试剂 酶标仪（北京天石SM-3型）、超低温冰箱（日本三洋MDF-382E）和NDPK-A检测试剂盒 ［8］ （暨南大学生物医药研究开发基地研制并提供，原理为双抗体夹心酶联免疫吸附法）。
1.3 测定方法 待检血清1:10稀释后，取100μl加入预包被的酶标板，37℃湿盒中孵育1h后，洗涤液洗板5次，加入酶标二抗100μl/孔，37℃孵育1h，加入底物TMB，37℃显色15min，2mol/L H 2 SO 4 终止反应，酶标仪测定A450/630，同时制备标准曲线，计算各标本中NDPK-A含量。
1.4 统计学处理 不同浆细胞增生性疾病组血清NDPK-A含量与健康对照组比较用t检验，MM患者治疗前后NDPK-A含量比较用配对t检验。所有数据均在Excel2000和SPSS11.0软件包上进行。
2 结果
2.1 不同浆细胞增生性疾病患者血清NDPK-A含量 PCL、MM、WM和MGUS四类浆细胞增生性疾病患者血清NDPK-A含量见表1。
表1 不同浆细胞增生性疾病患者血清NDPK-A含量比较 （略）
2.2 MM患者治疗前后NDPK-A含量变化 24例MM患者治疗前、后血清NDPK-A测定结果见表2。另外，4例PCL患者均继发于MM，PCL患者血清中NDPK-A含量与治疗前MM患者比较差异有非常显著性（P<0.001）。
表2 24例MM患者治疗前后血清NDPK-A含量比较 （略）
3 讨论
PCL、MM、WM均为恶性浆细胞增生性疾病，而MGUS为一组病人血中存在M蛋白但含量<30g/L，骨髓中浆细胞比例<10%，能保持稳定3年以上且无MM、WM或其他相关疾病证据的疾病，以前曾称为良性单克隆丙球蛋白病，而WHO将MGUS作为MM的前驱疾病，长期随访，在确定有M蛋白后约10年，25%患者可发展为MM、WM、原发性淀粉样变等。本文的研究结果表明，PCL、MM、WM这3类恶性浆细胞增生性疾病患者血清NDPK-A含量明显高于正常人群，并且由MM转化来的PCL患者含量明显高于MM患者，而MGUS患者血清中NDPK-A含量和正常人群比，无明显差异。这初步提示NDPK-A含量测定可作为恶性浆细胞增生性疾病的辅助诊断指标之一。
由MM终末期发展而来的PCL预后较差，中位生存时 间少于1年，MM的中位生存时间为24～30个月，WM的中位生存时间约为60个月，而MGUS进展为MM或其它浆细胞病例或淋巴瘤的机率在5年内为5%，在10年内为15% ［9］ 。MM的预后与多种因素有关，其中年龄、浆细胞标记指数（PCLI）、细胞遗传学异常、CRP、外周血浆细胞数和浆细胞形态为独立性预后因素，它们在评价MM患者预后中的价值较大 ［10］ 。从我们的结果中可以看出，不同浆细胞增生性疾病的中位生存时间与NDPK-A含量之间有一定关系，由于病例数有限，NDPK-A能否作为MM和其它浆细胞增生性疾病的独立预后因素，我们将增加病例数，做进一步深入研究。
【参考文献】
1 Steeg P.S，Bevilacqus G，Kopper L，et al.Evidence for a novel gene associated with low tumor metastatic potential.J Natl Cancer Inst，1998，80（3）:200-204.
2 Berg P，Joklik WK.Transphosphorylation between nucleoside polyphos-phates.Nature，1953，172（4387）:1008-1009.
3 Biggs J，Hersperger E，Steeg PS et al.A Drosophila gene that is ho-mologous to a mammalian gene associated with tumor metastasis codes for a nucleoside diphosphate kinase.Cell，1990，63（5）:933-940.
4 Roymans D，Willems R，Van Blochstaele D R，et al.Nucleoside diphosphate kinase（NDPK/NM23）and the waltz with multiple part-ners:possible consequences in tumor metastasis.Clinical and Experi-mental Metastasis，2002，19（16）:465-476.
5 Niitsu N，Okabe-Kado J，Nakayama M，et al.Plasma levels of the differentiation inhibitory factor NM23-H1protein and their clinical im-plications in acute myelogenous leukemia.Blood，2000，96（3）:1080-1086.
6 李海燕，刘洁生，王一飞.Nm23-H1与白血病和淋巴瘤的预后关系.生理科学进展，2003，34（1）:74-76.
7 张之南.血液病诊断及疗效标准，第2版.北京:科学出版社，1998，373-387.
8 熊盛，李雪玲，王一飞，等.血清核苷二磷酸激酶A（NDPK-A）含量测定及其临床意义初探.中国卫生检验杂志，2004，14（5）:522-523.
9 朱平.现代血液肿瘤诊断治疗学.北京:北京医科大学、中国协和医科大学联合出版社，1999，394-403.
10 王婷婷，徐剑，杨仁池.多发性骨髓瘤的预后相关因素.中华血液学杂志，2003，24（10）:555-557.
作者单位:1 510120广东广州，广东省中医院检验科
2 510630广东广州，暨南大学生物医药研究开发基地
（编辑:罗 彬）