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【摘要】 目的 针对实验室常规检测霉菌阳性率不高的现状，力求找到一种更加准确的检测方法。方法 对盐水湿片法、亚甲蓝（美蓝）染色法、革兰染色法三种方法做常规对比分析。结果 革兰染色法和亚甲蓝染色法均较满意，阳性率明显超出常规湿片法。结论 推荐亚甲蓝染色法取代常规盐水湿片法。
【关键词】 阴道分泌物；霉菌；革兰染色法；亚甲蓝
实验室诊断阴道霉菌一般采用生理盐水湿片法，由于真菌形态及背景等因素的影响，常使镜检阳性率过低，极易发生误诊、漏诊。许多实验室另行采用其他更加准确的方法。笔者从中选取了其中两种：亚甲蓝溶液染色法、革兰染色法，对362例阴道分泌物标本进行了对比分析。
1 材料与方法
1.1 试剂 1ｇ/L亚甲蓝溶液；50g/L氢氧化钠溶液；生理盐水；革兰染色试剂盒。
1.2 标本来源 2001年以来本院妇科门诊疑诊阴道炎病人的阴道分泌物标本362例。
1.3 方法
(1）常规盐水湿片法［1］：取阴道分泌物与少许生理盐水混合涂片镜检，必要时加一滴2.5mmol/L KOH溶液。
(2)亚甲蓝溶液染色法：用1ｇ/L亚甲蓝溶液1～2滴将阴道分泌物稀释后再滴加50ｇ/L氢氧化钠1～2滴，轻摇玻片充分混匀，湿片镜检。
（3）革兰染色法：将阴道分泌物标本直接涂在一干燥玻片上制成一均匀薄膜，火焰上稍加固定，进行革兰染色，镜检。
2 结果
362例标本中，生理盐水湿片法检出霉菌49例，阳性率14％;亚甲蓝染色法检出霉菌65例，阳性率18％;革兰染色法检出霉菌68例，阳性率19％。
3 讨论
霉菌性阴道炎为妇科常见病，病原体多为白色念珠菌和小球类酵母菌，亦可为新型隐球菌等。实验室常规采用的盐水湿片法由于阴道上皮细胞核及上皮细胞膜的卷曲、各种成分的重叠遮掩、涂片背景不清以及霉菌芽生孢子等原因，常使霉菌检测难以辨别。亚甲蓝染色法和革兰染色法对霉菌的检出率均明显高于生理盐水湿片法。原因可能在于：（1）亚甲蓝染色可使霉菌的芽生孢子和假菌丝均被染上蓝色［2］，形态典型突出。阴道上皮细胞、白细胞着浅蓝色，胞核紫蓝色，细胞内可见颗粒。各种着色成分颜色清晰，形态清楚、直观，易辨别。加氢氧化钠可破坏脓细胞、上皮细胞、黏液丝等有形成分，丝霉菌易检出。（2）革兰染色［3］时，芽生孢子、假菌丝等均可被染成革兰阳性—紫色，便于和背景区别。
笔者在此推荐常规检测时采用亚甲蓝染色法取代盐水湿片法，之所以不采用革兰染色法，因为它耗时长，操作复杂，不及亚甲蓝染色法便捷，而检测效果大致相当。
【参考文献】
1 魏明竟.临床检验学.北京：科学技术文献出版社，1994，287.
2 梅丽玲.亚甲蓝溶液检测阴道霉菌的临床应用.临床检验杂志，2001，（2）：119.
3 刘运德.微生物学检验.北京：人民卫生出版社，2003，371.
作者单位：1 266326 山东胶州，胶州市第二人民医院检验科 2 山东诸城，诸城市瓦店中心卫生院